摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第一章 绪论 | 第12-20页 |
1.1 单增李斯特菌概述 | 第12-16页 |
1.1.1 生长特性 | 第12页 |
1.1.2 毒力因子 | 第12-13页 |
1.1.2.1 内化素(Inl) | 第13页 |
1.1.2.2 溶血素(LLO) | 第13页 |
1.1.2.3 转录活化因子(PrfA) | 第13页 |
1.1.3 群体感应概述 | 第13-15页 |
1.1.3.1 AI-2介导的群体感应系统 | 第14页 |
1.1.3.2 Agr介导的群体感应系统 | 第14-15页 |
1.1.4 生物膜 | 第15-16页 |
1.1.5 单增李斯特菌及其生理活性的检测方法 | 第16页 |
1.1.5.1 传统平板培养法 | 第16页 |
1.1.5.2 免疫学检测法 | 第16页 |
1.1.5.3 分子生物学检测法 | 第16页 |
1.1.5.4 其他检测法 | 第16页 |
1.2 含硫香料 | 第16-19页 |
1.2.1 含硫香料简介 | 第16-17页 |
1.2.2 含硫香料分类 | 第17-18页 |
1.2.2.1 硫醇类香料 | 第17页 |
1.2.2.2 硫醚类香料 | 第17页 |
1.2.2.3 硫酯类香料 | 第17页 |
1.2.2.4 缩硫醛酮类香料 | 第17-18页 |
1.2.2.5 含硫杂环类香料 | 第18页 |
1.2.3 含硫香料的发展前景 | 第18-19页 |
1.3 研究目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 含硫香料对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第20-42页 |
2.1 材料与仪器 | 第20-22页 |
2.1.1 实验样品 | 第20页 |
2.1.2 实验菌株 | 第20页 |
2.1.3 培养基 | 第20-21页 |
2.1.4 试剂及药品 | 第21页 |
2.1.5 仪器设备 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-26页 |
2.2.1 菌液的制备 | 第22页 |
2.2.2 样品处理 | 第22-23页 |
2.2.3 最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第23页 |
2.2.4 含硫香料作用下单增李斯特菌生长曲线的测定 | 第23页 |
2.2.5 含硫香料对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第23-26页 |
2.2.5.1 细菌总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.5.2 RNA纯化及检测 | 第24页 |
2.2.5.3 cDNA的合成 | 第24页 |
2.2.5.4 引物特异性验证及内参基因标准曲线的建立 | 第24-25页 |
2.2.5.5 BITC对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第25页 |
2.2.5.6 MTPITC对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第25-26页 |
2.2.5.7 DADS对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第26页 |
2.2.6 结果的统计分析 | 第26页 |
2.3 结果与讨论 | 第26-40页 |
2.3.1 三种含硫香料对单增李斯特菌MIC的测定结果 | 第26-27页 |
2.3.1.1 BITC对单增李斯特菌的MIC | 第26页 |
2.3.1.2 MTPITC对单增李斯特菌的MIC | 第26-27页 |
2.3.1.3 DADS对单增李斯特菌的MIC | 第27页 |
2.3.2 三种含硫香料对单增李斯特菌生长的影响 | 第27-29页 |
2.3.2.1 BITC对单增李斯特菌生长的影响 | 第27-28页 |
2.3.2.2 MTPITC对单增李斯特菌生长的影响 | 第28-29页 |
2.3.2.3 DADS对单增李斯特菌生长的影响 | 第29页 |
2.3.3 含硫香料对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第29-40页 |
2.3.3.1 细菌RNA的提取及纯化 | 第29-30页 |
2.3.3.2 RT-qPCR法引物特异性验证 | 第30-34页 |
2.3.3.3 BITC对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第34-36页 |
2.3.3.4 MIPITC对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第36-38页 |
2.3.3.5 DADS对单增李斯特菌毒力基因表达的影响 | 第38-40页 |
2.4 本章小结 | 第40-42页 |
第三章 含硫香料对单增李斯特菌群体感应基因表达的影响 | 第42-53页 |
3.1 材料与仪器 | 第42-43页 |
3.1.1 实验样品 | 第42页 |
3.1.2 实验菌株 | 第42页 |
3.1.3 培养基 | 第42页 |
3.1.4 试剂及药品 | 第42-43页 |
3.1.5 仪器设备 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-45页 |
3.2.1 菌液的制备 | 第43页 |
3.2.2 含硫香料对单增李斯特菌群体感应信号分子AI-2分泌的影响 | 第43-44页 |
3.2.3 含硫香料对单增李斯特菌群体感应基因LuxS表达的影响 | 第44-45页 |
3.2.3.1 细菌总RNA的提取 | 第44页 |
3.2.3.2 RNA的纯化及检测 | 第44页 |
3.2.3.3 cDNA的合成 | 第44页 |
3.2.3.4 引物特异性验证 | 第44页 |
3.2.3.5 BITC对单增李斯特菌群体感应基因LuxS表达的影响 | 第44-45页 |
3.2.3.6 DADS对单增李斯特菌群体感应基因LuxS表达的影响 | 第45页 |
3.2.4 含硫香料对单增李斯特菌生物膜形成的影响 | 第45页 |
3.2.5 结果的统计分析 | 第45页 |
3.3 结果与讨论 | 第45-52页 |
3.3.1 含硫香料对单增李斯特菌群体感应信号分子AI-2分泌的影响 | 第45-47页 |
3.3.1.1 BITC对单增李斯特菌群体感应信号分子AI-2分泌的影响 | 第45-46页 |
3.3.1.2 DADS对单增李斯特菌群体感应AI-2分泌的影响 | 第46-47页 |
3.3.2 含硫香料对单增李斯特菌群体感应基因LuxS表达的影响 | 第47-50页 |
3.3.2.1 RT-qPCR法引物特异性验证 | 第47-48页 |
3.3.2.2 BITC对单增李斯特菌群体感应基因LuxS表达的影响 | 第48-49页 |
3.3.2.3 DADS对单增李斯特菌群体感应基因LuxS表达的影响 | 第49-50页 |
3.3.3 含硫香料对单增李斯特菌生物膜形成的影响结果 | 第50-52页 |
3.3.3.1 BITC对单增李斯特菌生物膜形成的影响结果 | 第50页 |
3.3.3.2 MTPITC对单增李斯特菌生物膜形成的影响结果 | 第50-51页 |
3.3.3.3 DADS对单增李斯特菌生物膜形成的影响结果 | 第51-52页 |
3.4 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 含硫香料对单增李斯特菌生物学特性的影响 | 第53-60页 |
4.1 材料与方法 | 第53-54页 |
4.1.1 实验样品 | 第53页 |
4.1.2 实验菌株 | 第53页 |
4.1.3 培养基 | 第53页 |
4.1.4 试剂及药品 | 第53-54页 |
4.1.5 仪器及设备 | 第54页 |
4.2 实验方法 | 第54-55页 |
4.2.1 菌液的制备 | 第54页 |
4.2.2 含硫香料对单增李斯特菌ATP的测定 | 第54页 |
4.2.3 扫描电镜法观察含硫香料对单增李斯特菌菌体形态的影响 | 第54-55页 |
4.2.3.1 菌液的制备 | 第55页 |
4.2.3.2 扫描电镜样品的制备 | 第55页 |
4.2.4 结果的统计分析 | 第55页 |
4.3 结果与讨论 | 第55-59页 |
4.3.1 含硫香料对单增李斯特菌ATP的测定结果 | 第55-57页 |
4.3.1.1 作用1h后ATP测定结果 | 第55-56页 |
4.3.1.2 作用4h后ATP测定结果 | 第56-57页 |
4.3.2 扫描电镜法观察含硫香料对单增李斯特菌菌体形态的影响结果 | 第57-59页 |
4.3.2.1 BITC处理后扫描电镜结果 | 第57-58页 |
4.3.2.2 MTPITC处理后扫描电镜结果 | 第58-59页 |
4.4 本章小结 | 第59-60页 |
第五章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68页 |