| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·概述 | 第10页 |
| ·蛋白酶在酿造过程中的来源 | 第10-11页 |
| ·蛋白酶 A 的生化特性 | 第11-14页 |
| ·蛋白酶的分泌途径 | 第12-13页 |
| ·蛋白酶 A 在液泡外的活性 | 第13-14页 |
| ·蛋白酶 A 的结构 | 第14-17页 |
| ·蛋白酶 A 的激活机制 | 第17-19页 |
| ·极端条件下微生物蛋白研究进展 | 第19-21页 |
| ·极端条件下的微生物蛋白质组学 | 第19-20页 |
| ·全局网络调控 | 第20页 |
| ·酵母高渗透压条件下的蛋白质研究 | 第20-21页 |
| ·本文主要内容 | 第21页 |
| ·本文研究的目的、意义及创新点 | 第21-23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·研究的创新点 | 第22-23页 |
| 第二章 酿酒酵母在不同生长条件下胞外蛋白酶 A 的研究 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验药品 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·不同培养条件下酵母的生长培养 | 第24-25页 |
| ·不同 pH 条件下酵母的培养 | 第24页 |
| ·不同温度条件下酵母的培养 | 第24页 |
| ·不同糖浓度条件下酵母的培养 | 第24-25页 |
| ·不同糖组分条件下酵母的培养 | 第25页 |
| ·不同糖组分与不同糖浓度条件下酿酒酵母菌株的生长量测定 | 第25页 |
| ·蛋白酶 A 的测定方法 | 第25-27页 |
| ·荧光底物的配制 | 第25页 |
| ·磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液的配制 | 第25页 |
| ·确定蛋白酶 A 分析的激发波长（λex）和发射波长（λem） | 第25-26页 |
| ·蛋白酶 A 测定原理和基本方法 | 第26-27页 |
| ·蛋白酶 A 标准曲线的确定 | 第27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-33页 |
| ·普通葡萄糖培养基生长条件下酵母胞外蛋白酶 A 的活力测定 | 第27-28页 |
| ·不同 pH 培养基生长条件下酵母胞外蛋白酶 A 的活力测定 | 第28-29页 |
| ·不同温度培养条件下酵母胞外蛋白酶 A 的活力测定 | 第29页 |
| ·不同糖浓度培养条件下酵母胞外蛋白酶 A 的活力测定 | 第29-30页 |
| ·不同糖组分在糖浓度分别为 2%和 20%培养条件下酵母菌株生长量测定以及酵母胞外蛋白酶 A 活力测定 | 第30-33页 |
| ·小结 | 第33-35页 |
| 第三章 高糖浓度下酿酒酵母提前分泌蛋白酶 A 酶原的研究 | 第35-44页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·实验菌株 | 第35页 |
| ·供试培养基 | 第35页 |
| ·荧光底物[2～6] | 第35页 |
| ·试剂配制 | 第35-36页 |
| ·实验仪器 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·酵母分泌蛋白酶 A 酶原的制备 | 第36页 |
| ·蛋白酶原收集洗脱条件 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第37页 |
| ·蛋白酶 A 测定的基本方法 | 第37页 |
| ·显微镜观察酵母细胞形态 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-43页 |
| ·不同糖浓度下酵母培养 16h 发酵液蛋白酶 A 活力测定 | 第37-38页 |
| ·Sephadex G-25 分离酵母在不同葡萄糖浓度下的分泌蛋白 | 第38-39页 |
| ·Sephadex G-75 分离酵母在高葡萄糖浓度下的分泌蛋白 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第39-40页 |
| ·分泌蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第39页 |
| ·分泌蛋白自主催化后的 SDS-PAGE 分析 | 第39-40页 |
| ·通过荧光手段确定分泌蛋白为蛋白酶 A 酶原 | 第40-41页 |
| ·显微镜观察酵母菌落形态 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 酿酒酵母胞外蛋白酶 A 在两种不同催化途径下的活性研究 | 第44-50页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·实验菌株 | 第44页 |
| ·供试培养基 | 第44页 |
| ·荧光底物 | 第44页 |
| ·试剂配制 | 第44-45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45页 |
| ·酿酒酵母培养 | 第45页 |
| ·蛋白酶 A 测定的基本方法 | 第45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-49页 |
| ·培养基糖浓度为 2%时酵母在不同 pH 条件下培养 40h 时蛋白酶 A 的活力测定 | 第45页 |
| ·培养基糖浓度为 20%时酵母在不同 pH 条件下培养 16h 时蛋白酶 A 的活力测定 | 第45-47页 |
| ·在糖浓度 2%的发酵液中加入蛋白酶 B 抑制剂（PMSF）后蛋白酶 A 的活力测定 | 第47页 |
| ·在糖浓度 20%的发酵液中加入蛋白酶 B 抑制剂（PMSF）后蛋白酶 A的活力测定 | 第47-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 硕士期间参与的科研项目及成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
