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绿豆蛋白酶解物的制备及其对NCTC1469细胞氧化损伤的保护作用

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第1章 引言第12-20页
    1.1 概述第12-13页
    1.2 绿豆蛋白研究现状第13-14页
        1.2.1 绿豆蛋白的提取方法第13页
        1.2.2 绿豆蛋白的功能特性及理化性质第13-14页
    1.3 绿豆生物活性肽的研究进展第14-18页
        1.3.1 绿豆生物活性肽的提取方法第14-15页
        1.3.2 绿豆多肽的功能特性及理化性质第15-16页
        1.3.3 绿豆活性肽的生物活性第16-17页
        1.3.4 自由基、氧化损伤与抗氧化剂第17-18页
    1.4 本研究的目的与意义第18-19页
    1.5 本研究的主要内容及创新性第19-20页
        1.5.1 主要内容第19页
        1.5.2 创新点第19-20页
第2章 绿豆蛋白制备工艺条件的优化第20-30页
    2.1 引言第20页
    2.2 仪器与试剂第20-21页
        2.2.1 仪器设备第20-21页
        2.2.2 材料试剂第21页
    2.3 实验方法第21-24页
        2.3.1 蛋白质含量测定第21-22页
        2.3.2 绿豆总蛋白的提取第22-23页
        2.3.3 提取率计算第23页
        2.3.4 响应面优化试验设计第23-24页
    2.4 数据分析第24页
    2.5 结果与讨论第24-29页
        2.5.1 绿豆总蛋白(MPI)提取条件的优化第24-25页
        2.5.2 模型拟合第25-27页
        2.5.3 响应面分析第27-28页
        2.5.4 模型的验证第28-29页
    2.6 本章小结第29-30页
第3章 绿豆蛋白的功能及理化性质研究第30-44页
    3.1 引言第30-31页
    3.2 仪器与试剂第31页
        3.2.1 仪器设备第31页
        3.2.2 材料试剂第31页
    3.3 实验方法第31-34页
        3.3.1 绿豆清蛋白的提取第31-32页
        3.3.2 溶解性第32页
        3.3.3 持水性第32-33页
        3.3.4 吸油性第33页
        3.3.5 乳化及乳化稳定性第33页
        3.3.6 起泡能力和稳定性第33页
        3.3.7 紫外光谱扫描第33页
        3.3.8 红外光谱扫描第33-34页
        3.3.9 圆二色谱分析第34页
        3.3.10 氨基酸分析第34页
    3.4 数据处理第34页
    3.5 结果与分析第34-43页
        3.5.1 蛋白含量及提取率第34-35页
        3.5.2 溶解性第35-36页
        3.5.3 持水性第36页
        3.5.4 吸油性第36-37页
        3.5.5 乳化性及乳化稳定性第37-38页
        3.5.6 发泡能力及发泡稳定性第38页
        3.5.7 紫外光谱分析第38-39页
        3.5.8 FT-IR第39-40页
        3.5.9 圆二色谱分析第40-41页
        3.5.10 氨基酸分析第41-43页
    3.6 本章小结第43-44页
第4章 绿豆蛋白酶解物的制备及其抗氧化活性研究第44-66页
    4.1 绪论第44-45页
    4.2 仪器与试剂第45-46页
        4.2.1 仪器设备第45-46页
        4.2.2 材料试剂第46页
    4.3 实验方法第46-51页
        4.3.1 绿豆蛋白酶解物的制备流程和方法第46-47页
        4.3.2 水解度的测定第47-48页
        4.3.3 三氯乙酸中可溶性氮含量(TCA-NSI)第48页
        4.3.4 绿豆蛋白及酶解物的基本成分分析第48页
        4.3.5 绿豆蛋白酶解物的分离纯化第48页
        4.3.6 绿豆蛋白酶解物得率的计算第48页
        4.3.7 紫外光谱与红外光谱分析第48-49页
        4.3.8 圆二色谱第49页
        4.3.9 SEM第49页
        4.3.10 粒度分析第49页
        4.3.11 氨基酸组成分析第49页
        4.3.12 抗氧化活性第49-51页
        4.3.13 血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性第51页
    4.4 数据处理第51-52页
    4.5 结果与讨论第52-64页
        4.5.1 蛋白酶的选择第52-53页
        4.5.2 基本成分分析第53-54页
        4.5.3 绿豆蛋白酶解物的含量第54页
        4.5.4 紫外光谱分析第54-55页
        4.5.5 FT-IR第55-56页
        4.5.6 圆二色谱第56-57页
        4.5.7 氨基酸分析第57-58页
        4.5.8 SEM分析第58-59页
        4.5.9 粒度分析第59-60页
        4.5.10 DPPH自由基的清除能力第60-61页
        4.5.11 羟基自由基的清除能力第61页
        4.5.12 超氧阴离子的清除能力第61-62页
        4.5.13 还原能力测定第62页
        4.5.14 Fe~(2+)螯合活性第62-63页
        4.5.15 ACE抑制活性第63-64页
    4.6 本章小结第64-66页
第5章 绿豆蛋白酶解物对NCTC1469细胞氧化损伤的保护作用第66-78页
    5.1 引言第66-67页
    5.2 仪器与试剂第67-68页
        5.2.1 仪器设备第67页
        5.2.2 材料试剂第67-68页
    5.3 实验方法第68-69页
        5.3.1 细胞培养第68页
        5.3.2 细胞毒性检测测定第68页
        5.3.3 H_2O_2诱导肝细胞氧化损伤的最佳浓度、时间的测定第68页
        5.3.4 CCK-8法测定细胞增殖活性第68页
        5.3.5 绿豆蛋白酶解物对细胞分泌的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的影响第68-69页
        5.3.6 还原型谷胱甘肽(GSH)含量的测定第69页
        5.3.7 ROS含量的测定第69页
    5.4 统计分析第69页
    5.5 实验结果与讨论第69-77页
        5.5.1 绿豆蛋白酶解物对NCTC1469细胞的毒性测定第69-70页
        5.5.2 H_2O_2诱导的肝细胞氧化损伤的最佳浓度、时间的测定第70-71页
        5.5.3 绿豆蛋白酶解物对H_2O_2诱导肝细胞氧化损伤的影响第71-72页
        5.5.4 蛋白酶解物对NCTC1469细胞内MDA、GSH、SOD及LDH活性的影响第72-75页
        5.5.5 MBPHs-I对NCTC1469细胞ROS产生的影响第75-77页
    5.6 本章小结第77-78页
第6章 结论与展望第78-80页
    6.1 结论第78-79页
    6.2 进一步的研究方向第79-80页
致谢第80-81页
参考文献第81-89页
攻读学位期间的研究成果第89页

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