| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 结肠癌 | 第10页 |
| 1.1.1 结肠癌现状 | 第10页 |
| 1.1.2 结肠癌与大豆异黄酮的关系 | 第10页 |
| 1.2 大豆异黄酮概况 | 第10-13页 |
| 1.2.1 大豆异黄酮生理功能研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.2 染料木黄酮抗肿瘤作用 | 第13页 |
| 1.2.3 大豆黄素抗肿瘤作用 | 第13页 |
| 1.3 脂滴 | 第13-16页 |
| 1.3.1 脂滴的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.3.2 脂滴的作用 | 第14页 |
| 1.3.3 PAT家族蛋白研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.4 Caspase家族蛋白研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 本论文的研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 1.5 研究内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-32页 |
| 2.1 试验细胞 | 第18页 |
| 2.2 主要实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.3 仪器与设备 | 第19-20页 |
| 2.4 HT-29细胞的体外培养 | 第20-21页 |
| 2.4.1 细胞复苏 | 第20页 |
| 2.4.2 细胞培养和传代 | 第20页 |
| 2.4.3 细胞冻存 | 第20-21页 |
| 2.5 HT-29细胞增殖活性的测定 | 第21页 |
| 2.6 不同作用时间染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞外观形态的影响 | 第21-22页 |
| 2.7 流式细胞术检测染料木黄酮和大豆黄素处理HT-29细胞后对细胞凋亡率的影响 | 第22页 |
| 2.8 油红O染色观察脂滴在HT-29细胞内的蓄积情况 | 第22-23页 |
| 2.9 免疫荧光染色观察脂滴在HT-29细胞内的蓄积情况 | 第23-24页 |
| 2.10 HT-29细胞中脂质代谢相关基因表达水平的测定 | 第24-28页 |
| 2.10.1 HT-29细胞中总RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.10.2 反转录合成cDNA | 第26页 |
| 2.10.3 聚合酶链式反应(PCR) | 第26-28页 |
| 2.10.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| 2.11 Western Blot法测定HT-29细胞蛋白中表达水平的影响 | 第28-32页 |
| 2.11.1 HT-29细胞中总蛋白的提取 | 第28-29页 |
| 2.11.2 蛋白质含量测定 | 第29页 |
| 2.11.3 所需试剂配制 | 第29-30页 |
| 2.11.4 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30页 |
| 2.11.5 转移电泳 | 第30页 |
| 2.11.6 杂交 | 第30-32页 |
| 3 结果与讨论 | 第32-56页 |
| 3.1 HT-29细胞增殖活性的研究 | 第32-33页 |
| 3.2 不同作用时间染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞外观形态的影响 | 第33-34页 |
| 3.3 流式细胞术检测染料木黄酮和大豆黄素作用于HT-29细胞后细胞凋亡率情况 | 第34-36页 |
| 3.4 油红O染色观察脂滴在HT-29细胞内的蓄积情况 | 第36-37页 |
| 3.5 BODIPY染色法和免疫荧光染色法检测脂滴在HT-29细胞内的蓄积 | 第37-39页 |
| 3.5.1 BODIPY染色法检测脂滴在HT-29细胞内的积累情况 | 第37页 |
| 3.5.2 免疫荧光检测染料木黄酮和大豆黄素对Vimentin蛋白在HT-29细胞内表达情况的影响 | 第37-38页 |
| 3.5.3 DAPI检测细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 3.6 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞脂代谢相关基因表达水平的影响 | 第39-48页 |
| 3.6.1 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中PPAR-γ基因表达水平的影响 | 第39-40页 |
| 3.6.2 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中Fas基因表达水平的影响 | 第40-41页 |
| 3.6.3 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中DGAT2基因表达水平的影响 | 第41-43页 |
| 3.6.4 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中ACC1基因表达水平的影响 | 第43-44页 |
| 3.6.5 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中UCP2基因表达水平的影响 | 第44-45页 |
| 3.6.6 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中LU5/5基因表达水平的影响 | 第45-46页 |
| 3.6.7 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中GP/in基因表达水平的影响 | 第46-47页 |
| 3.6.8 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中MTTP基因表达水平的影响 | 第47-48页 |
| 3.7 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中蛋白表达水平的影响 | 第48-56页 |
| 3.7.1 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中Perilipin蛋白表达水平的影响 | 第48-49页 |
| 3.7.2 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中ADRP蛋白表达水平的影响 | 第49-50页 |
| 3.7.3 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中Vimentin蛋白表达水平的影响 | 第50-51页 |
| 3.7.4 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中ERK蛋白表达水平的影响 | 第51-52页 |
| 3.7.5 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中Caspase-8蛋白表达水平的影响 | 第52-53页 |
| 3.7.6 染料木黄酮和大豆黄素对HT-29细胞中FOXO3a蛋白表达水平的影响 | 第53-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-65页 |
| 7 攻读硕士期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 8 致谢 | 第66页 |
