| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-28页 |
| ·概述 | 第10-16页 |
| ·EC 简介 | 第10页 |
| ·常见酒精饮品中的 EC 含量 | 第10-11页 |
| ·EC 的致癌机理 | 第11-12页 |
| ·EC 的检测方法和国内外的限量标准 | 第12-13页 |
| ·酒精饮品中 EC 的前体物质和形成机理 | 第13-16页 |
| ·国内外常见消除 EC 的方法 | 第16-22页 |
| ·工艺优化法 | 第17-18页 |
| ·化学法 | 第18-19页 |
| ·酶法 | 第19-20页 |
| ·代谢工程法 | 第20-22页 |
| ·酿酒酵母的氮代谢调控 | 第22-27页 |
| ·酿酒酵母氮代谢的调控因子 | 第22-25页 |
| ·NCR 效应的调控机理 | 第25-27页 |
| ·论文主要研究内容 | 第27-28页 |
| ·立题依据及研究意义 | 第27页 |
| ·论文主要研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 酿酒酵母 N85 菌株尿素积累机理 | 第28-41页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-33页 |
| ·菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·试剂和仪器 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·分子生物学操作 | 第30-32页 |
| ·荧光定量 PCR | 第32-33页 |
| ·分析检测方法 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-40页 |
| ·酿酒酵母 N85 菌株的偏好型氮源 | 第33-34页 |
| ·偏好型氮源对酿酒酵母 N85 菌株尿素利用的抑制作用 | 第34-36页 |
| ·定量 PCR 研究偏好型氮源对尿素利用的抑制作用 | 第36-38页 |
| ·偏好型氮源抑制尿素代谢的机理 | 第38-39页 |
| ·偏好型氮源对尿素代谢调控因子胞内定位的影响 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 酿酒酵母氮代谢 GATA 调控因子的胞内定位 | 第41-50页 |
| ·前言 | 第41-42页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·试剂和仪器 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42页 |
| ·分子生物学操作 | 第42-44页 |
| ·分析检测方法 | 第44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-48页 |
| ·Gat1p、Dal80p 和 Gzf3p 核定位序列和核定位调控序列预测 | 第44-45页 |
| ·Gat1p 核定位序列和核定位调控序列分析 | 第45-46页 |
| ·Dal80p 和 Gzf3p 核定位序列分析 | 第46-47页 |
| ·Gat1p 核定位序列的磷酸化位点 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第四章 代谢改造 NCR 调控因子降低酿酒酵母模式菌株尿素积累 | 第50-58页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·材料与方法 | 第50-53页 |
| ·菌株和质粒 | 第50页 |
| ·试剂和仪器 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·分子生物学操作 | 第50-53页 |
| ·荧光定量 PCR | 第53页 |
| ·基因工程菌株尿素利用检测 | 第53页 |
| ·分析检测方法 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-57页 |
| ·Gln3p 代谢工程改造对 DUR1,2 和 DUR3 基因表达的影响 | 第53-54页 |
| ·Gat1p 代谢工程改造对 DUR1,2 和 DUR3 基因表达的影响 | 第54-55页 |
| ·URE2 基因敲除对 DUR1,2 和 DUR3 基因表达的影响 | 第55-56页 |
| ·基因工程菌株代谢改造效果检测 | 第56-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第五章 代谢改造尿素代谢调控途径降低酿酒酵母模式菌株尿素积累 | 第58-68页 |
| ·前言 | 第58-59页 |
| ·材料与方法 | 第59-61页 |
| ·菌株和质粒 | 第59页 |
| ·试剂和仪器 | 第59页 |
| ·培养基 | 第59页 |
| ·分子生物学操作 | 第59-61页 |
| ·荧光定量 PCR | 第61页 |
| ·基因工程菌株尿素利用检测 | 第61页 |
| ·分析检测方法 | 第61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-66页 |
| ·过量表达磷酸酶对 DUR1,2 和 DUR3 基因表达的影响 | 第61-62页 |
| ·过量表达尿素代谢特异性激活因子对 DUR1,2 和 DUR3 基因表达的影响 | 第62-64页 |
| ·泛素化调控的代谢改造策略 | 第64-65页 |
| ·基因工程菌株代谢改造效果检测 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66-68页 |
| 第六章 代谢工程改造酿酒酵母 N85 菌株降低黄酒模拟体系中的 EC 含量 | 第68-78页 |
| ·前言 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68-72页 |
| ·菌株和质粒 | 第68页 |
| ·试剂和仪器 | 第68页 |
| ·培养基 | 第68页 |
| ·酿酒酵母 N85 单倍体菌株拆分 | 第68-69页 |
| ·分子生物学操作 | 第69-71页 |
| ·荧光定量 PCR | 第71-72页 |
| ·基因工程菌株非偏好型氮源利用检测 | 第72页 |
| ·基因工程菌株黄酒模拟发酵体系 | 第72页 |
| ·分析检测方法 | 第72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-77页 |
| ·酿酒酵母 N85 单倍体( ura3)菌株的构建 | 第72-73页 |
| ·对酿酒酵母 N85 单倍体( ura3)菌株的代谢改造 | 第73-74页 |
| ·基因工程菌株非偏好型氮源利用的检测 | 第74-75页 |
| ·基因工程菌株黄酒模拟发酵实验 | 第75-77页 |
| ·本章小结 | 第77-78页 |
| 主要结论与展望 | 第78-80页 |
| 主要结论 | 第78页 |
| 展望 | 第78-80页 |
| 论文创新点 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第92页 |
