| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略符号表 | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-34页 |
| ·苯乳酸的功能性质 | 第13-16页 |
| ·苯乳酸的理化性质 | 第13页 |
| ·结构 | 第13页 |
| ·溶解度和稳定性 | 第13页 |
| ·苯乳酸的抑菌性能 | 第13-15页 |
| ·苯乳酸抑菌活性的发现 | 第13-14页 |
| ·抑菌谱 | 第14页 |
| ·作用机制 | 第14-15页 |
| ·安全性 | 第15页 |
| ·苯乳酸的减毒作用 | 第15-16页 |
| ·苯乳酸的药理作用 | 第16页 |
| ·苯乳酸的应用 | 第16-19页 |
| ·苯乳酸在食品中的应用 | 第16-18页 |
| ·乳品工业 | 第17页 |
| ·焙烤工业 | 第17-18页 |
| ·苯乳酸在医药中的应用 | 第18页 |
| ·作为丹参素替代品,用于冠心病的临床治疗 | 第18页 |
| ·作为带节育器出血的治疗药物 | 第18页 |
| ·用于合成降血糖制剂Englitazone | 第18页 |
| ·化妆品工业 | 第18-19页 |
| ·苯乳酸的制备 | 第19-25页 |
| ·苯乳酸在自然界的分布 | 第19页 |
| ·苯乳酸的化学合成 | 第19页 |
| ·苯乳酸的生物合成 | 第19-22页 |
| ·苯乳酸的产生菌 | 第19-20页 |
| ·乳酸菌合成苯乳酸的国内外研究进展 | 第20-21页 |
| ·苯乳酸的生物合成途经 | 第21-22页 |
| ·苯乳酸合成涉及的酶类 | 第22-25页 |
| ·转氨反应 | 第22-24页 |
| ·还原反应 | 第24-25页 |
| ·苯乳酸的检测 | 第25页 |
| ·TLC(薄层层析)法 | 第25页 |
| ·HPLC(高效液相色谱)法 | 第25页 |
| ·立题背景和意义 | 第25-26页 |
| ·本课题的研究内容 | 第26页 |
| 参考文献 | 第26-34页 |
| 第二章 苯乳酸高产菌株分离、筛选及初步鉴定 | 第34-48页 |
| ·前言 | 第34页 |
| ·材料与方法 | 第34-36页 |
| ·主要材料 | 第34-35页 |
| ·试验仪器 | 第35页 |
| ·主要实验方法 | 第35-36页 |
| ·样品采集 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·菌种分离、纯化 | 第35-36页 |
| ·初筛、复筛方法 | 第36页 |
| ·HPLC测定发酵液中的苯乳酸 | 第36页 |
| ·菌株形态观察 | 第36页 |
| ·生理、生化鉴定 | 第36页 |
| ·菌株16S rDNA序列测定、分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-45页 |
| ·产苯乳酸的乳酸菌菌株分离、筛选结果 | 第36-40页 |
| ·菌种初筛 | 第37页 |
| ·菌种复筛 | 第37-39页 |
| ·产苯乳酸的乳酸菌菌株比较 | 第39-40页 |
| ·菌株B7在MRS培养基中合成苯乳酸的过程 | 第40-41页 |
| ·高产菌株的初步鉴定 | 第41-45页 |
| ·菌株形态特征观察 | 第41-42页 |
| ·生理、生化实验 | 第42-43页 |
| ·16S rDNA序列测定 | 第43-45页 |
| ·本章小结 | 第45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 第三章 Lactobacillus sp.SK007合成苯乳酸的机理研究 | 第48-66页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-51页 |
| ·主要实验材料 | 第48-49页 |
| ·试剂 | 第48-49页 |
| ·菌种 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·试验仪器 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·培养方法 | 第49页 |
| ·分析方法 | 第49-50页 |
| ·苯丙氨酸浓度对苯乳酸合成的影响 | 第50页 |
| ·乳杆菌利用苯丙氨酸合成苯乳酸的发酵过程 | 第50页 |
| ·辅酶磷酸吡哆醛对乳杆菌利用苯丙氨酸合成苯乳酸的影响 | 第50页 |
| ·氨基供体对乳杆菌利用苯丙氨酸合成苯乳酸的影响 | 第50页 |
| ·谷氨酸对乳杆菌利用苯丙氨酸合成苯乳酸的影响 | 第50页 |
| ·谷氨酸和柠檬酸的协同效应对乳杆菌合成苯乳酸的影响 | 第50页 |
| ·苯丙酮酸代替苯丙氨酸合成苯乳酸 | 第50页 |
| ·苯丙酮酸浓度对乳杆菌合成苯乳酸的影响 | 第50-51页 |
| ·不同底物形式合成苯乳酸的效果 | 第51页 |
| ·乳杆菌利用苯丙酮酸合成苯乳酸的时间过程 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-63页 |
| ·乳杆菌利用苯丙氨酸合成苯乳酸的研究 | 第51-53页 |
| ·苯丙氨酸浓度对Lactobacillus sp.SK007合成苯乳酸的影响 | 第51-52页 |
| ·Lactobacillus sp.SK007利用苯丙氨酸合成苯乳酸过程 | 第52-53页 |
| ·苯丙氨酸转氨反应的影响因素及促进方法 | 第53-59页 |
| ·影响苯丙氨酸转氨反应的因素 | 第53-55页 |
| ·通过促进转氨反应提高苯乳酸的产量 | 第55-59页 |
| ·乳杆菌利用苯丙酮酸合成苯乳酸的研究 | 第59-63页 |
| ·苯丙酮酸对Lactobacillus sp.SK007合成苯乳酸的影响 | 第59-61页 |
| ·底物浓度对乳杆菌合成苯乳酸的影响 | 第61页 |
| ·底物存在形式对Lactobacillus sp.SK007产生苯乳酸的影响 | 第61-62页 |
| ·乳酸菌利用苯丙酮酸合成苯乳酸的时间过程 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 第四章 乳杆菌合成苯乳酸发酵条件的优化 | 第66-84页 |
| ·前言 | 第66页 |
| ·材料与方法 | 第66-69页 |
| ·主要实验材料 | 第66-67页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·菌种 | 第66-67页 |
| ·培养基 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-69页 |
| ·培养方法 | 第67页 |
| ·分析方法 | 第67-68页 |
| ·培养基成分的优化 | 第68页 |
| ·培养条件的优化 | 第68页 |
| ·发酵罐放大试验 | 第68-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-82页 |
| ·碳源对苯乳酸合成的影响 | 第69-70页 |
| ·氮源对苯乳酸合成的影响 | 第70-71页 |
| ·吐温-80对乳杆菌合成苯乳酸的影响 | 第71页 |
| ·响应面法优化培养基 | 第71-75页 |
| ·发酵条件的优化 | 第75-80页 |
| ·培养温度对乳杆菌合成苯乳酸的影响 | 第75-76页 |
| ·pH对乳杆菌合成苯乳酸的影响 | 第76-79页 |
| ·转速对乳杆菌合成苯乳酸的影响 | 第79页 |
| ·接种量对Lactobacillus sp.SK007产生苯乳酸的影响 | 第79-80页 |
| ·发酵罐放大试验 | 第80-81页 |
| ·30L发酵罐放大试验 | 第80-81页 |
| ·300L发酵罐放大试验 | 第81页 |
| ·乳杆菌与其它微生物生物合成苯乳酸产量的比较 | 第81-82页 |
| ·本章小结 | 第82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 第五章 乳酸菌静息细胞合成苯乳酸以及辅酶再生的研究 | 第84-103页 |
| ·前言 | 第84页 |
| ·材料与方法 | 第84-87页 |
| ·试剂与材料 | 第84-85页 |
| ·试剂 | 第84-85页 |
| ·菌种 | 第85页 |
| ·培养基 | 第85页 |
| ·主要仪器 | 第85页 |
| ·实验方法 | 第85-87页 |
| ·菌种活化、培养 | 第85页 |
| ·静息细胞的制备 | 第85页 |
| ·静息细胞转化方法 | 第85页 |
| ·检测方法 | 第85-86页 |
| ·苯乳酸合成后的分布 | 第86页 |
| ·底物浓度对苯乳酸合成的影响 | 第86页 |
| ·细胞浓度对PLA合成的影响 | 第86页 |
| ·表面活性剂对PLA合成的影响 | 第86页 |
| ·缓冲液及pH对PLA合成的影响 | 第86页 |
| ·温度对PLA合成的影响 | 第86页 |
| ·转速对PLA合成的影响 | 第86页 |
| ·乳杆菌静息细胞重复利用实验 | 第86页 |
| ·重复利用细胞的粗酶液制备 | 第86-87页 |
| ·外加辅酶对苯乳酸合成的影响 | 第87页 |
| ·辅助底物对苯乳酸合成的影响 | 第87页 |
| ·葡萄糖对乳酸菌静息细胞重复利用及冷藏稳定性的影响 | 第87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-100页 |
| ·乳酸菌静息细胞转化产物及苯丙酮酸的代谢途径 | 第87-90页 |
| ·影响乳酸菌静息细胞合成苯乳酸的因素 | 第90-93页 |
| ·培养时间对静息细胞合成苯乳酸的影响 | 第90页 |
| ·苯丙酮酸浓度对乳杆菌静止细胞合成苯乳酸的影响 | 第90-91页 |
| ·细胞浓度对静息细胞合成苯乳酸的影响 | 第91页 |
| ·表面活性剂对Lactobacillus sp.SK007转化的影响 | 第91-92页 |
| ·转化液pH对苯乳酸生成的影响 | 第92页 |
| ·温度对苯乳酸合成的影响 | 第92-93页 |
| ·辅酶再生对乳酸菌静息细胞催化稳定性的影响 | 第93-100页 |
| ·静息细胞重复利用试验 | 第93-94页 |
| ·外加辅酶对苯乳酸合成的影响 | 第94-96页 |
| ·构建基于辅助底物的辅酶再生体系 | 第96-98页 |
| ·以葡萄糖为辅助底物对静息细胞催化稳定性的影响 | 第98-100页 |
| ·本章小结 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-103页 |
| 第六章 乳杆菌乳酸脱氢酶的分离、纯化及酶学性质的研究 | 第103-125页 |
| ·前言 | 第103页 |
| ·材料与方法 | 第103-106页 |
| ·主要实验材料 | 第103-104页 |
| ·试剂 | 第103-104页 |
| ·菌种及保藏方法 | 第104页 |
| ·主要实验仪器 | 第104页 |
| ·实验方法 | 第104-106页 |
| ·酶的提取及分离纯化过程 | 第104页 |
| ·分析方法 | 第104-105页 |
| ·酶的产生及收集 | 第105页 |
| ·粗酶液的制备 | 第105页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第105页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第105页 |
| ·AKTA Explore 3000 Sephacryl S-200凝胶过滤 | 第105页 |
| ·SDS-PAGE电泳、RPC_(18)-HPLC鉴定酶的纯度 | 第105页 |
| ·乳酸脱氢酶分子量及亚基分子量测定 | 第105-106页 |
| ·纯酶的圆二色性(CD)测定 | 第106页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第106页 |
| ·温度对酶活力及稳定性的影响 | 第106页 |
| ·pH对酶活力及稳定性的影响 | 第106页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第106页 |
| ·确定丙酮酸、PPA的K_m | 第106页 |
| ·乳酸菌的乳酸脱氢酶活力和其合成笨乳酸能力的测定 | 第106页 |
| ·结果与分析 | 第106-120页 |
| ·酶的分离、纯化 | 第107-111页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第107页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow离子交换色谱 | 第107-108页 |
| ·Sephacryl S-200凝胶过滤 | 第108页 |
| ·纯化结果 | 第108-111页 |
| ·酶的性质研究 | 第111-115页 |
| ·LDH分子量及亚基分子量的测定 | 第111-114页 |
| ·LDH的圆二色性 | 第114页 |
| ·LDH的氨基酸组成分析 | 第114-115页 |
| ·LDH的酶学性质 | 第115-118页 |
| ·温度对酶活力及稳定性的影响 | 第115-116页 |
| ·pH对酶活力及稳定性的影响 | 第116页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第116-117页 |
| ·LDH对丙酮酸、PPA的Km | 第117-118页 |
| ·乳杆菌的LDH活力与其产苯乳酸能力的关系 | 第118-120页 |
| ·本章小结 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-125页 |
| 主要结论 | 第125-127页 |
| 论文创新点 | 第127-128页 |
| 博士期间发表的论文成果 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
