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基于qPCR技术定量分析益生菌制剂对肠道菌群的影响

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第10-18页
    1.1 课题的研究背景第10-16页
        1.1.1 细菌基因组DNA提取技术的进展第10-11页
        1.1.2 肠道微生物与机体健康第11-12页
        1.1.3 益生菌制剂的研究现状及应用第12-15页
        1.1.4 定量肠道菌群的技术第15-16页
    1.2 课题研究的依据及意义第16-17页
    1.3 课题的研究内容第17-18页
第二章 材料与方法第18-29页
    2.1 材料第18-19页
        2.1.1 研究对象第18页
        2.1.2 研究用菌种以及受试人群的管理与要求第18页
        2.1.3 L. acidophilus的收集和分组及样品采集第18-19页
    2.2 实验仪器设备第19-20页
    2.3 实验试剂第20页
    2.4 球磨-CTAB法提取粪便菌群基因组DNA第20-22页
        2.4.1 球磨-CTAB法提取细菌基因组DNA的条件优化第20-22页
        2.4.2 粪便菌群基因组DNA的提取第22页
    2.5 实时荧光定量PCR第22-29页
        2.5.1 Taqman探针法qPCR检测肠道细菌方法的建立第22-27页
        2.5.2 SYBR GreenⅠ染料法q PCR检测肠道细菌方法的建立第27-28页
        2.5.3 粪便样品定量PCR分析第28页
        2.5.4 数据分析第28-29页
第三章 结果与分析第29-65页
    3.1 球磨-CTAB法提取细菌基因组DNA优化结果第29-34页
        3.1.1 提取L.acidophilusDNA相关条件的研究第29-32页
        3.1.2 正交试验结果第32-33页
        3.1.3 球磨-CTAB法提粪便DNA第33-34页
    3.2 TaqMan探针法qPCR结果第34-54页
        3.2.1 常规PCR产物胶回收结果第34页
        3.2.2 重组质粒浓度测定第34-35页
        3.2.3 重组质粒酶切结果第35页
        3.2.4 测序结果第35-37页
        3.2.5 扩增曲线第37-38页
        3.2.6 重组质粒标准品的标准曲线绘制第38-40页
        3.2.7 粪便菌群定量结果第40-54页
    3.3 SYBRGreenⅠ染料法qPCR结果第54-65页
        3.3.1 常规PCR产物DNA回收结果第54-55页
        3.3.2 回收DNA浓度测定第55页
        3.3.3 扩增曲线第55-56页
        3.3.4 溶解曲线第56-57页
        3.3.5 标准曲线第57-59页
        3.3.6 两种实时荧光定量PCR方法比较第59-65页
第四章 讨论第65-69页
    4.1 球磨-CTAB法提取细菌及粪便基因组DNA第65-66页
    4.2 纯菌粉对受试人群肠道菌群的影响第66页
    4.3 水苏糖对受试人群肠道菌群的影响第66-67页
    4.4 MF13对受试人群肠道菌群的影响第67页
    4.5 两种定量菌群方法的分析第67-69页
第五章 总结与展望第69-70页
    5.1 研究结论第69页
    5.2 研究创新点第69页
    5.3 研究展望第69-70页
参考文献第70-79页
发表论文、参加科研情况说明第79-80页
附录第80-86页
致谢第86-87页

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