摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-15页 |
·微生物表面展示工程 | 第7页 |
·酿酒酵母表面展示系统 | 第7-11页 |
·酿酒酵母表面展示原理 | 第8页 |
·酿酒酵母表面展示系统 | 第8-10页 |
·酿酒酵母表面展现技术的应用 | 第10-11页 |
·淀粉及淀粉酶 | 第11页 |
·淀粉酶的应用 | 第11-13页 |
·本论文的立题意义及主要研究内容 | 第13-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
·材料 | 第15-17页 |
·菌株和质粒 | 第15页 |
·主要试剂和工具酶 | 第15页 |
·寡核苷酸引物 | 第15页 |
·大肠质粒和酵母染色体提取试剂 | 第15-16页 |
·培养基与培养条件 | 第16页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
·方法 | 第17-23页 |
·大肠杆菌质粒的提取 | 第17页 |
·酿酒酵母染色体 DNA 的提取 | 第17页 |
·大麦 RNA 的提取 | 第17页 |
·大肠杆菌感受态细胞转化 | 第17-18页 |
·目的基因的 PCR 扩增 | 第18页 |
·大肠杆菌重组表达载体的构建 | 第18页 |
·酿酒酵母 G418 敏感性试验 | 第18页 |
·酿酒酵母醋酸锂转化法 | 第18页 |
·重组酵母的筛选 | 第18-19页 |
·粗酶液制备 | 第19页 |
·淀粉酶酶活力测定 | 第19-20页 |
·重组菌的遗传稳定性分析 | 第20页 |
·重组酶酶学性质分析 | 第20页 |
·淀粉浓度的测定 | 第20页 |
·重组菌分批发酵实验 | 第20页 |
·重组菌的重复利用 | 第20-21页 |
·麦芽糖半连续制备工艺 | 第21页 |
·淀粉糊化液化 | 第21页 |
·重组菌发酵性能实验 | 第21页 |
·麦芽糖和酒精的高压液相色谱分析 | 第21页 |
·总糖的测定 | 第21页 |
·双乙酰的测定 | 第21-23页 |
第三章 结果与讨论 | 第23-39页 |
·重组酿酒酵母菌株的构建 | 第23-28页 |
·目的基因的 PCR 扩增 | 第23页 |
·酿酒酵母表面展示载体 pAA-AG 的构建 | 第23-24页 |
·酿酒酵母表面展示载体 pBA-AG 的构建 | 第24-25页 |
·酿酒酵母 SA 对 G418 敏感度分析 | 第25-26页 |
·重组酿酒酵母的 PCR 鉴定 | 第26页 |
·重组酿酒酵母展示淀粉酶的活性检测 | 第26-27页 |
·酿酒酵母工程菌的稳定性试验 | 第27-28页 |
·重组酶酶学性质研究 | 第28-31页 |
·表面展示淀粉酶的最适温度 | 第28页 |
·表面展示淀粉酶的温度稳定性 | 第28-29页 |
·表面展示淀粉酶的最适 pH | 第29页 |
·表面展示淀粉酶的 pH 稳定性 | 第29-30页 |
·金属离子和 EDTA 对表面展示淀粉酶的影响 | 第30-31页 |
·重组酿酒酵母的表面展示糖化型淀粉酶应用的初步研究 | 第31-37页 |
·重组酿酒酵母菌利用淀粉生长情况 | 第31页 |
·重组酿酒酵母菌分批发酵实验 | 第31-32页 |
·重组酿酒酵母菌重复利用 | 第32-33页 |
·利用重组酵母半连续制备麦芽糖浆 | 第33-34页 |
·重组酿酒酵母的发酵性能研究 | 第34-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
结论与展望 | 第39-41页 |
主要结论 | 第39-40页 |
展望 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46页 |