致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第1章 绪论 | 第14-30页 |
1.1 废弃油脂污染综述 | 第14-16页 |
1.1.1 废弃油脂概念及来源 | 第14页 |
1.1.2 废弃油脂的危害 | 第14-15页 |
1.1.3 废弃油脂的处理方法 | 第15-16页 |
1.2 脂肽类生物表面活性剂研究综述 | 第16-21页 |
1.2.1 生产脂肽类生物表面活性剂菌株的筛选与发现 | 第16-17页 |
1.2.2 脂肽生物表面活性剂萃取方法 | 第17页 |
1.2.3 脂肽生物表面活性剂的生物合成途径 | 第17-19页 |
1.2.4 脂肽生物表面活性剂的应用 | 第19-21页 |
1.3 脂肪酶研究综述 | 第21-26页 |
1.3.1 脂肪酶简介 | 第21-23页 |
1.3.2 脂肪酶的应用 | 第23-25页 |
1.3.3 脂肪酶的研究进展 | 第25-26页 |
1.4 modified Terminal-RFLP(mT -RFLP)分析技术 | 第26-27页 |
1.5 研究意义、内容及创新 | 第27-30页 |
1.5.1 研究意义 | 第27-28页 |
1.5.2 研究内容 | 第28-29页 |
1.5.3 创新之处 | 第29-30页 |
第2章 沙雷氏菌ZS6的筛选与鉴定 | 第30-42页 |
2.1 材料与仪器 | 第30-32页 |
2.1.1 主要实验试剂 | 第30页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第30-31页 |
2.1.3 培养基 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-37页 |
2.2.1 干重法测生长曲线 | 第32页 |
2.2.2 排油圈法测表面活性剂活性 | 第32页 |
2.2.3 mT-RFLP法筛选菌株 | 第32-35页 |
2.2.4 TA克隆 | 第35-37页 |
2.2.5 基于16S rDNA序列构建系统发育树 | 第37页 |
2.3 结果与分析 | 第37-41页 |
2.3.1 混合菌群的动态变化 | 第37-38页 |
2.3.2 纯化菌株的mT-RFLP | 第38-40页 |
2.3.3 ZS6系统发育树 | 第40-41页 |
2.4 本章小结 | 第41-42页 |
第3章 脂肽类生物表面活性剂特性分析 | 第42-51页 |
3.1 材料与仪器 | 第42-43页 |
3.1.1 主要实验试剂 | 第42-43页 |
3.1.2 主要实验仪器 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-45页 |
3.2.1 不同碳源培养基配制 | 第43-44页 |
3.2.2 双液相法萃取生物表面活性剂 | 第44页 |
3.2.3 原位酸水解-茚三酮显色法进行生物表面活性剂种类初步鉴定 | 第44页 |
3.2.4 免疫共沉淀法鉴定生物表面活性剂离子类型 | 第44-45页 |
3.2.5 生物表面活性剂E24测定 | 第45页 |
3.2.6 生物表面活性剂粗提物CMC及产量测定 | 第45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-49页 |
3.3.1 ZS6产生物表面活性剂最适碳源 | 第45-47页 |
3.3.2 ZS6产脂肽生物表面活性剂 | 第47-48页 |
3.3.3 ZS6生物表面活性剂乳化甲苯E24 | 第48-49页 |
3.3.4 ZS6表面活性剂粗提物CMC及产量 | 第49页 |
3.4 本章小结 | 第49-51页 |
第4章 Serratia sp. ZS6产脂肪酶分析 | 第51-71页 |
4.1 材料及仪器 | 第51-52页 |
4.1.1 实验试剂 | 第51页 |
4.1.2 实验仪器 | 第51-52页 |
4.2 实验方法 | 第52-58页 |
4.2.1 称重法测量橄榄油利用率 | 第52页 |
4.2.2 薄层层析(TLC)法测橄榄油降解率 | 第52-53页 |
4.2.3 比色法检测脂肪酶活性 | 第53页 |
4.2.4 上清液总蛋白制备 | 第53页 |
4.2.5 脂肪酶Native-PAGE | 第53-54页 |
4.2.6 凝胶原位脂肪酶活性检测 | 第54页 |
4.2.7 脂肪酶NanoLC-ESI-MS/MS测定 | 第54-55页 |
4.2.8 脂肪酶SDS-PAGE | 第55-56页 |
4.2.9 脂肪酶基因克隆与分析 | 第56页 |
4.2.10 脂肪酶基因表达qRT-PCR检测 | 第56-57页 |
4.2.11 脂肪酶酶学活性检测 | 第57-58页 |
4.3 结果与分析 | 第58-70页 |
4.3.1 ZS6降解橄榄油效率 | 第58-59页 |
4.3.2 ZS6上清液脂肪酶活性结果 | 第59-60页 |
4.3.3 ZS6脂肪酶凝胶原位活性分析结果 | 第60-61页 |
4.3.4 ZS6脂肪酶NanoLC-ESI-MS/MS测定结果 | 第61-63页 |
4.3.5 ZS6脂肪酶基因序列 | 第63-67页 |
4.3.6 ZS6脂肪酶基因表达量与酶活正相关 | 第67-68页 |
4.3.7 ZS6脂肪酶酶学活性 | 第68-70页 |
4.4 本章小结 | 第70-71页 |
第5章 结论与展望 | 第71-73页 |
5.1 结论 | 第71-72页 |
5.2 展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-88页 |
附录 | 第88-94页 |
作者简介 | 第94页 |