| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第15-33页 |
| 1.1 黄酒概述 | 第15-16页 |
| 1.1.1 黄酒的生产工艺 | 第15页 |
| 1.1.2 黄酒的发展现状 | 第15-16页 |
| 1.2 氨基甲酸乙酯的研究概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 氨基甲酸乙酯的理化性质 | 第16-17页 |
| 1.2.2 氨基甲酸乙酯的致癌机理 | 第17-18页 |
| 1.2.3 氨基甲酸乙酯的形成机理 | 第18-19页 |
| 1.2.4 国内外的研究进展 | 第19页 |
| 1.3 黄酒中氨基甲酸乙酯的形成研究 | 第19-23页 |
| 1.3.1 酿造工艺对氨基甲酸乙酯的影响 | 第19-21页 |
| 1.3.2 微生物发酵对氨基甲酸乙酯的影响 | 第21-23页 |
| 1.4 氨基甲酸乙酯的检测方法 | 第23-26页 |
| 1.4.1 气相色谱法(GC) | 第23-24页 |
| 1.4.2 气相色谱/质谱联用法(GC/MS) | 第24-25页 |
| 1.4.3 傅立叶变换红外光谱法(FTIP) | 第25页 |
| 1.4.4 高效液相色谱-荧光法(HPLC/FLD) | 第25页 |
| 1.4.5 气相色谱-串联质谱法(GC/MS/MS) | 第25-26页 |
| 1.4.6 液相色谱-串联质谱法(HPLC/MS/MS) | 第26页 |
| 1.5 氨基甲酸乙酯控制的主要途径 | 第26-31页 |
| 1.5.1 物理方法 | 第26-27页 |
| 1.5.2 化学方法 | 第27页 |
| 1.5.3 酶学手段 | 第27-29页 |
| 1.5.4 代谢工程途径 | 第29-31页 |
| 1.6 课题的选题背景、研究思路及主要研究内容 | 第31-33页 |
| 1.6.1 研究背景和意义 | 第31页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第31-33页 |
| 第二章 抑制剂的加入对氨基甲酸乙酯和精氨酸代谢及黄酒风味物质的影响 | 第33-47页 |
| 2.1 前言 | 第33页 |
| 2.2 主要材料与仪器 | 第33-34页 |
| 2.2.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第34页 |
| 2.2.3 仪器 | 第34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.3.1 黄酒酿造基本过程和实验处理方法 | 第34-35页 |
| 2.3.2 氨基甲酸乙酯的测定 | 第35-36页 |
| 2.3.3 OTC酶活测定方法 | 第36页 |
| 2.3.4 精氨酸脱亚胺酶酶活测定方法 | 第36页 |
| 2.3.5 尿素测定 | 第36-37页 |
| 2.3.6 瓜氨酸测定 | 第37页 |
| 2.3.7 乙醇含量测定 | 第37页 |
| 2.3.8 基础品质的测定 | 第37页 |
| 2.3.9 酒中氨基酸含量的测定 | 第37页 |
| 2.3.10 酒中风味物质含量的测定 | 第37-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-46页 |
| 2.4.1 黄酒酿造中氨基甲酸乙酯演变规律及抑制剂对其代谢的影响 | 第38-39页 |
| 2.4.2 黄酒酿造OTC酶与ADI酶变化规律及与EC形成的相关性分析 | 第39-40页 |
| 2.4.3 黄酒酿造中尿素的演变规律及抑制剂对代谢产物的影响 | 第40-41页 |
| 2.4.4 黄酒酿造中乙醇的演变规律及抑制剂对代谢产物的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.5 黄酒酿造发酵液中瓜氨酸的演变规律研究 | 第42页 |
| 2.4.6 抑制剂的加入对黄酒常规理化指标的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.7 抑制剂的加入对黄酒中氨基酸的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.8 抑制剂的加入对黄酒主要风味物质的影响 | 第44-46页 |
| 2.5 讨论 | 第46-47页 |
| 第三章 单一酵母菌株对氨基甲酸乙酯和精氨酸代谢的影响 | 第47-60页 |
| 3.1 前言 | 第47页 |
| 3.2 主要材料与仪器 | 第47页 |
| 3.2.1 材料 | 第47页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第47页 |
| 3.2.3 仪器 | 第47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.3.1 菌株分离 | 第47-48页 |
| 3.3.2 菌株ZJU的鉴定 | 第48-49页 |
| 3.3.3 黄酒酿造基本过程和试验处理方法 | 第49页 |
| 3.3.4 氨基甲酸乙酯的RP-HPLC测定 | 第49页 |
| 3.3.5 尿素测定 | 第49页 |
| 3.3.6 瓜氨酸测定 | 第49页 |
| 3.3.7 乙醇含量测定 | 第49页 |
| 3.3.8 风味物质的测定 | 第49页 |
| 3.4 结果与分析 | 第49-59页 |
| 3.4.1 菌株ZJU的生理生化鉴定结果 | 第49-51页 |
| 3.4.2 菌株ZJU的分子测序 | 第51-52页 |
| 3.4.3 黄酒酿造中氨基甲酸乙酯演变规律及酿酒酵母ZJU对其代谢调控影响 | 第52-53页 |
| 3.4.4 黄酒酿造中尿素的演变规律 | 第53-54页 |
| 3.4.5 黄酒酿造中乙醇的变化规律 | 第54页 |
| 3.4.6 黄酒酿造中瓜氨酸的变化规律研究 | 第54-55页 |
| 3.4.7 氨基酸及风味物质的变化 | 第55-59页 |
| 3.5 讨论 | 第59-60页 |
| 第四章 传统黄酒发酵过程中的细菌多样性分析 | 第60-69页 |
| 4.1 前言 | 第60-61页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第61-62页 |
| 4.2.1 样品采集 | 第61页 |
| 4.2.2 总DNA提取 | 第61页 |
| 4.2.3 PCR扩增 | 第61页 |
| 4.2.4 Roche 454 GS FLX+测序仪上机测序 | 第61页 |
| 4.2.5 序列生物信息学分析 | 第61-62页 |
| 4.3 结果与分析 | 第62-67页 |
| 4.3.1 基于物种丰度分析 | 第62-63页 |
| 4.3.2 多样性分析 | 第63-65页 |
| 4.3.3 基于群落结构分析 | 第65-67页 |
| 4.4. 讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 单菌发酵与混菌发酵的代谢物差异分析及差异基因表达研究 | 第69-86页 |
| 5.1 前言 | 第69页 |
| 5.2 主要材料和仪器 | 第69-70页 |
| 5.2.1 菌株 | 第69页 |
| 5.2.2 培养基 | 第69-70页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第70页 |
| 5.2.4 仪器 | 第70页 |
| 5.3 实验方法 | 第70-73页 |
| 5.3.1 产EC降解酶的乳酸菌筛选 | 第70页 |
| 5.3.2 氨基甲酸乙酯降解酶酶活的测定 | 第70-71页 |
| 5.3.3 鸟氨酸氨甲酰基转移酶酶活测定 | 第71页 |
| 5.3.4 乙醇耐受性测定 | 第71页 |
| 5.3.5 混菌发酵的黄酒酿造过程 | 第71页 |
| 5.3.6 氨基甲酸乙酯的检测 | 第71页 |
| 5.3.7 尿素含量的检测 | 第71页 |
| 5.3.8 胞外瓜氨酸的测定 | 第71-72页 |
| 5.3.9 胞外精氨酸的测定 | 第72页 |
| 5.3.10 氨基酸的测定 | 第72页 |
| 5.3.11 风味物质相对含量的测定 | 第72页 |
| 5.3.12 RT-QPCR检测精氨酸代谢途径中关键基因的表达量 | 第72-73页 |
| 5.4 实验结果 | 第73-85页 |
| 5.4.1 菌株筛选 | 第73-75页 |
| 5.4.2 酿酒酵母与乳酸菌的复配发酵研究 | 第75-80页 |
| 5.4.3 改造后的YPD培养基中酿酒酵母与乳酸菌的复配比例 | 第80-82页 |
| 5.4.4 qPCR手段分析精氨酸代谢途径中的关键基因 | 第82-85页 |
| 5.5 讨论 | 第85-86页 |
| 第六章 酿酒酵母ZJU与短乳杆菌复配的混菌发酵转录组学分析 | 第86-99页 |
| 6.1 前言 | 第86页 |
| 6.2 主要材料与仪器 | 第86-87页 |
| 6.2.1 菌株 | 第86页 |
| 6.2.2 主要试剂 | 第86页 |
| 6.2.3 主要仪器 | 第86-87页 |
| 6.3 实验方法 | 第87-88页 |
| 6.3.1 样品的制备 | 第87页 |
| 6.3.2 总RNA提取 | 第87页 |
| 6.3.3 RNA-seq转录组测序 | 第87页 |
| 6.3.4 基因表达谱的生物信息学分析 | 第87-88页 |
| 6.4 结果与分析 | 第88-97页 |
| 6.4.1 单一酵母发酵(sc)和混菌发酵(mc)的主要差异基因分析 | 第88-96页 |
| 6.4.2 GO分析 | 第96-97页 |
| 6.5 讨论 | 第97-99页 |
| 第七章 鸟氨酸氨甲酰基转移酶的分离纯化、酶学性质研究 | 第99-108页 |
| 7.1 前言 | 第99页 |
| 7.2 主要材料和仪器 | 第99-100页 |
| 7.2.1 菌株 | 第99页 |
| 7.2.2 培养基 | 第99页 |
| 7.2.3 主要试剂 | 第99页 |
| 7.2.4 仪器 | 第99-100页 |
| 7.3 实验方法 | 第100-102页 |
| 7.3.1 鸟氨酸氨甲酰基转移酶的分离纯化 | 第100-101页 |
| 7.3.2 鸟氨酸氨甲酰基转移酶的酶学性质 | 第101-102页 |
| 7.4 实验结果 | 第102-107页 |
| 7.4.1 鸟氨酸氨甲酰基转移酶的分离纯化 | 第102-103页 |
| 7.4.2 鸟氨酸氨甲酰基转移酶的酶学性质 | 第103-107页 |
| 7.5 讨论 | 第107-108页 |
| 第八章 论文总结与研究展望 | 第108-111页 |
| 8.1 论文总结 | 第108-109页 |
| 8.2 论文的不足及后续研究展望 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-125页 |
| 致谢 | 第125-127页 |
| 个人简介 | 第127-128页 |
