摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 绪论 | 第9-16页 |
1.1 表层蛋白的结构、功能和应用 | 第9-10页 |
1.2 乳杆菌表层蛋白 | 第10-12页 |
1.2.1 乳杆菌表层蛋白的特点 | 第10-11页 |
1.2.2 乳杆菌表层蛋白的功能 | 第11-12页 |
1.3 氧化应激 | 第12-13页 |
1.4 存在问题 | 第13-14页 |
1.5 立题背景和意义 | 第14页 |
1.6 主要研究内容 | 第14-16页 |
2 材料与方法 | 第16-23页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第16页 |
2.1.1 实验菌株和细胞 | 第16页 |
2.1.2 实验试剂 | 第16页 |
2.2 主要仪器与设备 | 第16-17页 |
2.3 实验方法 | 第17-23页 |
2.3.1 菌株的活化与传代 | 第17页 |
2.3.2 细胞培养和细胞实验分组 | 第17页 |
2.3.3 表层蛋白的去除、提取与鉴定 | 第17-18页 |
2.3.4 表层蛋白的纯化 | 第18页 |
2.3.5 菌株生长曲线、pH和滴定酸度的测定 | 第18页 |
2.3.6 菌株生理生化鉴定实验 | 第18-19页 |
2.3.7 菌株耐受性实验 | 第19-20页 |
2.3.8 体外抗氧化能力的测定 | 第20页 |
2.3.9 细胞存活率检测 | 第20-21页 |
2.3.10 细胞形态观察 | 第21页 |
2.3.11 HT-29 细胞内抗氧化酶系检测 | 第21页 |
2.3.12 HT-29 细胞内ROS含量检测 | 第21页 |
2.3.13 Hoechst 33342/PI双染检测HT-29 细胞形态变化和凋亡状况 | 第21页 |
2.3.14 Annexin V-FITC检测HT-29 细胞损伤状况 | 第21-22页 |
2.3.15 HT-29 细胞内线粒体膜电位检测 | 第22页 |
2.3.16 HT-29 细胞内Ca~(2+)检测 | 第22页 |
2.3.17 HT-29 细胞内Caspase-3 和Caspase-9 活性检测 | 第22页 |
2.3.18 数据分析 | 第22-23页 |
3 结果和讨论 | 第23-59页 |
3.1 表层蛋白的分离与纯化 | 第23-24页 |
3.2 乳杆菌表层蛋白的去除对菌株生理生化性质的影响 | 第24-30页 |
3.2.1 表层蛋白的去除对菌株生长及发酵产酸能力的影响 | 第24-27页 |
3.2.2 表层蛋白的去除对菌株生理生化特性的影响 | 第27-30页 |
3.3 乳杆菌表层蛋白的去除对菌株胁迫耐受性的影响 | 第30-36页 |
3.3.1 表层蛋白的去除对菌株抗氧胁迫能力的影响 | 第31-32页 |
3.3.2 表层蛋白的去除对菌株耐酸碱能力的影响 | 第32-33页 |
3.3.3 表层蛋白的去除对菌株抗热胁迫能力的影响 | 第33-35页 |
3.3.4 表层蛋白的去除对菌株耐盐能力的影响 | 第35-36页 |
3.4 乳杆菌表层蛋白的去除对菌株体外抗氧化性的影响 | 第36-37页 |
3.5 携带表层蛋白的乳杆菌对HT-29 细胞氧化损伤的改善 | 第37-43页 |
3.5.1 氧化应激细胞模型的建立 | 第37-38页 |
3.5.2 携带表层蛋白的乳杆菌对HT-29 细胞抗氧化酶系的影响 | 第38-41页 |
3.5.3 携带表层蛋白的乳杆菌对HT-29 细胞内ROS含量的影响 | 第41-43页 |
3.6 携带表层蛋白的乳杆菌对HT-29 细胞凋亡的影响 | 第43-46页 |
3.7 表层蛋白对HT-29 细胞氧化损伤的保护作用 | 第46-51页 |
3.7.1 表层蛋白对H_2O_2损伤的HT-29 细胞形态和存活率的影响 | 第47-48页 |
3.7.2 表层蛋白对HT-29 细胞内抗氧化酶系的改善作用 | 第48-49页 |
3.7.3 表层蛋白对HT-29 细胞内ROS含量的影响 | 第49-51页 |
3.8 表层蛋白对H_2O_2诱导HT-29 细胞凋亡的抑制作用 | 第51-53页 |
3.9 表层蛋白对HT-29 细胞凋亡的保护机制 | 第53-59页 |
3.9.1 表层蛋白对细胞内线粒体膜电位降低的抑制作用 | 第53-55页 |
3.9.2 表层蛋白抑制细胞内Ca~(2+)浓度的升高 | 第55-56页 |
3.9.3 表层蛋白对HT-29 细胞Caspase-3 和Caspase-9 活性的抑制作用 | 第56-59页 |
主要结论与展望 | 第59-60页 |
主要结论 | 第59页 |
展望 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |