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酿酒酵母锚定表达糖化型淀粉酶

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-15页
   ·微生物表面展示工程第7页
   ·酿酒酵母表面展示系统第7-11页
     ·酿酒酵母表面展示原理第8页
     ·酿酒酵母表面展示系统第8-10页
     ·酿酒酵母表面展现技术的应用第10-11页
   ·淀粉及淀粉酶第11页
   ·淀粉酶的应用第11-13页
   ·本论文的立题意义及主要研究内容第13-15页
第二章 材料与方法第15-23页
   ·材料第15-17页
     ·菌株和质粒第15页
     ·主要试剂和工具酶第15页
     ·寡核苷酸引物第15页
     ·大肠质粒和酵母染色体提取试剂第15-16页
     ·培养基与培养条件第16页
     ·主要仪器设备第16-17页
   ·方法第17-23页
     ·大肠杆菌质粒的提取第17页
     ·酿酒酵母染色体 DNA 的提取第17页
     ·大麦 RNA 的提取第17页
     ·大肠杆菌感受态细胞转化第17-18页
     ·目的基因的 PCR 扩增第18页
     ·大肠杆菌重组表达载体的构建第18页
     ·酿酒酵母 G418 敏感性试验第18页
     ·酿酒酵母醋酸锂转化法第18页
     ·重组酵母的筛选第18-19页
     ·粗酶液制备第19页
     ·淀粉酶酶活力测定第19-20页
     ·重组菌的遗传稳定性分析第20页
     ·重组酶酶学性质分析第20页
     ·淀粉浓度的测定第20页
     ·重组菌分批发酵实验第20页
     ·重组菌的重复利用第20-21页
     ·麦芽糖半连续制备工艺第21页
     ·淀粉糊化液化第21页
     ·重组菌发酵性能实验第21页
     ·麦芽糖和酒精的高压液相色谱分析第21页
     ·总糖的测定第21页
     ·双乙酰的测定第21-23页
第三章 结果与讨论第23-39页
   ·重组酿酒酵母菌株的构建第23-28页
     ·目的基因的 PCR 扩增第23页
     ·酿酒酵母表面展示载体 pAA-AG 的构建第23-24页
     ·酿酒酵母表面展示载体 pBA-AG 的构建第24-25页
     ·酿酒酵母 SA 对 G418 敏感度分析第25-26页
     ·重组酿酒酵母的 PCR 鉴定第26页
     ·重组酿酒酵母展示淀粉酶的活性检测第26-27页
     ·酿酒酵母工程菌的稳定性试验第27-28页
   ·重组酶酶学性质研究第28-31页
     ·表面展示淀粉酶的最适温度第28页
     ·表面展示淀粉酶的温度稳定性第28-29页
     ·表面展示淀粉酶的最适 pH第29页
     ·表面展示淀粉酶的 pH 稳定性第29-30页
     ·金属离子和 EDTA 对表面展示淀粉酶的影响第30-31页
   ·重组酿酒酵母的表面展示糖化型淀粉酶应用的初步研究第31-37页
     ·重组酿酒酵母菌利用淀粉生长情况第31页
     ·重组酿酒酵母菌分批发酵实验第31-32页
     ·重组酿酒酵母菌重复利用第32-33页
     ·利用重组酵母半连续制备麦芽糖浆第33-34页
     ·重组酿酒酵母的发酵性能研究第34-37页
   ·讨论第37-39页
结论与展望第39-41页
 主要结论第39-40页
 展望第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-46页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第46页

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