摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
1 引言 | 第8-16页 |
·真菌毒素的检测意义与方法 | 第8-11页 |
·真菌毒素的检测意义 | 第8-9页 |
·真菌毒素的检测方法 | 第9-11页 |
·SELEX 的研究进展 | 第11-14页 |
·SELEX 技术简介 | 第11页 |
·适配体的优点 | 第11页 |
·适配子筛选方法 | 第11-13页 |
·适配体的应用 | 第13-14页 |
·本课题的立题意义与内容 | 第14-16页 |
·本课题的立题意义 | 第14页 |
·本课题的研究内容 | 第14-16页 |
2 实验材料与方法 | 第16-24页 |
·材料与主要试剂 | 第16页 |
·随机单链 DNA(ssDNA)文库以及其它 DNA 序列的设计与合成 | 第16页 |
·磁珠与纳米金 | 第16页 |
·主要试剂 | 第16页 |
·主要仪器 | 第16-17页 |
·实验原理 | 第17-19页 |
·SELEX 技术原理 | 第17页 |
·黄曲霉毒素 B_1、B_2活化及与氨基化磁珠连接原理 | 第17-18页 |
·黄曲霉毒素 B_1、B_2寡核苷酸适配子检测方法建立的原理 | 第18-19页 |
·伏马菌素 B_1可视化检测的原理 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-24页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2和载体氨基化磁珠的连接 | 第19-20页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2的活化与表征 | 第19-20页 |
·氨基化磁珠的制备与表征 | 第20页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2和载体的连接与表征 | 第20页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2和载体连接条件的优化 | 第20页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2寡核苷酸适配子的筛选 | 第20-21页 |
·随机单链(ssDNA)DNA 文库 PCR 扩增条件优化 | 第21页 |
·AFB_1及 AFB_2孵育洗剂条件的优化 | 第21页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2十轮筛选所得到的 ssDNA 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第21页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的克隆测序及分析 | 第21-22页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的克隆测序 | 第21页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的克隆测序结果分析 | 第21页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的亲和性实验 | 第21-22页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的特异性实验 | 第22页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的应用 | 第22-23页 |
·亲和素包被磁珠的制备与表征 | 第22页 |
·亲和素用量的优化 | 第22页 |
·亲和素包被的磁珠与生物素标记的 AFB_1及 AFB_2适配子的连接优化 | 第22页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配体的线性范围,检测限和加标回收率 | 第22-23页 |
·基于纳米金标记-适配体识别的伏马菌素 B_1可视化检测新方法 | 第23-24页 |
·纳米金的制备 | 第23页 |
·FB_1的检测 | 第23页 |
·啤酒中 FB_1的加标回收 | 第23-24页 |
3 结果与讨论 | 第24-47页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2和载体氨基化磁珠的连接 | 第24-27页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2的活化与表征 | 第24-25页 |
·氨基化磁珠的制备与表征 | 第25页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2和载体的连接及表征 | 第25-26页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2和载体连接条件的优化 | 第26-27页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的筛选 | 第27-30页 |
·随机单链(ssDNA)DNA 文库 PCR 扩增条件优化 | 第27-28页 |
·AFB_1和 AFB_2孵育洗剂条件的优化 | 第28-29页 |
·黄曲霉毒素 B_1和 B_2十轮筛选所得到的 ssDNA 聚丙烯酰胺凝胶电泳图 | 第29-30页 |
·黄曲霉毒素 B_1和 B_2核酸适配子的克隆测序及分析 | 第30-38页 |
·黄曲霉毒素 B_1核酸适配子一级结构同源性分析和二级结构分析 | 第30-32页 |
·黄曲霉毒素 B_2核酸适配子的一级结构同源性分析和二级结构分析 | 第32-34页 |
·黄曲霉毒素 B_1和 B_2核酸适配子的亲和性 | 第34-37页 |
·黄曲霉毒素 B_1及 B_2核酸适配子的特异性 | 第37-38页 |
·黄曲霉毒素 B_1和 B_2核酸适配子的应用 | 第38-41页 |
·亲和素包被磁珠的制备与表征 | 第38页 |
·亲和素浓度的优化 | 第38-39页 |
·亲和素包被的磁珠与生物素标记的适配子的连接及条件优化 | 第39页 |
·黄曲霉毒素 B_1和 B_2适配子检测方法的建立 | 第39-41页 |
·基于纳米金标记-适配体识别的伏马菌素 B_1可视化检测新方法 | 第41-47页 |
·NaCl 浓度的优化及杂交条件的选择 | 第41-43页 |
·FB_1的定量检测 | 第43-45页 |
·啤酒中伏马菌素 FB_1的加标回收 | 第45-47页 |
主要结论 | 第47-48页 |
展望 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |