| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 一 前言 | 第7-17页 |
| ·黄曲霉毒素的研究概况 | 第7-10页 |
| ·黄曲霉毒素概述 | 第7页 |
| ·黄曲霉毒素的发现 | 第7页 |
| ·黄曲霉毒素的种类与结构 | 第7-8页 |
| ·黄曲霉毒素的理化特性 | 第8页 |
| ·黄曲霉毒素的限量标准 | 第8-10页 |
| ·黄曲霉毒素的检测方法 | 第10-12页 |
| ·高效液相色谱法（HPLC） | 第10页 |
| ·薄层层析法（TLC） | 第10-11页 |
| ·酶联免疫吸附法（ELISA） | 第11页 |
| ·微柱筛选法（MS） | 第11页 |
| ·免疫金标记技术（GICA） | 第11-12页 |
| ·黄曲霉毒素的危害 | 第12-13页 |
| ·黄曲霉毒素对动物的危害 | 第12-13页 |
| ·黄曲霉毒素对人类的危害 | 第13页 |
| ·黄曲霉毒素的去除方法 | 第13-15页 |
| ·机械去除法 | 第13页 |
| ·物理方法 | 第13-14页 |
| ·化学方法 | 第14页 |
| ·生物学方法 | 第14-15页 |
| ·酿酒酵母表面展示技术概述 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 二 黄曲霉毒素降解酶基因的克隆 | 第17-27页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第17页 |
| ·工具酶 | 第17页 |
| ·仪器与设备 | 第17-18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·试剂的配制 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| ·假蜜环菌总 RNA 的提取 | 第19页 |
| ·反转录 | 第19-20页 |
| ·PCR 扩增目的基因片断 | 第20-21页 |
| ·目的基因片断的回收 | 第21页 |
| ·目的片断与 PMD-18T 载体连接 | 第21-22页 |
| ·E.coli TOP10 感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·转化 E.coli TOP10 | 第22-23页 |
| ·质粒的提取 | 第23页 |
| ·重组质粒的 PCR 验证 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-26页 |
| ·黄曲霉毒素降解酶基因的获得 | 第24-25页 |
| ·质粒 PCR 产物电泳检测 | 第25页 |
| ·测序结果 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 三 黄曲霉毒素降解酶在酿酒酵母细胞表面上的展示 | 第27-40页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·菌株与质粒 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·工具酶及试剂 | 第28页 |
| ·仪器与设备 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-35页 |
| ·获取质粒 pYD1 | 第29页 |
| ·重组质粒 pYD1- ADTZ 的构建 | 第29-30页 |
| ·pYD1- ADTZ 转化 E.coliTOP10 | 第30页 |
| ·重组质粒 pYD1- ADTZ 的验证 | 第30页 |
| ·转化酿酒酵母 EBY100 | 第30-31页 |
| ·酵母基因组的提取 | 第31页 |
| ·PCR 验证 | 第31-32页 |
| ·双酶切验证 | 第32-33页 |
| ·诱导表达 | 第33页 |
| ·Bradford 法蛋白定量 | 第33页 |
| ·酶活测定 | 第33-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-40页 |
| ·重组质粒 pYD1-ADTZ 的鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·bradford 法蛋白定量 | 第36-37页 |
| ·酶活测定 | 第37-40页 |
| 四 表面展示的黄曲霉毒素降解酶的酶活性质研究 | 第40-43页 |
| ·表面展示 ADTZ 的酶活检测 | 第40页 |
| ·表面展示 ADTZ 与 AFB1的反应时间对降解率的影响 | 第40页 |
| ·表面展示 ADTZ 的最佳诱导时间 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-42页 |
| ·表面展示 ADTZ 与 AFB1的反应时间对降解率的影响 | 第40-41页 |
| ·表面展示 ADTZ 的最佳诱导时间 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
