摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 绪论 | 第9-18页 |
·产油真菌高山被孢霉的研究概况 | 第9-12页 |
·多不饱和脂肪酸简介 | 第9-10页 |
·高山被孢霉的生理特性 | 第10页 |
·高山被孢霉合成PUFAs的研究进展 | 第10-12页 |
·高山被孢霉Δ9 脂肪酸脱饱和酶的研究背景 | 第12-14页 |
·Δ9 脂肪酸脱饱和酶的结构和种类 | 第12-13页 |
·Δ9 脂肪酸脱饱和酶的底物特异性 | 第13页 |
·Δ9 脂肪酸脱饱和酶基因的转录水平和相互影响 | 第13-14页 |
·丝状真菌的遗传转化系统 | 第14-16页 |
·丝状真菌的基因转化方法 | 第14-15页 |
·高山被孢霉的遗传表达系统 | 第15-16页 |
·立题依据及意义 | 第16-17页 |
·主要研究内容 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-30页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·菌种和质粒 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要试剂的配制 | 第19-20页 |
·培养基及其配方 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-30页 |
·菌株的培养和保藏 | 第20-21页 |
·高山被孢霉FADS9-III基因表达载体的构建 | 第21-25页 |
·农杆菌介导转化法同源表达ω9 脂肪酸脱饱和酶 | 第25-27页 |
·发酵液上清液分析和生物量的测定 | 第27-28页 |
·高山被孢霉重组菌株Δ9 脂肪酸脱饱和酶基因的RT-qPCR分析 | 第28页 |
·菌株总脂含量及其脂肪酸组成分析 | 第28-30页 |
3 结果与讨论 | 第30-45页 |
·高山被孢霉FADS9-III基因表达载体的构建 | 第30-32页 |
·高山被孢霉FADS9-III基因T载体pGEM-T-FADS9-III的构建 | 第30-31页 |
·高山被孢霉FADS9-III基因表达载体pBIG2-ura5s-FADS9-III的构建 | 第31-32页 |
·农杆菌介导转化条件的优化 | 第32-35页 |
·共培养温度的影响 | 第32-33页 |
·共培养时间的影响 | 第33页 |
·农杆菌菌液浓度的影响 | 第33-34页 |
·乙酰定香酮(AS)使用浓度的影响 | 第34-35页 |
·高山被孢霉FADS9-III基因的同源表达 | 第35-40页 |
·阳性转化子的遗传稳定性测试 | 第35页 |
·重组菌株的PCR鉴定 | 第35-36页 |
·重组菌株生长特性的描述 | 第36-37页 |
·重组菌株Δ9 脂肪酸脱饱和酶基因的转录水平分析 | 第37-39页 |
·重组菌株的ω9 脂肪酸脱饱和酶的活性检测 | 第39-40页 |
·ω9 脂肪酸脱饱和酶的表达对高山被孢霉脂肪酸组成的影响 | 第40-42页 |
·重组菌株的产脂特点和脂肪酸组成分析 | 第40-41页 |
·低温培养条件下重组菌株脂肪酸组成的变化 | 第41-42页 |
·重组菌株对外源添加底物的利用 | 第42-45页 |
主要结论与展望 | 第45-46页 |
主要结论 | 第45页 |
展望 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |