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甜菊苷的酶促糖基化和水解反应研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
英文缩略词表第5-9页
第一章 绪论第9-21页
   ·引言第9页
   ·甜菊糖的甜味成分第9-10页
   ·甜菊糖的生物合成第10-11页
   ·甜菊糖的药代动力学与毒理学第11-13页
   ·甜菊糖的生物活性第13-16页
     ·降血压作用第13-14页
     ·降血糖作用第14-15页
     ·抗腹泻作用第15页
     ·抗炎和抗癌作用第15页
     ·抑菌作用第15-16页
   ·甜菊糖的其他用途第16页
   ·甜菊糖的酶法转苷第16-19页
     ·呋喃果糖苷酶催化甜菊糖的果糖苷化第16-17页
     ·环糊精葡糖基转移酶催化甜菊糖的葡萄糖苷化第17-18页
     ·葡萄糖苷酶催化甜菊糖的葡萄糖苷化第18页
     ·半乳糖苷酶催化甜菊糖的半乳糖苷化第18-19页
   ·立题依据与主要研究内容第19-21页
第二章 环糊精葡萄糖基转移酶催化甜菊苷的转苷反应第21-43页
   ·前言第21页
   ·实验试剂与仪器第21页
   ·实验方法第21-25页
     ·甜菊苷的提纯第21-22页
     ·CGTase 的蛋白含量测定第22页
     ·CGTase 的聚丙烯酞胺凝胶电泳 (SDS-PEGA)第22-23页
     ·α-中温淀粉酶催化玉米淀粉的液化水解第23页
     ·α-CGTase 环化酶活的测定第23页
     ·α-淀粉酶和 CGTase 水解酶活的测定第23页
     ·常规加热下 CGTase 催化甜菊苷的转苷反应第23-24页
     ·β-半乳糖苷酶催化甜菊苷的转苷反应第24页
     ·淀粉糖化酶催化水解转苷产物第24页
     ·转苷产物的解析第24-25页
     ·转苷产物溶解度、稳定性及味质测定第25页
   ·结果与讨论第25-42页
     ·甜菊苷的提纯第25-27页
     ·CGTase 的几种酶学特性第27-30页
     ·CGTase 催化改性甜菊苷的产物解析第30-33页
     ·常规加热下 CGTase 催化改性甜菊苷的反应条件优化第33-38页
     ·甜菊苷转苷产物的溶解度以及味质第38-39页
     ·其他转苷酶催化甜菊苷的转苷反应第39-42页
   ·本章小结第42-43页
第三章 β-半乳糖苷酶选择性催化水解甜菊苷的β-1,2 葡萄糖苷键第43-59页
   ·前言第43页
   ·实验试剂与仪器第43-44页
   ·实验方法第44-45页
     ·β-半乳糖苷酶水解酶活测定第44页
     ·β-半乳糖苷酶的葡萄糖苷酶酶活测定第44页
     ·β-半乳糖苷酶催化水解甜菊苷第44页
     ·产物的分离纯化与表征第44-45页
     ·悬钩子苷的溶解行为第45页
   ·结果与讨论第45-57页
     ·酶种筛选第45-46页
     ·水解产物的分离纯化第46-48页
     ·水解产物解析第48-49页
     ·甜菊苷的转苷反应第49-50页
     ·β-半乳糖苷酶催化水解甜菊苷的底物特异性第50-54页
     ·水解反应条件优化第54-55页
     ·金属离子对水解反应的影响第55页
     ·β-半乳糖苷酶催化水解反应的米氏方程第55-56页
     ·悬钩子苷甜度以及溶解行为第56-57页
   ·本章小结第57-59页
第四章 甜菊苷的 C19 位糖酯基及 C13 位槐糖基水解第59-69页
   ·前言第59页
   ·实验试剂与仪器第59-60页
   ·实验方法第60页
     ·来源于 Sulfolobus sp.的β-半乳糖苷酶水解活力测定第60页
     ·β-半乳糖苷酶催化甜菊苷水解反应及产物纯化表征第60页
     ·无机酸碱催化水解甜菊苷制备甜菊双糖苷和异甜菊醇第60页
     ·水解产物溶解性能测定第60页
     ·清除羟基自由基性能研究第60页
   ·结果与讨论第60-67页
     ·选择性水解甜菊苷 C19 位糖酯键制备甜菊双糖苷第60-63页
     ·β-半乳糖苷酶催化水解甜菊苷制备甜菊醇第63-67页
     ·甜菊苷水解衍生物性能研究第67页
   ·本章小结第67-69页
第五章 连续微波辐射在甜菊苷转苷反应中的应用第69-75页
   ·前言第69页
   ·实验试剂与仪器第69页
   ·实验方法第69-70页
     ·微波辐射辅助甜菊苷的转苷反应第69页
     ·微波辐射辅助β-半乳糖苷酶催化甜菊苷的水解反应第69-70页
   ·结果与讨论第70-74页
     ·微波辐射对糖苷酶催化甜菊苷反应的作用第70-71页
     ·微波辅助α-CGTase 催化甜菊苷的转苷反应第71-72页
     ·微波辐射对α-CGTase 催化改性甜菊苷产物选择性的影响第72-73页
     ·微波辐射对α-CGTase 酶水解活性的影响第73-74页
   ·本章小结第74-75页
全文主要结论第75-76页
主要创新点第76-77页
致谢第77-78页
参考文献第78-86页
攻读博士学位期间发表的论文第86页
已申请或授权的专利第86-87页
附录一 CGTase 催化甜菊苷转苷反应中主要产物的质谱图第87-88页
附录二 聚丙烯酰胺凝胶柱分离转苷产物时的 TLC第88-89页
附录三 St-Glu 1 的 NMR第89-90页
附录四 甜菊苷转苷产物中 St-Glu 2 和 St-Glu 3 的质量色谱图第90-91页
附录五 甜菊糖苷类物质的 IR第91-93页
附录六 悬钩子苷的 NMR第93-94页
附录七 转苷产物的 LC-MSMS第94-95页
附录八 甜菊双糖苷的 NMR第95-96页
附录九 甜菊醇的 NMR第96页

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