| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 食物过敏 | 第13-14页 |
| 1.2 大豆致敏机制 | 第14页 |
| 1.3 大豆蛋白组分 | 第14-16页 |
| 1.4 抗原表位的预测和鉴定 | 第16-19页 |
| 1.4.1 抗原表位的预测 | 第17页 |
| 1.4.2 抗原表位的鉴定 | 第17-19页 |
| 1.5 本课题的研究内容及意义 | 第19-22页 |
| 第二章 β-伴大豆球蛋白α’亚基被加工破坏表位的初步筛选 | 第22-35页 |
| 2.1 试验材料与仪器 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 试验仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 试验溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 β-伴大豆球蛋白α’亚基的分段引物设计 | 第24-25页 |
| 2.2.2 α’亚基及分段引物的扩增 | 第25页 |
| 2.2.3 α’亚基及分段引物的克隆 | 第25-28页 |
| 2.2.4 α’亚基及其分段的噬菌体包装 | 第28页 |
| 2.2.5 重组噬菌体的培养 | 第28-29页 |
| 2.2.6 重组噬菌体的鉴定 | 第29页 |
| 2.2.7 重组噬菌体的扩大培养和纯化 | 第29-30页 |
| 2.2.8 α’亚基及分段噬菌体展示蛋白的鉴定 | 第30页 |
| 2.3 结果 | 第30-34页 |
| 2.3.1 α’亚基及其分段基因的扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.2 α’亚基及overlapping分段的双酶切及PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.3 T7噬菌体包装及重组噬菌体鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.4 噬菌体展示蛋白测定结果 | 第33-34页 |
| 2.4 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 β-conglycininα’亚基片段C被加工破坏表位的鉴定 | 第35-45页 |
| 3.1 试验材料与仪器 | 第35页 |
| 3.1.1 试验试剂 | 第35页 |
| 3.1.2 试验仪器 | 第35页 |
| 3.1.3 试验溶液配制 | 第35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 α’亚基片段C的分段引物设计 | 第35-36页 |
| 3.2.2 α’亚基片段C分段引物的扩增 | 第36-37页 |
| 3.2.3 α’亚基片段C分段引物的克隆 | 第37-38页 |
| 3.2.4 α’亚基片段C分段基因的噬菌体包装 | 第38-39页 |
| 3.2.5 重组噬菌体S-C1、S-C2、S-C3的培养 | 第39页 |
| 3.2.6 重组噬菌体S-C1、S-C2、S-C3的鉴定 | 第39页 |
| 3.2.7 S-C1、S-C2和S-C3的扩大培养和纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.8 噬菌体展示蛋白Pt-C1、Pt-C2、Pt-C3的鉴定 | 第40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-44页 |
| 3.3.1 α’亚基片段C的分段基因的扩增 | 第40-41页 |
| 3.3.2 重组质粒T-C1、T-C2、T-C3的双酶切及PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3.3 T7噬菌体包装及重组噬菌体鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3.4 噬菌体展示蛋白Pt-C1、Pt-C2和Pt-C3鉴定结果 | 第43-44页 |
| 3.4 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 β-conglycininα’亚基C1片段被加工破坏表位的定位 | 第45-60页 |
| 4.1 试验材料与仪器 | 第45页 |
| 4.1.1 试验试剂 | 第45页 |
| 4.1.2 试验仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 试验溶液配制 | 第45页 |
| 4.2 试验操作方法 | 第45-52页 |
| 4.2.1 α’亚基片段C1的分段引物设计 | 第45-47页 |
| 4.2.2 α’亚基片段C1分段引物的扩增 | 第47页 |
| 4.2.3 α’亚基片段C1分段基因的克隆 | 第47-49页 |
| 4.2.4 α’亚基片段C1overlapping分段的噬菌体包装 | 第49-50页 |
| 4.2.5 重组噬菌体S-C1-X、S-C1-Y、S-C1-Z的培养 | 第50页 |
| 4.2.6 重组噬菌体S-C1-X、S-C1-Y、S-C1-Z的鉴定 | 第50页 |
| 4.2.7 重组噬菌体S-C1-X、S-C1-Y及S-C1-Z的扩大培养和纯化 | 第50-51页 |
| 4.2.8 噬菌体展示蛋白Pt-C1-X、Pt-C1-Y和Pt-C-Z的鉴定 | 第51页 |
| 4.2.9 合成多肽方法鉴定抗原性 | 第51-52页 |
| 4.2.10 致敏性鉴定 | 第52页 |
| 4.3 结果与分析 | 第52-58页 |
| 4.3.1 α’亚基片段C1的分段基因的扩增 | 第52-53页 |
| 4.3.2 重组质粒T-C1-X、T-C1-Y、T-C1-Z的双酶切及PCR鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3.3 T7噬菌体包装及重组噬菌体鉴定 | 第54-55页 |
| 4.3.4 噬菌体展示蛋白Pt-C1-X、Pt-C1-Y和Pt-C-Z测定结果 | 第55-56页 |
| 4.3.5 偶联多肽的鉴定 | 第56-57页 |
| 4.3.6 多克隆抗体的鉴定结果 | 第57-58页 |
| 4.3.7 致敏性鉴定结果 | 第58页 |
| 4.4 小结 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介、攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第69页 |
