| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 课题的研究背景 | 第10-16页 |
| 1.1.1 细菌基因组DNA提取技术的进展 | 第10-11页 |
| 1.1.2 肠道微生物与机体健康 | 第11-12页 |
| 1.1.3 益生菌制剂的研究现状及应用 | 第12-15页 |
| 1.1.4 定量肠道菌群的技术 | 第15-16页 |
| 1.2 课题研究的依据及意义 | 第16-17页 |
| 1.3 课题的研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-29页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第18页 |
| 2.1.2 研究用菌种以及受试人群的管理与要求 | 第18页 |
| 2.1.3 L. acidophilus的收集和分组及样品采集 | 第18-19页 |
| 2.2 实验仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.3 实验试剂 | 第20页 |
| 2.4 球磨-CTAB法提取粪便菌群基因组DNA | 第20-22页 |
| 2.4.1 球磨-CTAB法提取细菌基因组DNA的条件优化 | 第20-22页 |
| 2.4.2 粪便菌群基因组DNA的提取 | 第22页 |
| 2.5 实时荧光定量PCR | 第22-29页 |
| 2.5.1 Taqman探针法qPCR检测肠道细菌方法的建立 | 第22-27页 |
| 2.5.2 SYBR GreenⅠ染料法q PCR检测肠道细菌方法的建立 | 第27-28页 |
| 2.5.3 粪便样品定量PCR分析 | 第28页 |
| 2.5.4 数据分析 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-65页 |
| 3.1 球磨-CTAB法提取细菌基因组DNA优化结果 | 第29-34页 |
| 3.1.1 提取L.acidophilusDNA相关条件的研究 | 第29-32页 |
| 3.1.2 正交试验结果 | 第32-33页 |
| 3.1.3 球磨-CTAB法提粪便DNA | 第33-34页 |
| 3.2 TaqMan探针法qPCR结果 | 第34-54页 |
| 3.2.1 常规PCR产物胶回收结果 | 第34页 |
| 3.2.2 重组质粒浓度测定 | 第34-35页 |
| 3.2.3 重组质粒酶切结果 | 第35页 |
| 3.2.4 测序结果 | 第35-37页 |
| 3.2.5 扩增曲线 | 第37-38页 |
| 3.2.6 重组质粒标准品的标准曲线绘制 | 第38-40页 |
| 3.2.7 粪便菌群定量结果 | 第40-54页 |
| 3.3 SYBRGreenⅠ染料法qPCR结果 | 第54-65页 |
| 3.3.1 常规PCR产物DNA回收结果 | 第54-55页 |
| 3.3.2 回收DNA浓度测定 | 第55页 |
| 3.3.3 扩增曲线 | 第55-56页 |
| 3.3.4 溶解曲线 | 第56-57页 |
| 3.3.5 标准曲线 | 第57-59页 |
| 3.3.6 两种实时荧光定量PCR方法比较 | 第59-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-69页 |
| 4.1 球磨-CTAB法提取细菌及粪便基因组DNA | 第65-66页 |
| 4.2 纯菌粉对受试人群肠道菌群的影响 | 第66页 |
| 4.3 水苏糖对受试人群肠道菌群的影响 | 第66-67页 |
| 4.4 MF13对受试人群肠道菌群的影响 | 第67页 |
| 4.5 两种定量菌群方法的分析 | 第67-69页 |
| 第五章 总结与展望 | 第69-70页 |
| 5.1 研究结论 | 第69页 |
| 5.2 研究创新点 | 第69页 |
| 5.3 研究展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 发表论文、参加科研情况说明 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
