| 缩略词 | 第11-13页 |
| 摘要 | 第13-15页 |
| ABSTRACT | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-31页 |
| 1.1 Surfactin的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.1.1 Surfactin结构 | 第17-18页 |
| 1.1.2 Surfactin的生物合成机制 | 第18-19页 |
| 1.1.3 Surfactin的活性与应用 | 第19-20页 |
| 1.2 基因组大片段克隆技术 | 第20-26页 |
| 1.2.1 限制性酶切组合TAR | 第21-22页 |
| 1.2.2 CRISPR/Cas9组合TAR | 第22-25页 |
| 1.2.3 CRISPR/Cas9结合Gibson组装 | 第25-26页 |
| 1.3 异源表达宿主 | 第26-29页 |
| 1.3.1 酵母菌 | 第27页 |
| 1.3.2 链霉菌 | 第27页 |
| 1.3.3 枯草芽孢杆菌 | 第27-28页 |
| 1.3.4 大肠杆菌 | 第28-29页 |
| 1.4 选题依据 | 第29-31页 |
| 第二章 基于NRPS基因筛选产生环脂肽葡萄附生细菌 | 第31-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第32页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第32-35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-45页 |
| 2.2.1 菌株的生理生化特征 | 第35-37页 |
| 2.2.2 菌株的分子生物学鉴定 | 第37-44页 |
| 2.2.3 菌株的NRPS功能基因 | 第44-45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-46页 |
| 2.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 构建Surfactin捕获载体 | 第47-59页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第47-49页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第49页 |
| 3.1.3 试验方法 | 第49-52页 |
| 3.2 结果与分析 | 第52-57页 |
| 3.2.1 Surfactin生物合成基因簇分析 | 第52-55页 |
| 3.2.2 构建Surfactin捕获载体 | 第55-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-58页 |
| 3.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 Surfactin生物合成基因簇的克隆 | 第59-79页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59-67页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第59-61页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第61页 |
| 4.1.3 试验方法 | 第61-67页 |
| 4.2 结果与分析 | 第67-77页 |
| 4.2.1 限制性酶切组合TAR克隆Surfactin生物合成基因簇 | 第67-70页 |
| 4.2.2 CRISPR/Cas9组合TAR克隆Surfactin生物合成基因簇 | 第70-75页 |
| 4.2.3 CRISPR/Cas9组合Gibson组装克隆Surfactin生物合成基因簇 | 第75-77页 |
| 4.3 讨论 | 第77页 |
| 4.4 本章小结 | 第77-79页 |
| 第五章 Surfactin生物合成基因簇在大肠杆菌中的异源表达 | 第79-89页 |
| 5.1 材料与方法 | 第79-82页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第79-80页 |
| 5.1.2 仪器与设备 | 第80页 |
| 5.1.3 试验方法 | 第80-82页 |
| 5.2 结果与分析 | 第82-87页 |
| 5.2.1 大肠杆菌转化子的鉴定 | 第82页 |
| 5.2.2 发酵产物的表征 | 第82-84页 |
| 5.2.3 化合物A的结构鉴定 | 第84-87页 |
| 5.3 讨论 | 第87页 |
| 5.4 本章小结 | 第87-89页 |
| 全文总结 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-99页 |
| 附录 | 第99-109页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
