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食源性金黄色葡萄球菌luxS基因缺失对环境耐受性及致病性的影响

摘要第6-8页
abstract第8-9页
第一章 文献综述第14-24页
    1.1 金黄色葡萄球菌概述第14-17页
        1.1.1 金黄色葡萄球菌简介第14页
        1.1.2 金黄色葡萄球菌引起食物中毒第14-15页
        1.1.3 金黄色葡萄球菌的毒性因子第15-17页
        1.1.4 金黄色葡萄球菌和生物膜第17页
    1.2 金黄色葡萄球菌LuxS/AI-2群体感应系统的研究概况第17-22页
        1.2.1 群体感应概述第17-18页
        1.2.2 金黄色葡萄球菌群体感应系统第18-19页
        1.2.3 AI-2群体感应系统的调控机制第19-21页
        1.2.4 受LuxS/AI-2群体感应系统调控的生理功能第21-22页
    1.3 研究的目的与意义第22页
    1.4 研究的内容与技术路线第22-24页
        1.4.1 luxS基因缺失株及其回补株的构建第22-23页
        1.4.2 luxS基因缺失后金黄色葡萄球菌生长变化情况第23页
        1.4.3 luxS基因缺失后对生物被膜形成的影响第23页
        1.4.4 luxS基因缺失后对溶血素生成的影响第23页
        1.4.5 luxS基因缺失后对肠毒素生成的影响第23页
        1.4.6 技术路线第23-24页
第二章 金黄色葡萄球菌luxS基因缺失株及其回补株的构建第24-36页
    2.1 试验材料第24-26页
        2.1.1 主要仪器与设备第24-25页
        2.1.2 主要试剂与耗材第25页
        2.1.3 试验菌株及载体第25-26页
        2.1.4 试验所用引物第26页
    2.2 试验方法第26-28页
        2.2.1 质粒提取第26页
        2.2.2 感受态的制备第26-27页
        2.2.3 金黄色葡萄球菌的电转化第27页
        2.2.4 电转化成功的验证第27-28页
        2.2.5 luxS基因缺失株筛选与鉴定第28页
    2.3 结果与分析第28-34页
        2.3.1 金黄色葡萄球菌luxS基因缺失株构建的电转化第28-29页
        2.3.2 质粒pBT2-LuxS电转化成功菌株的酶切验证第29-30页
        2.3.3 金黄色葡萄球菌luxS基因缺失株的筛选第30-31页
        2.3.4 金黄色葡萄球菌luxS基因缺失株的鉴定第31-32页
        2.3.5 互补菌株构建的电转化第32-33页
        2.3.6 质粒pLI50-LuxS电转化成功菌株的酶切验证第33-34页
        2.3.7 互补菌株构建的进一步PCR测序验证第34页
    2.4 讨论第34-35页
    2.5 小结第35-36页
第三章 金黄色葡萄球菌luxS基因缺失对环境耐受性的影响第36-44页
    3.1 试验材料第36-37页
        3.1.1 主要仪器与设备第36-37页
        3.1.2 主要试剂与耗材第37页
    3.2 试验方法第37-38页
        3.2.1 菌株的培养第37页
        3.2.2 生长曲线的测定第37页
        3.2.3 对热应激抵抗力的测定第37页
        3.2.4 对酸耐受力的测定第37页
        3.2.5 对渗透压耐受力的测定第37-38页
    3.3 结果与分析第38-42页
        3.3.1 野生株、缺失株与回补株生长曲线的比较第38-39页
        3.3.2 野生株、缺失株与回补株对热应激抵抗力的比较第39-40页
        3.3.3 野生株、缺失株与回补株对酸耐受力的比较第40-41页
        3.3.4 野生株、缺失株与回补株对渗透压耐受力的比较第41-42页
    3.4 讨论第42-43页
    3.5 小结第43-44页
第四章 金黄色葡萄球菌luxS基因缺失对生物被膜形成及毒力的影响第44-55页
    4.1 试验材料第44-46页
        4.1.1 主要仪器与设备第44-45页
        4.1.2 主要试剂与耗材第45页
        4.1.3 试验所用引物第45-46页
    4.2 试验方法第46-48页
        4.2.1 菌株的培养第46页
        4.2.2 生物膜形成能力的测定第46页
        4.2.3 溶血素的测定第46页
        4.2.4 金黄色葡萄球菌总RNA的提取第46页
        4.2.5 RNA反转录实验第46-47页
        4.2.6 实时荧光定量PCR第47-48页
    4.3 结果与分析第48-52页
        4.3.1 野生株、缺失株与回补株生物被膜形成能力的比较第48-50页
        4.3.2 野生株、缺失株与回补株产溶血素的比较第50-51页
        4.3.3 野生株、缺失株与回补株产肠毒素的比较第51-52页
    4.4 讨论第52-54页
    4.5 小结第54-55页
第五章 结论与展望第55-56页
    5.1 结论第55页
    5.2 展望第55-56页
参考文献第56-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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