| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| ·乳酸菌简介 | 第11-12页 |
| ·乳酸菌细菌素 | 第12-14页 |
| ·乳酸菌细菌素的分类 | 第12-13页 |
| ·乳酸菌细菌素的应用 | 第13-14页 |
| ·乳酸菌群体感应系统 | 第14-22页 |
| ·群体感应对乳酸菌细菌素合成的调节 | 第16-22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| ·本研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 第二章 植物乳杆菌ZJ316群体感应系统基因克隆 | 第24-35页 |
| ·实验材料和仪器 | 第24-26页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·引物 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-28页 |
| ·菌种的活化 | 第26页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316目的基因plnABCD的PCR扩增 | 第27页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316目的基因plnABCD的PCR产物测序及比对 | 第27-28页 |
| ·实验结果与分析 | 第28-34页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316的基因组DNA | 第28页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316目的基因plnABCD的PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316目的基因plnABCD的PCR产物测序结果 | 第29-32页 |
| ·植物乳杆菌ZJ316目的基因plnABCD的PCR产物比对结果 | 第32-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 PlnC和PlnD的生物信息学分析 | 第35-46页 |
| ·实验材料和仪器 | 第35页 |
| ·plnC、plnD编码的氨基酸序列 | 第35页 |
| ·生物信息学工具 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白一级结构的确定 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白理化性质的预测 | 第36页 |
| ·重组蛋白二级结构的预测 | 第36页 |
| ·目标蛋白功能预测 | 第36页 |
| ·重组蛋白的空间结构预测 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-44页 |
| ·重组蛋白一级结构的确定 | 第36-38页 |
| ·目标蛋白的理化性质预测 | 第38-42页 |
| ·目标蛋白的二级结构含量预测 | 第42页 |
| ·目标蛋白功能预测 | 第42-44页 |
| ·目标蛋白空间构像的预测 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第四章 plnC、plnD基因在E.coli中的表达 | 第46-66页 |
| ·实验材料和仪器 | 第46-48页 |
| ·菌种 | 第46页 |
| ·质粒 | 第46页 |
| ·引物 | 第46-47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器和设备 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-55页 |
| ·菌种的活化 | 第48页 |
| ·目的基因plnC、plnD的获得 | 第48-49页 |
| ·原核克隆载体的构建 | 第49-51页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第51-53页 |
| ·pET-plnC、pET-plnD转化表达受体菌BL21(DE3) | 第53页 |
| ·pET-plnC-BL21、pET-plnD-BL21阳性菌落的筛选及鉴定 | 第53页 |
| ·优化诱导条件 | 第53页 |
| ·重组蛋白小量诱导表达 | 第53-54页 |
| ·SDS-PAGE | 第54-55页 |
| ·实验结果与分析 | 第55-65页 |
| ·原核克隆载体构建 | 第55-57页 |
| ·原核表达载体构建 | 第57-62页 |
| ·诱导条件的优化 | 第62-64页 |
| ·SDS-PAGE | 第64-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 目标蛋白的纯化 | 第66-77页 |
| ·实验材料和仪器 | 第66-67页 |
| ·菌株 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·主要仪器和设备 | 第66-67页 |
| ·试验方法 | 第67-70页 |
| ·重组菌的扩大培养 | 第67页 |
| ·重组菌包涵体的制备 | 第67-68页 |
| ·Ni-NTA亲和层析纯化重组蛋白 | 第68页 |
| ·包涵体的复性 | 第68-69页 |
| ·葡聚糖凝胶柱层析分离纯化目标蛋白 | 第69页 |
| ·目标蛋白的进一步纯化 | 第69-70页 |
| ·试验结果与分析 | 第70-75页 |
| ·重组菌的包涵体 | 第70-71页 |
| ·Ni-NTA亲和层析纯化包涵体 | 第71页 |
| ·包涵体的复性 | 第71-72页 |
| ·葡聚糖凝胶柱层析G200分离纯化目标蛋白 | 第72-73页 |
| ·目标蛋白的进一步纯化 | 第73-75页 |
| ·本章小结 | 第75-77页 |
| 第六章 总结和展望 | 第77-79页 |
| ·全文总结 | 第77-78页 |
| ·工作展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 附录Ⅰ 研究生期间科研成果 | 第87-88页 |
| 附录Ⅱ 部分试剂的配制 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
