摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
文献综述 | 第10-20页 |
1 乳脂的概述 | 第10页 |
2 甘油二酯的概述 | 第10-17页 |
2.1 甘油二酯的简介 | 第10页 |
2.2 甘油二酯的应用 | 第10-11页 |
2.3 1,3-甘油二酯的功能机理 | 第11-14页 |
2.4 1,3-甘油二酯的合成 | 第14-16页 |
2.5 1,3-甘油二酯检测方法 | 第16-17页 |
3 Caco-2 细胞模型及脂代谢相关基因概述 | 第17-20页 |
3.1 Caco-2 细胞 | 第17页 |
3.2 脂肪酸转运相关基因研究进展 | 第17-18页 |
3.3 乳糜微粒组装相关基因研究进展 | 第18-20页 |
1. 引言 | 第20-22页 |
1.1 研究目的及意义 | 第20-21页 |
1.2 研究内容 | 第21-22页 |
2. 材料与方法 | 第22-30页 |
2.1 试验设备 | 第22页 |
2.2 试验药品及试剂 | 第22-23页 |
2.3 试剂配制 | 第23-24页 |
2.3.1 细胞培养与处理 | 第23-24页 |
2.4 试验内容及方法 | 第24-30页 |
2.4.1 HPLC法测定改性乳脂中甘油二酯含量 | 第24-25页 |
2.4.1.1 HPLC检测方法 | 第24页 |
2.4.1.2 稳定性及重现性试验 | 第24页 |
2.4.1.3 回收率试验 | 第24-25页 |
2.4.2 改性乳脂的的制备及优化 | 第25-27页 |
2.4.2.1 酶催化乳脂甘油解反应 | 第25页 |
2.4.2.2 乳脂甘油解反应的优化 | 第25-26页 |
2.4.2.3 总脂肪酸的测定 | 第26页 |
2.4.2.4 酸价的测定 | 第26页 |
2.4.2.5 过氧化值的测定 | 第26-27页 |
2.4.3 改性乳脂的功能评价 | 第27-30页 |
2.4.3.1 Caco-2 细胞模型的建立 | 第27页 |
2.4.3.2 改性乳脂细胞毒性实验 | 第27-28页 |
2.4.3.3 改性乳脂稳定性实验 | 第28页 |
2.4.3.4 细胞RNA的提取 | 第28页 |
2.4.3.5 RNA的反转录 | 第28-29页 |
2.4.3.7 实时荧光定量PCR引物设计 | 第29页 |
2.4.3.8 实时荧光定量 | 第29-30页 |
2.4.4 数据处理 | 第30页 |
3. 结果分析 | 第30-50页 |
3.1 HPLC检测改性乳脂中甘油二酯含量 | 第30-33页 |
3.1.1 HPLC系统适应性分析 | 第30-32页 |
3.1.2 稳定性及重现性试验 | 第32页 |
3.1.3 回收率试验 | 第32-33页 |
3.2 酶催化乳脂甘油解反应单因素试验 | 第33-36页 |
3.2.1 反应时间对 1,3-DAG含量的影响 | 第33页 |
3.2.2 酶添加量对 1,3-DAG含量的影响 | 第33-34页 |
3.2.3 温度对 1,3-DAG含量的影响 | 第34-35页 |
3.2.4 醇油摩尔比对 1,3-DAG含量的影响 | 第35-36页 |
3.3 响应面优化制备工艺 | 第36-40页 |
3.3.1 响应面试验结果 | 第36-39页 |
3.3.2 响应面及等高线分析 | 第39-40页 |
3.3.3 工艺参数验证 | 第40页 |
3.4 固定化酶Lipozyme 435 的衰减特性 | 第40-41页 |
3.5 改性乳脂理化性质分析 | 第41-43页 |
3.5.1 总脂肪酸组成的测定 | 第41-42页 |
3.5.2 改性对乳脂理化性质的影响 | 第42-43页 |
3.6 改性乳脂吸收、转运机制 | 第43-50页 |
3.6.1 Caco-2 细胞生长状态 | 第43页 |
3.6.2 改性乳脂稳定性试验 | 第43-44页 |
3.6.3 改性乳脂细胞毒性试验 | 第44页 |
3.6.4 Caco-2 细胞中FABP1、MTP、DGAT1、PPARα基因的表达 | 第44-46页 |
3.6.5 改性乳脂对Caco-2 细胞中FABP1 mRNA表达的影响 | 第46-47页 |
3.6.6 改性乳脂对Caco-2 细胞中MTP mRNA表达的影响 | 第47-48页 |
3.6.7 改性乳脂对Caco-2 细胞中DGAT1 mRNA表达的影响 | 第48-49页 |
3.6.8 改性乳脂对Caco-2 细胞中PPARα mRNA表达的影响 | 第49-50页 |
4. 讨论 | 第50-57页 |
4.1 1,3-甘油二酯的检测 | 第50-52页 |
4.2 改性乳脂 1,3-甘油二酯的制备 | 第52-54页 |
4.3 改性乳脂对脂代谢基因表达的影响 | 第54-57页 |
5. 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
作者简介 | 第65-66页 |
硕士期间发表的学术论文 | 第66页 |