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筛选一种橘皮化合物5-ATAN对MCF-7的凋亡作用及其机制研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-12页
第一章 前言第12-16页
   ·橘皮化合物的简介第12页
   ·抗炎作用第12-13页
   ·抗癌作用第13-14页
     ·细胞周期阻滞第13页
     ·抑制增殖,促凋亡第13页
     ·作为化疗辅助药物第13-14页
     ·抗肿瘤转移第14页
   ·抗动脉粥状硬化第14页
   ·神经保护第14-15页
   ·讨论第15页
   ·本课题研究主要内容和目标第15-16页
第二章 橘皮提取物中活性物质对 MCF-7 细胞的细胞存活率的影响第16-23页
   ·实验材料第16-17页
     ·细胞株第16页
     ·主要试剂第16页
     ·橘皮化合物第16页
     ·主要试剂缓冲液的配制第16-17页
     ·细胞培养耗材第17页
     ·主要仪器设备第17页
   ·实验方法第17-20页
     ·细胞复苏第17页
     ·细胞传代第17-18页
     ·细胞冻存第18页
     ·细胞计数第18页
     ·细胞处理方法第18-19页
     ·细胞存活率检测(MTT 法)第19页
     ·IC_50计算方法第19-20页
   ·实验结果第20-22页
   ·讨论第22-23页
第三章 橘皮提取物 5-ATAN 对 MCF-7 细胞生殖和凋亡的影响第23-34页
   ·实验材料第23-26页
     ·细胞株第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要试剂缓冲液的配制第23-25页
     ·细胞培养耗材第25页
     ·主要仪器设备第25-26页
   ·实验方法第26-29页
     ·细胞处理方法第26页
     ·细胞基因组 DNA 的提取第26页
     ·DNA Ladder 检测 DNA 断裂第26-27页
     ·DAPI 染色法检测凋亡小体第27页
     ·细胞总蛋白的提取第27页
     ·免疫印迹法(WesternBlot)检测细胞中蛋白水平第27-28页
     ·单细胞凝胶电泳(彗星电泳)第28-29页
   ·实验结果第29-32页
     ·5-ATAN 对 MCF-7 细胞形态的影响第29-30页
     ·5-ATAN 介导 MCF-7 细胞凋亡第30-31页
     ·5-ATAN 抑抑制 MCFF-7 增殖的关键标标志物第31-32页
     ·5-ATAN 与 TAN 对 MCF-7 细胞凋亡影响的对比第32页
   ·讨论第32-34页
第四章 5-ATAN 对 MCF-7 细胞 Caspase 依赖和 Caspase 非依赖的细胞凋亡信号通路的影响第34-39页
   ·实验材料第34页
     ·细胞株第34页
     ·主要试剂第34页
     ·主要试剂缓冲液的配制第34页
     ·细胞培养耗材第34页
     ·主要仪器设备第34页
   ·实验方法第34-35页
     ·细胞处理方法第34-35页
     ·细胞总蛋白的提取第35页
     ·免疫印迹法(WesternBlot)检测细胞中蛋白水平第35页
     ·免疫荧光法检测细胞中蛋白的定位第35页
   ·实验结果第35-38页
     ·5-ATAN 介导 MCF-7 细胞 Caspase 依赖的细胞凋亡信号通路第35-36页
     ·5-ATAN 介导 MCF-7 细胞 Caspase 非依赖的细胞凋亡信号通路第36-38页
   ·讨论第38-39页
第五章 5-ATAN 对 MCF-7 细胞 Caspase 依赖的外源性细胞凋亡信号通路的影响第39-42页
   ·实验材料第39页
     ·细胞株第39页
     ·主要试剂第39页
     ·主要试剂缓冲液的配制第39页
     ·细胞培养耗材第39页
     ·主要仪器设备第39页
   ·实验方法第39页
     ·细胞处理方法第39页
     ·细胞总蛋白的提取第39页
     ·免疫印迹法(WesternBlot)检测细胞中蛋白水平第39页
   ·实验结果第39-40页
     ·5-ATAN 对 MCF-7 细胞 Caspase 依赖的外源性细胞凋亡标志物的影响第39-40页
   ·讨论第40-42页
第六章 5-ATAN 对 MCF-7 细胞 Caspase 依赖的内源性细胞凋亡信号通路的影响第42-48页
   ·实验材料第42页
     ·细胞株第42页
     ·主要试剂第42页
     ·主要试剂缓冲液的配制第42页
     ·细胞培养耗材第42页
     ·主要仪器设备第42页
   ·实验方法第42-44页
     ·细胞处理方法第42页
     ·细胞总蛋白的提取第42页
     ·细胞线粒体蛋白和细胞质蛋白的分离第42-43页
     ·BCA 蛋白定量法测定蛋白浓度第43页
     ·免疫印迹法(WesternBlot)检测细胞中蛋白水平第43页
     ·JC-1 法检测细胞线粒体膜电位第43-44页
   ·实验结果第44-46页
     ·5-ATAN 介导 MCF-7 细胞 Caspase-9 的活化第44页
     ·5-ATAN 介导的细胞色素 C 的释放第44-45页
     ·5-ATAN 介导 MCF-7 细胞线粒体膜电位的变化第45页
     ·5-ATAN 介导线粒体相关的促进凋亡蛋白和抑制凋亡蛋白比例的变化第45-46页
     ·5-ATAN 介导 MCF-7 细胞凋亡信号通路的确定第46页
   ·讨论第46-48页
结论与展望第48-50页
参考文献第50-55页
发表论文、参加科研情况说明第55-56页
致谢第56-57页

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