| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-18页 |
| ·概述 | 第8-9页 |
| ·国外生物质乙醇的发展及现状 | 第8页 |
| ·我国生物质乙醇的发展及现状 | 第8页 |
| ·生物乙醇工业化发展的瓶颈 | 第8-9页 |
| ·木糖代谢重组酿酒酵母的构建 | 第9-16页 |
| ·木糖的异构化途径 | 第10-12页 |
| ·木糖运输 | 第12-13页 |
| ·氧化还原酶途径及其辅酶平衡 | 第13-14页 |
| ·木酮糖磷酸化 | 第14-15页 |
| ·非氧化磷酸戊糖（PP）途径 | 第15-16页 |
| ·本课题的研究背景及依据 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-36页 |
| ·实验材料 | 第18-26页 |
| ·质粒、引物及菌株 | 第18-23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·溶液 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·感受态细胞的制备与大肠杆菌转化 | 第26-27页 |
| ·小规模提取大肠杆菌 E.coil 质粒（CTAB 法） | 第27页 |
| ·酵母染色体的快速提取 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第28-29页 |
| ·DNA 限制性内切酶消化 | 第29页 |
| ·DNA 连接反应 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·DNA 片段的纯化 | 第30页 |
| ·酿酒酵母细胞的转化 | 第30-31页 |
| ·一步基因置换 | 第31-32页 |
| ·两步基因置换 | 第32-33页 |
| ·酿酒酵母总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·cDNA 的合成和 RT-QPCR | 第34页 |
| ·发酵实验及产物分析 | 第34-36页 |
| ·发酵实验 | 第34-35页 |
| ·发酵液组分的测定 | 第35-36页 |
| 第三章 木糖专一化重组酿酒酵母菌株的构建 | 第36-40页 |
| ·概述 | 第36页 |
| ·缺失质粒 pUC-pPGI1-URA3-tPGI1 的构建 | 第36-37页 |
| ·木糖专一化菌株 AYHENW2-pgi1 的构建 | 第37-38页 |
| ·菌株 AYHNEW2-pgi1 的木糖发酵性能研究 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第四章 基于 PP途径的木糖代谢酿酒酵母菌株构建 | 第40-61页 |
| ·概述 | 第40-41页 |
| ·过表达质粒的构建 | 第41-44页 |
| ·过表达质粒 YIplac211-pRKI1-pFBA1-RKI1 的构建 | 第41页 |
| ·过表达质粒 YIplac211-pRPE1-pHXT7-RPE1 的构建 | 第41-42页 |
| ·过表达质粒 YIplac211-pTAL1-pCCW12-TAL1 的构建 | 第42-43页 |
| ·过表达质粒 YIplac211-pTKL1-pGPM1-TKL1 的构建 | 第43-44页 |
| ·系列过表达酿酒酵母菌株的构建 | 第44-48页 |
| ·重组菌株 AYHNEW2-NOXE 的构建 | 第44-45页 |
| ·单基因过表达菌株的构建 | 第45-47页 |
| ·双基因过表达菌株的构建 | 第47页 |
| ·三基因过表达菌株的构建 | 第47页 |
| ·同步过表达菌株的构建 | 第47-48页 |
| ·重组菌株 PP 途径基因的转录强度 | 第48-49页 |
| ·重组菌株木糖发酵性能研究 | 第49-53页 |
| ·单基因过表达菌株的发酵性能 | 第49-50页 |
| ·双基因过表达菌株的发酵性能 | 第50-51页 |
| ·多基因过表达菌株的发酵性能测试 | 第51-53页 |
| ·重组菌株的发酵性能对比研究 | 第53-57页 |
| ·重组菌株在 5%的木糖条件下的发酵性能 | 第53-54页 |
| ·重组菌株在 8%木糖浓度下的发酵性能 | 第54-55页 |
| ·重组菌株的混合糖发酵性能 | 第55-57页 |
| ·AYHNEW2 系列重组菌株的乙醇抑制实验 | 第57-59页 |
| ·本章小结 | 第59-61页 |
| 第五章 总结与展望 | 第61-63页 |
| ·总结 | 第61页 |
| ·展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69-70页 |
| 附录 生化名词缩写 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
