| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 灰树花 | 第10-11页 |
| 1.1.1 灰树花生产概况 | 第10页 |
| 1.1.2 灰树花的营养物质及药用价值 | 第10-11页 |
| 1.1.3 灰树花的开发应用现状 | 第11页 |
| 1.2 多糖 | 第11-16页 |
| 1.2.1 多糖的概述 | 第11-12页 |
| 1.2.2 多糖的分离提纯 | 第12-13页 |
| 1.2.3 多糖的纯度和分子量鉴定 | 第13-14页 |
| 1.2.4 多糖的结构分析 | 第14页 |
| 1.2.5 多糖的生物活性 | 第14-16页 |
| 1.3 结肠癌简介 | 第16页 |
| 1.3.1 结肠癌 | 第16页 |
| 1.3.2 多糖与结肠癌的关系 | 第16页 |
| 1.4 细胞凋亡 | 第16-18页 |
| 1.4.1 细胞凋亡概述 | 第16页 |
| 1.4.2 细胞凋亡与肿瘤 | 第16-17页 |
| 1.4.3 细胞凋亡信号通路 | 第17-18页 |
| 1.5 研究目的意义 | 第18页 |
| 1.6 研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 灰树花子实体与细胞株 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-22页 |
| 2.1.3 仪器与设备 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要溶液 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 灰树花粗多糖的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 灰树花多糖的分离纯化 | 第24-25页 |
| 2.2.3 灰树花子实体多糖的纯度鉴定 | 第25页 |
| 2.2.4 多糖的理化性质 | 第25-27页 |
| 2.2.5 紫外扫描 | 第27-28页 |
| 2.2.6 红外光谱 | 第28页 |
| 2.2.7 气相色谱 | 第28-29页 |
| 2.2.8 细胞体外培养 | 第29-30页 |
| 2.2.9 细胞体外增殖抑制实验 | 第30页 |
| 2.2.10 细胞形态学观察 | 第30-32页 |
| 2.2.11 蛋白抽提试验 | 第32页 |
| 2.2.12 免疫印迹实验 | 第32-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-54页 |
| 3.1 灰树花多糖的提取及分离纯化 | 第35-37页 |
| 3.1.1 灰树花多糖的提取 | 第35页 |
| 3.1.2 葡聚糖凝胶色谱Sephadex G200分离灰树花粗多糖 | 第35页 |
| 3.1.3 葡聚糖凝胶色谱Sephadex G75分离灰树花多糖组分 | 第35-36页 |
| 3.1.4 纯化后的灰树花多糖的糖含量检测 | 第36页 |
| 3.1.5 纯化的灰树花多糖的蛋白含量检测 | 第36-37页 |
| 3.2 高效液相色谱(HPLC)鉴定GFD并测定其分子量 | 第37-38页 |
| 3.3 纯化后的灰树花多糖的理化性质分析 | 第38-43页 |
| 3.3.1 显色实验 | 第38-39页 |
| 3.3.2 紫外光谱鉴定多糖的纯度 | 第39-40页 |
| 3.3.3 红外光谱分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 气相色谱分析 | 第41-43页 |
| 3.4 细胞体外实验 | 第43-44页 |
| 3.5 细胞形态学观察 | 第44-47页 |
| 3.5.1 AO/EB染色检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| 3.5.2 DAPI染色检测细胞凋亡 | 第45-46页 |
| 3.5.3 扫面电子显微镜检测细胞凋亡 | 第46-47页 |
| 3.6 免疫印迹实验 | 第47-54页 |
| 3.6.1 GFD诱导HT-29凋亡中PI3K、JNK蛋白表达的变化情况 | 第47-49页 |
| 3.6.2 GFD诱导HT-29凋亡中Bcl-2家族蛋白表达的变化情况 | 第49-51页 |
| 3.6.3 GFD诱导HT-29凋亡中Caspase家族蛋白表达的变化情况 | 第51-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 5 展望 | 第55-56页 |
| 6 参考文献 | 第56-63页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第63-64页 |
| 8 致谢 | 第64页 |
