| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第11-26页 |
| 1.1 萜类化合物的种类及其应用 | 第11-14页 |
| 1.1.1 萜类化合物简介 | 第11页 |
| 1.1.2 萜类物质的来源与应用 | 第11-13页 |
| 1.1.3 萜类化合物的生产 | 第13-14页 |
| 1.2 酿酒酵母生物合成萜类化合物的研究进展 | 第14-21页 |
| 1.2.1 萜类化合物的生物合成途径 | 第14-17页 |
| 1.2.2 酿酒酵母生物合成单萜类化合物研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.3 酿酒酵母生物合成倍半萜类化合物研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.4 酿酒酵母生物合成二萜类化合物研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2.5 酿酒酵母生物合成三萜类化合物研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3 酿酒酵母生物合成萜类化合物的研究策略 | 第21-24页 |
| 1.3.1 增加目的产物代谢路径代谢通量 | 第21-22页 |
| 1.3.2 降低非目的途径的代谢通量 | 第22-23页 |
| 1.3.3 其他工业化策略 | 第23-24页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-46页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.2 培养基 | 第26-27页 |
| 2.3 试剂与仪器 | 第27-29页 |
| 2.3.1 主要试剂 | 第27页 |
| 2.3.2 主要仪器 | 第27-29页 |
| 2.4 培养方法 | 第29页 |
| 2.5 分子生物学操作 | 第29-41页 |
| 2.5.1 DNA操作方法 | 第29页 |
| 2.5.2 ERG8与ERG19整合表达载体的构建 | 第29-31页 |
| 2.5.3 ERG13与ERG10整合表达载体的构建 | 第31-34页 |
| 2.5.4 mvaA与ERG12整合表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.5.5 ERG20与IDI1整合表达载体的构建 | 第36-38页 |
| 2.5.6 GES游离表达载体的构建 | 第38页 |
| 2.5.7 mvaA与GES游离表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 2.5.8 mvaA与GES整合表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 2.5.9 重组菌株的构建 | 第40-41页 |
| 2.6 测定与分析方法 | 第41-46页 |
| 2.6.1 基因表达量的测定 | 第41-44页 |
| 2.6.2 气相色谱与质谱(GC-MS)检测与分析 | 第44-45页 |
| 2.6.3 菌株乙醇耐受性测定 | 第45页 |
| 2.6.4 其他参数的测定 | 第45-46页 |
| 3 结果与讨论 | 第46-72页 |
| 3.1 香叶醇合成酶在酿酒酵母中的表达 | 第46-50页 |
| 3.1.1 GES基因的扩增及其表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.1.2 mvaA和GES游离双向表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.1.3 mvaA和GES整合双向表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 3.1.4 酿酒酵母工程菌株构建 | 第49-50页 |
| 3.1.5 香叶醇产量分析 | 第50页 |
| 3.1.6 讨论 | 第50页 |
| 3.2 代谢工程改造酿酒酵母类异戊二烯途径 | 第50-62页 |
| 3.2.1 ERG8和ERG19双向表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 3.2.2 ERG13和ERG10双向表达载体的构建 | 第52-54页 |
| 3.2.3 mvaA和ERG12双向表达载体的构建 | 第54-56页 |
| 3.2.4 ERG20和IDI1双向表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 3.2.5 酿酒酵母工程菌株构建 | 第57-59页 |
| 3.2.6 酿酒酵母工程菌株整合基因的相对表达量 | 第59-60页 |
| 3.2.7 代谢工程改造对酿酒酵母生长的影响 | 第60-61页 |
| 3.2.8 讨论 | 第61-62页 |
| 3.3 香叶醇合成酶在酿酒酵母工程菌株中的表达 | 第62-72页 |
| 3.3.1 代谢工程改造类异戊二烯途径对香叶醇产量的影响 | 第62-66页 |
| 3.3.2 表达香叶醇合酶对工程酿酒酵母生长的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.3 表达香叶醇合酶工程菌株的乙醇耐受性 | 第67-70页 |
| 3.3.4 讨论 | 第70-72页 |
| 4 全文总结 | 第72-74页 |
| 4.1 主要结论 | 第72-73页 |
| 4.2 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
