| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-33页 |
| 1.1 虾类产品概述 | 第17-19页 |
| 1.1.1 分类 | 第17-18页 |
| 1.1.2 世界对虾产业发展概况 | 第18-19页 |
| 1.1.3 我国对虾产业发展概况 | 第19页 |
| 1.2 虾过敏及其过敏原 | 第19-27页 |
| 1.2.1 虾过敏 | 第19-22页 |
| 1.2.2 虾类致敏机制 | 第22-23页 |
| 1.2.3 虾类过敏原 | 第23-27页 |
| 1.3 虾过敏原消减技术研究进展 | 第27-30页 |
| 1.3.1 热处理 | 第27-28页 |
| 1.3.2 辐照技术 | 第28页 |
| 1.3.3 酶解技术 | 第28-29页 |
| 1.3.4 美拉德反应 | 第29页 |
| 1.3.5 超声波 | 第29页 |
| 1.3.6 高静压技术 | 第29-30页 |
| 1.3.7 联合作用 | 第30页 |
| 1.4 立题思路 | 第30-33页 |
| 1.4.1 立题依据 | 第30-31页 |
| 1.4.2 研究目标 | 第31页 |
| 1.4.3 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.4.4 技术路线 | 第32-33页 |
| 第二章 原肌球蛋白的纯化、鉴定及生物信息学分析 | 第33-54页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第33-35页 |
| 2.1.1 材料 | 第33页 |
| 2.1.2 试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.3 仪器与设备 | 第34页 |
| 2.1.4 溶液的配置 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 2.2.1 TM蛋白纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.2 SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| 2.2.3 蛋白含量测定 | 第37页 |
| 2.2.4 免疫印迹分析 | 第37页 |
| 2.2.5 质谱鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.6 序列同源性分析 | 第38页 |
| 2.2.7 二级结构分析 | 第38页 |
| 2.2.8 三级结构分析及同源建模 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-52页 |
| 2.3.1 方法Ⅰ纯化结果 | 第38-42页 |
| 2.3.2 方法Ⅱ纯化结果 | 第42-43页 |
| 2.3.3 免疫印迹检测 | 第43-44页 |
| 2.3.4 质谱鉴定结果 | 第44-45页 |
| 2.3.5 样品分离过程中蛋白含量的变化及回收率分析 | 第45-46页 |
| 2.3.6 氨基酸同源性分析 | 第46-48页 |
| 2.3.7 亲疏水性分析 | 第48-49页 |
| 2.3.8 二级结构分析 | 第49-50页 |
| 2.3.9 三级结构预测 | 第50-52页 |
| 2.4 讨论与结论 | 第52-54页 |
| 第三章 HHP对虾原肌球蛋白结构与致敏性的构效关系研究 | 第54-80页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第54-56页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第54-55页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第55页 |
| 3.1.3 溶液的配置 | 第55-56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.2.1 样品制备 | 第56页 |
| 3.2.2 前处理 | 第56页 |
| 3.2.3 免疫印迹分析 | 第56页 |
| 3.2.4 间接ELISA检测 | 第56页 |
| 3.2.5 SDS-PAGE电泳分析 | 第56-57页 |
| 3.2.6 圆二色光谱分析(CD) | 第57页 |
| 3.2.7 傅里叶变换红外光谱分析(FTIR) | 第57页 |
| 3.2.8 荧光光谱分析 | 第57页 |
| 3.2.9 紫外光谱分析 | 第57页 |
| 3.2.10 数据分析 | 第57-58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-77页 |
| 3.3.1 HHP处理对TM蛋白免疫印迹结果的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.2 HHP处理对TM蛋白间接ELISA结果的影响 | 第59-62页 |
| 3.3.3 HHP处理对TM蛋白SDS-PAGE结果的影响 | 第62-64页 |
| 3.3.4 HHP处理对TM蛋白CD光谱结果的影响 | 第64-69页 |
| 3.3.5 HHP处理对TM蛋白FTIR光谱结果的影响 | 第69-73页 |
| 3.3.6 HHP处理对TM蛋白荧光光谱结果的影响 | 第73-75页 |
| 3.3.7 HHP处理对TM蛋白紫外光谱结果的影响 | 第75-77页 |
| 3.4 讨论与结论 | 第77-80页 |
| 3.4.1 HHP处理对TM蛋白结构的影响 | 第77-78页 |
| 3.4.2 HHP处理对TM蛋白致敏性的影响 | 第78-79页 |
| 3.4.3 HHP处理后TM蛋白结构与致敏性的关系 | 第79-80页 |
| 第四章 HHP对虾抗原表位致敏性及消化稳定性研究 | 第80-96页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第80-82页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第80页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第80-81页 |
| 4.1.3 溶液的配置 | 第81-82页 |
| 4.2 实验方法 | 第82-85页 |
| 4.2.1 TM蛋白制备 | 第82页 |
| 4.2.2 HHP处理 | 第82页 |
| 4.2.3 表位多肽的设计合成 | 第82-83页 |
| 4.2.4 表位多克隆抗体的制备 | 第83-85页 |
| 4.2.5 聚丙烯酰氨凝胶电泳分析(SDS-PAGE) | 第85页 |
| 4.2.6 体外模拟胃液消化 | 第85页 |
| 4.2.7 Western blot分析 | 第85页 |
| 4.2.8 间接ELISA分析 | 第85页 |
| 4.3 结果与分析 | 第85-94页 |
| 4.3.1 合成多肽的纯度和准确性分析 | 第85-87页 |
| 4.3.2 合成多肽的偶联结果检测 | 第87-88页 |
| 4.3.3 兔血清效价分析 | 第88-89页 |
| 4.3.4 抗体纯度及效价分析 | 第89-91页 |
| 4.3.5 HHP对TM蛋白抗原表位致敏性的影响 | 第91-92页 |
| 4.3.6 HHP对TM蛋白抗原表位间接ELISA的影响 | 第92-93页 |
| 4.3.7 SDS-PAGE分析TM蛋白模拟胃液消化产物 | 第93-94页 |
| 4.3.8 间接ELISA分析TM蛋白模拟胃液消化产物 | 第94页 |
| 4.4 讨论与结论 | 第94-96页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第96-98页 |
| 5.1 全文总结 | 第96-97页 |
| 5.2 论文创新点 | 第97页 |
| 5.3 展望 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 作者简介 | 第109页 |
| 在读博士期间发表的主要文章 | 第109页 |