| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1.1 低聚果糖概述 | 第14页 |
| 1.2 果聚糖蔗糖酶概述 | 第14-23页 |
| 1.2.1 果聚糖蔗糖酶的结构 | 第15页 |
| 1.2.2 微生物来源的果聚糖蔗糖酶 | 第15-18页 |
| 1.2.3 果聚糖蔗糖酶合成果聚糖 | 第18-23页 |
| 1.3 课题研究目的、创新之处及主要内容 | 第23-28页 |
| 1.3.1 课题研究目的 | 第23-24页 |
| 1.3.2 课题创新之处 | 第24-25页 |
| 1.3.3 课题主要研究内容 | 第25-28页 |
| 第二章 果聚糖蔗糖酶的基因工程 | 第28-50页 |
| 2.1 绪论 | 第28-29页 |
| 2.2 实验材料 | 第29-37页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第29页 |
| 2.2.2 实验试剂与仪器 | 第29-37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.3.1 果聚糖蔗糖酶全长基因的鉴定 | 第37页 |
| 2.3.2 pET-lev表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 2.3.3 重组蛋白Lev诱导表达 | 第40-41页 |
| 2.3.4 重组蛋白Lev的纯化 | 第41-43页 |
| 2.4 实验结果 | 第43-48页 |
| 2.4.1 果聚糖蔗糖酶全长基因的鉴定 | 第43-44页 |
| 2.4.2 pET-lev载体构建验证 | 第44-46页 |
| 2.4.3 重组蛋白Lev的诱导表达 | 第46页 |
| 2.4.4 重组蛋白Lev的纯化 | 第46-48页 |
| 2.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 第三章 果聚糖蔗糖酶在罗伊氏乳杆菌中的分布 | 第50-60页 |
| 3.1 绪论 | 第50-51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第51页 |
| 3.2.2 实验试剂与仪器 | 第51页 |
| 3.3 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.3.1 4株罗伊氏乳杆菌的果聚糖蔗糖酶基因分析 | 第51页 |
| 3.3.2 Westernblot检测果聚糖蔗糖酶分布 | 第51-53页 |
| 3.3.3 罗伊氏乳杆菌活性鉴定 | 第53-54页 |
| 3.4 实验结果 | 第54-57页 |
| 3.4.1 4株罗伊氏乳杆菌的果聚糖蔗糖酶基因分析 | 第54页 |
| 3.4.2 Westernblot检测果聚糖蔗糖酶在罗伊氏乳杆菌中的分布 | 第54-57页 |
| 3.4.3 罗伊氏乳杆菌中果聚糖蔗糖酶活性鉴定结果 | 第57页 |
| 3.5 本章小结 | 第57-60页 |
| 第四章 Lev酶学性质研究与低聚果糖(FOS)的合成 | 第60-82页 |
| 4.1 绪论 | 第60-61页 |
| 4.2 实验试剂 | 第61-63页 |
| 4.2.1 基本酶学性质实验试剂 | 第61页 |
| 4.2.2 Lev合成低聚果糖实验试剂 | 第61页 |
| 4.2.3 低聚果糖合成优化实验试剂 | 第61-63页 |
| 4.3 实验方法 | 第63-69页 |
| 4.3.1 最适pH | 第63页 |
| 4.3.2 最适温度 | 第63页 |
| 4.3.3 米氏常数 | 第63页 |
| 4.3.4 Lev合成低聚果糖 | 第63-64页 |
| 4.3.5 低聚果糖合成优化 | 第64-69页 |
| 4.4 实验结果 | 第69-80页 |
| 4.4.1 最适pH | 第69-70页 |
| 4.4.2 最适温度 | 第70-71页 |
| 4.4.3 米氏常数 | 第71页 |
| 4.4.4 Lev合成低聚果糖 | 第71-72页 |
| 4.4.5 常规方法合成条件单因素优化 | 第72-78页 |
| 4.4.6 氨基酸定点突变 | 第78-80页 |
| 4.5 本章小结 | 第80-82页 |
| 第五章 结论与展望 | 第82-86页 |
| 5.1 结论 | 第82-84页 |
| 5.2 展望 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| 附录A | 第96-98页 |
| 附录B | 第98-107页 |
