| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 灵芝概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 灵芝的分类 | 第13页 |
| 1.1.2 灵芝的药用价值 | 第13-14页 |
| 1.2 灵芝三萜的化学结构及其药理活性 | 第14-18页 |
| 1.2.1 灵芝三萜的化学结构 | 第14-16页 |
| 1.2.2 灵芝三萜的药理活性 | 第16-18页 |
| 1.3 灵芝三萜化合物质谱裂解方式 | 第18-19页 |
| 1.4 灵芝三萜类化合物的提取分离和纯化 | 第19-21页 |
| 1.5 灵芝三萜的生物合成 | 第21-24页 |
| 1.5.1 灵芝三萜的基本合成途径 | 第21-22页 |
| 1.5.2 灵芝三萜合成的关键酶和基因 | 第22-23页 |
| 1.5.3 环境因子对灵芝三萜产量的影响 | 第23-24页 |
| 1.6 本课题立题依据及研究内容 | 第24-26页 |
| 1.6.1 立题依据及研究目的 | 第24-25页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第25-26页 |
| 2 基于油酸诱导的高产三萜灵芝菌丝体发酵条件优化 | 第26-38页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 培养基配制 | 第26-27页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.2.1 灵芝菌丝液体发酵培养方法 | 第27页 |
| 2.2.2 菌丝生物量(Mycelia Biomass)的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.3 灵芝菌丝体胞内三萜(Intracellular Triterpenoids IT)产量的测定 | 第28页 |
| 2.2.4 灵芝液体发酵培养基的优化 | 第28-29页 |
| 2.2.5 灵芝液体发酵条件的筛选 | 第29页 |
| 2.3 数据处理 | 第29-30页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第30-36页 |
| 2.4.1 灵芝液体发酵培养基的优化 | 第30-35页 |
| 2.4.2 灵芝液体发酵条件的筛选 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-38页 |
| 3 HPLC-ESI-MS~n鉴定油酸诱导后不同种类灵芝三萜产量的变化 | 第38-50页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第38-39页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
| 3.1.3 培养基配置 | 第39页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 灵芝菌丝液体发酵培养方法 | 第39-40页 |
| 3.2.2 干菌丝制备 | 第40页 |
| 3.2.3 灵芝三萜样品制备 | 第40页 |
| 3.2.4 HPLC检测方法 | 第40页 |
| 3.2.5 质谱检测方法 | 第40-41页 |
| 3.3 数据处理 | 第41页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第41-48页 |
| 3.4.1 液质联用法鉴定灵芝三萜 | 第41-44页 |
| 3.4.2 不同种类灵芝三萜鉴定 | 第44-47页 |
| 3.4.3 油酸诱导后灵芝产生的不同种类三萜产量变化 | 第47-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 4 油酸诱导对灵芝三萜生物合成途径中关键酶编码基因影响研究 | 第50-61页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第50-51页 |
| 4.1.1 实验菌株 | 第50页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 4.1.3 培养基配置 | 第50页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-55页 |
| 4.2.1 灵芝菌丝体发酵和油酸诱导 | 第51页 |
| 4.2.2 灵芝总RNA提取 | 第51-52页 |
| 4.2.3 双链cDNA合成 | 第52-54页 |
| 4.2.4 实时荧光定量PCR | 第54-55页 |
| 4.3 数据处理 | 第55页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第55-60页 |
| 4.4.1 灵芝三萜的合成途径 | 第55页 |
| 4.4.2 不同浓度油酸诱导条件下基因转录水平变化 | 第55-57页 |
| 4.4.3 不同时间油酸诱导条件下基因转录水平变化 | 第57-59页 |
| 4.4.4 油酸最佳诱导条件下基因转录水平变化 | 第59-60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 5 利用发酵罐对油酸诱导灵芝发酵扩大培养 | 第61-67页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第61-62页 |
| 5.1.1 实验菌株 | 第61页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 5.1.3 培养基配制 | 第61页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第61-62页 |
| 5.2 实验方法 | 第62-63页 |
| 5.2.1 灵芝菌丝液体发酵培养方法 | 第62页 |
| 5.2.2 菌丝生物量(Mycelia Biomass)的测定 | 第62-63页 |
| 5.2.3 灵芝菌丝体胞内三萜(Intracellular Triterpenoids IT)产量的测定 | 第63页 |
| 5.2.4 灵芝液体发酵条件的优化 | 第63页 |
| 5.3 数据处理 | 第63页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第63-66页 |
| 5.4.1 搅拌罐发酵过程中三萜产量与生物量变化 | 第63页 |
| 5.4.2 气升罐发酵过程中三萜产量与生物量变化 | 第63-64页 |
| 5.4.3 摇瓶、搅拌罐、气升罐发酵情况比较 | 第64-66页 |
| 5.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 6 结论与展望 | 第67-69页 |
| 6.1 主要结论 | 第67-68页 |
| 6.2 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
| 攻读硕士学位期间科研成果 | 第76页 |
