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普洱茶汤降低芽孢杆菌肠毒素基因表达以及预防小鼠结肠炎的作用研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
缩略语索引第11-12页
第1章 绪论第12-18页
    1.1 普洱茶发酵相关微生物的研究第12-13页
        1.1.1 微生物类群的变化第12页
        1.1.2 优势菌株的作用第12-13页
    1.2 普洱茶中微生物安全性研究第13页
        1.2.1 细菌第13页
        1.2.2 真菌第13页
    1.3 普洱茶保健功效概述第13-15页
        1.3.1 减肥降脂功效第13-14页
        1.3.2 降血脂、降血糖功效第14页
        1.3.3 抗肿瘤功效第14页
        1.3.4 抗氧化、抗衰老功效第14-15页
        1.3.5 护齿功效第15页
        1.3.6 其他功效第15页
    1.4 溃疡性结肠炎概述第15-16页
        1.4.1 溃疡性结肠炎与肠道微生态菌群第15-16页
        1.4.2 溃疡性结肠炎预防和治疗的手段第16页
    1.5 茶与肠道菌群第16-17页
    1.6 茶对UC研究进展第17页
    1.7 研究目的和意义第17-18页
第2章 普洱茶中微生物的筛选及其安全性初步评价第18-35页
    2.1 前言第18-19页
    2.2 材料与方法第19页
        2.2.1 材料第19页
        2.2.2 主要试剂、耗材和仪器第19页
        2.2.3 培养基的配制第19页
    2.3 实验方法第19-25页
        2.3.1 菌株分离和鉴定第19页
        2.3.2 蜡样芽孢杆菌耐受模拟胃肠液实验第19-20页
        2.3.3 蜡样芽孢杆菌毒力基因检测第20-21页
        2.3.4 细胞粘附实验第21-22页
        2.3.5 MTT测细胞活性第22-23页
        2.3.6 菌株RNA提取及cDNA合成第23-24页
        2.3.7 蜡样芽孢杆菌毒素基因在茶汤中的表达情况第24-25页
    2.4 数据处理第25页
    2.5 实验结果第25-34页
        2.5.1 普洱茶中微生物的筛选与鉴定第25-26页
        2.5.2 利用多重PCR检测蜡样芽孢杆菌毒力基因第26-27页
        2.5.3 蜡样芽孢杆菌芽孢耐模拟胃肠液能力第27-28页
        2.5.4 普洱茶对蜡样芽孢杆菌黏附Caco-2细胞的影响第28-29页
        2.5.5 普洱茶抑制蜡样芽孢杆菌对Caco-2细胞的损伤作用第29-32页
        2.5.6 普洱茶对蜡样芽孢杆菌毒素基因表达的影响第32-34页
    2.6 分析与讨论第34-35页
第3章 普洱茶水提物对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎影响第35-52页
    3.1 前言第35页
    3.2 材料与方法第35-36页
        3.2.1 实验材料第35页
        3.2.2 实验动物第35页
        3.2.3 实验耗材、试剂和仪器设备第35-36页
    3.3 实验方法第36-41页
        3.3.1 普洱茶汤对LPS刺激Caco-2细胞炎症的影响第36-38页
        3.3.2 动物实验第38页
        3.3.3 疾病活动指数(DAI)评分标准第38-39页
        3.3.4 结肠苏木精-伊红(HE)染色以及病理组织学评分第39页
        3.3.5 结肠中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1的表达第39-40页
        3.3.6 肠道通透性的检测第40-41页
        3.3.7 利用WestenBlot分析结肠中蛋白水平表达情况第41页
    3.4 数据统计分析第41页
    3.5 实验结果第41-51页
        3.5.1 普洱茶汤抑制LPS对Caco-2细胞的促炎作用第41-42页
        3.5.2 小鼠体重变化和DAI评分第42-44页
        3.5.3 小鼠结肠长度变化第44页
        3.5.4 普洱茶汤对DSS诱导小鼠结肠炎结肠组织学变化第44-46页
        3.5.5 普洱茶汤对DSS小鼠结肠细胞因子表达的影响第46-48页
        3.5.6 普洱茶汤对DSS诱导小鼠结肠炎肠道通透性的影响第48-49页
        3.5.7 普洱茶汤对p-p38和p-p65蛋白水平的影响第49-51页
    3.6 分析与讨论第51-52页
第4章 普洱茶汤对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的影响第52-68页
    4.1 前言第52-53页
    4.2 材料与方法第53页
        4.2.1 主要试剂、耗材及设备第53页
        4.2.2 实验动物第53页
    4.3 实验方法第53-54页
        4.3.1 动物实验第53页
        4.3.2 盲肠内容物DNA提取及IlluminaMiseq测序第53页
        4.3.3 生物信息分析第53-54页
    4.4 统计分析第54页
    4.5 实验结果第54-66页
        4.5.1 OTU聚类分析第54-55页
        4.5.2 OTU分布Venn图第55页
        4.5.3 Rank-Abundance曲线分析第55-56页
        4.5.4 稀释曲线分析第56-57页
        4.5.5 Alpha多样性分析第57-58页
        4.5.6 普洱茶汤对DSS诱导结肠炎小鼠的肠道菌群结构组成的影响第58-62页
        4.5.7 菌群Heatmap分析第62-63页
        4.5.8 Beta多样性分析整体菌群结构变化第63-65页
        4.5.9 LEfSe多级物种差异判别分析第65-66页
    4.6 分析与讨论第66-68页
第5章 结论与展望第68-70页
    5.1 结论第68-69页
        5.1.1 普洱茶汤中蜡样芽孢杆菌毒素基因的分布以及普洱茶对毒素基因表达的影响第68页
        5.1.2 普洱茶汤对DSS诱导小鼠结肠炎的预防作用第68-69页
        5.1.3 普洱茶汤对DSS诱导结肠炎小鼠肠道菌群的影响第69页
    5.2 展望第69-70页
致谢第70-71页
参考文献第71-79页
附录A 试剂第79-80页
附录B 仪器设备第80-81页
附录C 常用试剂的配制第81-82页
个人介绍第82页
获奖情况第82页
攻读学位期间的研究成果第82页

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