| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 绪论 | 第7-15页 |
| ·胆固醇 | 第7-9页 |
| ·胆固醇的结构、性质及生理功能 | 第7页 |
| ·血清胆固醇过量的危害及防治 | 第7-8页 |
| ·降解食品中胆固醇的方法 | 第8-9页 |
| ·胆固醇氧化酶 | 第9-13页 |
| ·微生物来源 | 第9-10页 |
| ·酶学性质 | 第10页 |
| ·催化机制 | 第10-11页 |
| ·分子结构 | 第11页 |
| ·胆固醇氧化酶基因的克隆与表达 | 第11-12页 |
| ·胆固醇氧化酶的分离纯化 | 第12-13页 |
| ·立题背景与意义 | 第13-14页 |
| ·主要研究内容 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-22页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·菌株与质粒 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·试验方法 | 第16-22页 |
| ·胆固醇氧化酶高产菌株的筛选及鉴定 | 第16-18页 |
| ·胆固醇氧化酶基因的克隆与分析 | 第18页 |
| ·表达系统 BL21/pET28a-L2(252-273)-SUMO-ChoE 的构建 | 第18-19页 |
| ·融合蛋白 L2(252-273)-SUMO-ChoE 的诱导表达 | 第19-20页 |
| ·重组胆固醇氧化酶的纯化及主要酶学性质 | 第20-21页 |
| ·胆固醇氧化酶的酶活测定 | 第21页 |
| ·蛋白质的表征 | 第21-22页 |
| 3 结果与讨论 | 第22-41页 |
| ·胆固醇氧化酶高产菌株的筛选及鉴定 | 第22-24页 |
| ·菌株筛选 | 第22页 |
| ·菌种鉴定 | 第22-23页 |
| ·产物鉴定 | 第23-24页 |
| ·胆固醇氧化酶基因的克隆与分析 | 第24-30页 |
| ·胆固醇氧化酶基因的克隆 | 第24-25页 |
| ·胆固醇氧化酶的生物信息学分析 | 第25-30页 |
| ·融合蛋白 L2(252-273)-SUMO-ChoE 的表达 | 第30-33页 |
| ·表达系统 BL21/pET28a-L2(252-273)-SUMO-ChoE 的构建 | 第30-32页 |
| ·融合蛋白 L2(252-273)-SUMO-ChoE 的诱导表达及检测 | 第32-33页 |
| ·温度对融合蛋白 L2(252-273)-SUMO-ChoE 可溶性表达的影响 | 第33页 |
| ·重组胆固醇氧化酶的纯化及主要酶学性质 | 第33-41页 |
| ·SUMO 酶的制备 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白 L2(252-273)-SUMO-ChoE 在硅藻土上的吸附研究 | 第34-37页 |
| ·重组胆固醇氧化酶的纯化 | 第37-39页 |
| ·重组胆固醇氧化酶的酶学性质 | 第39-41页 |
| 主要结论 | 第41-42页 |
| 问题与展望 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 附录一 蛋白浓度标准曲线 | 第51-52页 |
| 附录二 生物信息学补充数据 | 第52-55页 |
| 附录三 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
