| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-28页 |
| 1 生物矿化与磷蛋白 | 第15-18页 |
| 1.1 生物矿化概述 | 第15-16页 |
| 1.2 生物矿化的调控 | 第16页 |
| 1.3 生物矿化中磷蛋白的作用 | 第16-17页 |
| 1.4 磷蛋白调控矿化研究的模型 | 第17-18页 |
| 2 卵黄高磷蛋白参与生物矿化推测 | 第18-20页 |
| 2.1 基于生物进化关系和遗传信息推测PV参与生物矿化 | 第18页 |
| 2.2 PV为卵生动物骨骼发育提供磷 | 第18-19页 |
| 2.3 PV替代VC促进胶原合成与骨矿化 | 第19页 |
| 2.4 生物信息学分析推测PV可能具有调控生物矿化的功能 | 第19-20页 |
| 3 PV调控生物矿化研究 | 第20-22页 |
| 3.1 PV调控矿化的体外研究 | 第20-21页 |
| 3.2 PV调控矿化的细胞学研究 | 第21-22页 |
| 3.3 PV调控矿化的其他研究 | 第22页 |
| 4 静电纺丝膜在骨仿生矿化研究中的应用 | 第22-24页 |
| 4.1 静电纺丝膜仿生溶液矿化体系 | 第22-23页 |
| 4.2 静电纺丝胶原蛋白膜 | 第23页 |
| 4.3 蛋白质对电纺膜仿生溶液矿化体系的调控 | 第23-24页 |
| 5 生物矿化中的细胞行为 | 第24-26页 |
| 5.1 成骨细胞与破骨细胞在骨矿化中的作用 | 第24页 |
| 5.2 成骨细胞与骨矿化 | 第24-25页 |
| 5.2.1 MC3T3-E1细胞模型 | 第24-25页 |
| 5.2.2 成骨细胞分化及骨形成功能 | 第25页 |
| 5.3 破骨细胞与骨吸收 | 第25页 |
| 5.4 PV与骨矿化的细胞学研究 | 第25-26页 |
| 6 本课题选题的学术思想 | 第26-28页 |
| 6.1 研究的目的和意义 | 第26页 |
| 6.2 学术思路 | 第26-27页 |
| 6.3 主要研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 胶原电纺膜仿生矿化体系的构建 | 第28-42页 |
| 1 材料与方法 | 第29-32页 |
| 1.1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第29页 |
| 1.1.2 主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| 1.1.3 溶液的配制 | 第30页 |
| 1.2 方法 | 第30-32页 |
| 1.2.1 实验设计 | 第30-31页 |
| 1.2.2 静电纺丝胶原蛋白纤维膜的制备 | 第31页 |
| 1.2.3 静电纺丝胶原蛋白膜的交联 | 第31页 |
| 1.2.5 材料的表征 | 第31-32页 |
| 2 结果与讨论 | 第32-41页 |
| 2.1 胶原电纺膜交联前后的表征 | 第32-33页 |
| 2.2 胶原电纺膜仿生矿化模型的建立 | 第33-40页 |
| 2.2.1 矿化方式对胶原电纺膜矿化体系的影响 | 第33-35页 |
| 2.2.2 10×SBF矿化液的量对胶原电纺膜矿化的影响 | 第35-36页 |
| 2.2.3 矿化液pH对胶原电纺膜矿化的影响 | 第36-38页 |
| 2.2.4 直接矿化与预矿化对胶原电纺膜矿化的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.5 矿化时间对胶原电纺膜矿化的影响 | 第39-40页 |
| 2.3 矿化物的XRD与FTIR表征 | 第40-41页 |
| 3 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 胶原电纺膜仿生矿化体系在蛋白诱导矿化中的应用 | 第42-57页 |
| 1 材料与方法 | 第43-47页 |
| 1.1 材料 | 第43-45页 |
| 1.1.1 原料 | 第43页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 | 第44-45页 |
| 1.1.4 溶液的配制 | 第45页 |
| 1.2 方法 | 第45-47页 |
| 1.2.1 实验设计 | 第45页 |
| 1.2.2 卵黄高磷蛋白的提取纯化鉴定 | 第45-46页 |
| 1.2.3 蛋白诱导矿化实验 | 第46页 |
| 1.2.4 矿化材料的表征 | 第46-47页 |
| 2 结果与讨论 | 第47-55页 |
| 2.1 卵黄高磷蛋白的制备 | 第47-48页 |
| 2.2 利用胶原电纺膜仿生矿化模型进行蛋白质诱导矿化实验 | 第48-55页 |
| 2.2.1 蛋白质诱导矿化实验的SEM表征 | 第48-51页 |
| 2.2.2 蛋白诱导矿化实验的XPS表征 | 第51-52页 |
| 2.2.3 蛋白质诱导矿化实验的XRD表征 | 第52-54页 |
| 2.2.4 PV诱导矿化实验的HPLC表征 | 第54-55页 |
| 3 本章小结 | 第55-57页 |
| 第四章 卵黄高磷蛋白磷酸化程度对MC3T3-E1细胞分化及矿化的影响 | 第57-73页 |
| 1 材料与方法 | 第57-65页 |
| 1.1 材料 | 第57-61页 |
| 1.1.1 原料 | 第57-58页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第58-59页 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 | 第59-60页 |
| 1.1.4 溶液的配制 | 第60-61页 |
| 1.2 方法 | 第61-65页 |
| 1.2.1 实验设计 | 第61页 |
| 1.2.2 不同磷酸化程度的卵黄高磷蛋白的制备 | 第61-62页 |
| 1.2.3 细胞培养操作程序 | 第62页 |
| 1.2.4 CCK-8法测定细胞增殖 | 第62-63页 |
| 1.2.5 磷酸化程度对MC3T3-E1成骨细胞分化和矿化的影响 | 第63页 |
| 1.2.6 磷酸化程度对MC3T3-E1成骨细胞骨形成相关基因BMP-2、OPG和RANKL mRNA表达的影响 | 第63-65页 |
| 1.2.7 统计学分析 | 第65页 |
| 2 结果与讨论 | 第65-72页 |
| 2.1 卵黄高磷蛋白的脱磷酸化程度的计算 | 第65-66页 |
| 2.2 不同脱磷酸化程度卵黄高磷蛋白的电泳分析 | 第66页 |
| 2.3 MC3T3-E1细胞增殖活力测定结果 | 第66-67页 |
| 2.4 MC3T3-E1细胞分化结果 | 第67-68页 |
| 2.5 磷酸化水平对MC3T3-E1细胞ALP活性的影响 | 第68-69页 |
| 2.6 磷酸化水平对MC3T3-E1形成矿化结节的影响 | 第69-70页 |
| 2.7 PV对MC3T3-E1中BMP-2，RANKL和OPG mRNA表达的影响 | 第70-72页 |
| 3 本章小结 | 第72-73页 |
| 第五章 卵黄高磷蛋白对RAW264.7细胞生长及分化的影响 | 第73-88页 |
| 1 材料与方法 | 第73-79页 |
| 1.1 材料 | 第73-76页 |
| 1.1.1 原料 | 第73页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第73-74页 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 | 第74-75页 |
| 1.1.4 溶液的配制 | 第75-76页 |
| 1.2 方法 | 第76-79页 |
| 1.2.1 实验设计 | 第76页 |
| 1.2.2 PV提取纯化 | 第76页 |
| 1.2.3 RAW264.7细胞培养操作程序 | 第76-77页 |
| 1.2.4 CCK-8法测定细胞增殖 | 第77页 |
| 1.2.5 流式细胞仪测定细胞周期 | 第77-78页 |
| 1.2.6 RAW264.7细胞凋亡率的检测 | 第78页 |
| 1.2.7 PV对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响 | 第78-79页 |
| 1.2.8 对破骨细胞TRAP活性的影响 | 第79页 |
| 1.2.9 统计学分析 | 第79页 |
| 2 结果与讨论 | 第79-87页 |
| 2.1 PV对RAW264.7细胞活力的影响 | 第79-80页 |
| 2.2 PV对RAW264.7细胞周期的影响 | 第80-83页 |
| 2.3 PV对RAW264.7细胞凋亡的影响 | 第83-86页 |
| 2.4 PV对RAW264.7细胞分化为破骨细胞的影响 | 第86页 |
| 2.5 PV对TRAP活性的影响 | 第86-87页 |
| 3 本章小结 | 第87-88页 |
| 第六章 结论与展望 | 第88-91页 |
| 1 结论 | 第88-89页 |
| 2 实验创新点 | 第89页 |
| 3 展望 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 附录 研究生期间科研成果及参与活动情况 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
