| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-30页 |
| 1.1 糖尿病 | 第17-22页 |
| 1.1.1 胰岛素信号通路 | 第17-18页 |
| 1.1.2 胰岛素抵抗 | 第18-19页 |
| 1.1.3 胰岛素抵抗细胞模型 | 第19-20页 |
| 1.1.4 氧化应激与糖尿病 | 第20-22页 |
| 1.2 花色苷的研究进展 | 第22-25页 |
| 1.2.1 花色苷的化学结构与性质 | 第22-23页 |
| 1.2.2 花色苷的生物活性 | 第23-25页 |
| 1.3 桑葚 | 第25-28页 |
| 1.3.1 桑葚的功能成分 | 第25-26页 |
| 1.3.2 桑葚的生物活性 | 第26-28页 |
| 1.4 秀丽隐杆线虫 | 第28-29页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第29页 |
| 1.6 研究内容 | 第29-30页 |
| 1.6.1 主要内容包括 | 第29页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第29-30页 |
| 2 桑葚花色苷对肝细胞糖代谢的调控作用 | 第30-66页 |
| 2.1 前言 | 第30-31页 |
| 2.2 实验材料、试剂与设备 | 第31-32页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第31页 |
| 2.2.2 试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.3 主要设备 | 第32页 |
| 2.3 实验方法与步骤 | 第32-41页 |
| 2.3.1 桑葚花色苷的提取、分离与纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.2 总多酚含量测定 | 第33页 |
| 2.3.3 总黄酮含量测定 | 第33页 |
| 2.3.4 总蛋白含量测定 | 第33-34页 |
| 2.3.5 总糖含量测定 | 第34页 |
| 2.3.6 花色苷种类与含量的测定 | 第34页 |
| 2.3.7 体外抗氧化活性的测定 | 第34-36页 |
| 2.3.8 细胞培养与处理 | 第36-37页 |
| 2.3.9 细胞毒性测试 | 第37页 |
| 2.3.10 细胞葡萄糖消耗、葡萄糖摄取和糖原含量的测定 | 第37-38页 |
| 2.3.11 细胞总RNA的提取、反转录与实时定量 | 第38-40页 |
| 2.3.12 细胞总蛋白的提取 | 第40页 |
| 2.3.13 G6Pase、PEPCK和GYS2含量的测定 | 第40页 |
| 2.3.14 Western blot | 第40-41页 |
| 2.3.15 数据统计与分析 | 第41页 |
| 2.4 结果与分析 | 第41-62页 |
| 2.4.1 桑葚花色苷(MAE)组分鉴定及体外抗氧化活性评价 | 第41-44页 |
| 2.4.2 MAE对HepG2和LO2细胞活性的影响 | 第44页 |
| 2.4.3 MAE对HepG2和LO2细胞葡萄糖消耗量的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.4 MAE对HepG2和LO2细胞糖原合成量的影响 | 第45页 |
| 2.4.5 MAE对HepG2细胞糖代谢调控作用的机理探究 | 第45-50页 |
| 2.4.6 MAE对高糖/棕榈酸诱导的胰岛素抵抗肝细胞的保护作用 | 第50-62页 |
| 2.5 讨论 | 第62-66页 |
| 3 桑葚花色苷对肝细胞氧化应激的保护作用 | 第66-88页 |
| 3.1 前言 | 第66-67页 |
| 3.2 实验材料与试剂 | 第67页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第67页 |
| 3.2.2 试剂 | 第67页 |
| 3.3 实验方法与步骤 | 第67-69页 |
| 3.3.1 细胞培养与处理 | 第67页 |
| 3.3.2 细胞内ROS和O_2~-的检测 | 第67-68页 |
| 3.3.3 细胞线粒体功能的检测 | 第68页 |
| 3.3.4 细胞核损伤的检测 | 第68页 |
| 3.3.5 细胞内GSH水平的检测 | 第68页 |
| 3.3.6 细胞核/质蛋白的提取 | 第68-69页 |
| 3.3.7 细胞毒性检测、葡萄糖消耗和摄取、Western blotting实验 | 第69页 |
| 3.3.8 数据统计与分析 | 第69页 |
| 3.4 结果 | 第69-85页 |
| 3.4.1 MAE对HepG2细胞抵抗H_2O2损伤的保护作用 | 第69-70页 |
| 3.4.2 MAE对H_2O_2损伤下细胞葡萄糖消耗和摄取的影响 | 第70-71页 |
| 3.4.3 MAE对H_2O_2诱导下细胞内ROS与O_2~-水平的影响 | 第71-72页 |
| 3.4.4 MAE对H_2O_2损伤后细胞核形态的影响 | 第72-73页 |
| 3.4.5 MAE对H_2O_2损伤后细胞谷胱甘肽含量的影响 | 第73-74页 |
| 3.4.6 MAE对H_2O_2损伤后细胞线粒体膜电位和线粒体数量的影响 | 第74-75页 |
| 3.4.7 MAE对H_2O_2损伤后细胞丙二醛含量的影响 | 第75-76页 |
| 3.4.8 MAE对Nrf2和MAPKs的调控作用 | 第76-79页 |
| 3.4.9 MAE对高糖/棕榈酸诱导下HepG2细胞氧化应激的影响 | 第79-85页 |
| 3.5 讨论 | 第85-88页 |
| 4 桑葚花色苷对db/db小鼠糖尿病症状的改善作用 | 第88-112页 |
| 4.1 前言 | 第88页 |
| 4.2 实验材料与试剂 | 第88-89页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第88-89页 |
| 4.2.2 试剂 | 第89页 |
| 4.3 实验方法 | 第89-93页 |
| 4.3.1 动物实验 | 第89-90页 |
| 4.3.2 葡萄糖耐受量(OGTT)实验 | 第90页 |
| 4.3.3 血清生化指标测定 | 第90页 |
| 4.3.4 肝脏脂质、肝糖原和肌糖原含量的检测 | 第90-91页 |
| 4.3.5 组织切片的分析 | 第91页 |
| 4.3.6 透射电镜 | 第91页 |
| 4.3.7 相关基因和蛋白表达水平的检测 | 第91-92页 |
| 4.3.8 数据统计与分析 | 第92-93页 |
| 4.4 结果 | 第93-109页 |
| 4.4.1 MAE对小鼠体重、摄食量、饮水量和脏器系数的影响 | 第93-95页 |
| 4.4.2 MAE对小鼠血清学指标的影响 | 第95-97页 |
| 4.4.3 MAE对小鼠肝脏脂质、肝/肌糖原的影响 | 第97页 |
| 4.4.4 MAE对小鼠组织形态的影响 | 第97-100页 |
| 4.4.5 MAE对小鼠胰脏自噬水平的影响 | 第100-103页 |
| 4.4.6 MAE对小鼠肝脏、肌肉、脂肪组织基因表达的影响 | 第103-105页 |
| 4.4.7 MAE对小鼠肝脏、肌肉、脂肪组织蛋白表达的影响 | 第105-109页 |
| 4.5 讨论 | 第109-112页 |
| 5 桑葚花色苷对秀丽线虫生理活动的影响及机理初探 | 第112-138页 |
| 5.1 前言 | 第112-113页 |
| 5.2 实验材料与试剂 | 第113-114页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第113页 |
| 5.2.2 试剂及配制方法 | 第113-114页 |
| 5.3 实验方法 | 第114-117页 |
| 5.3.1 线虫的培养 | 第114页 |
| 5.3.2 线虫的同期化 | 第114页 |
| 5.3.3 给药组线虫的培养 | 第114-115页 |
| 5.3.4 胁迫条件下花色苷对秀丽线虫的影响 | 第115页 |
| 5.3.5 生理生化指标的测定 | 第115页 |
| 5.3.6 油红O染色 | 第115-116页 |
| 5.3.7 肠道自发荧光的检测 | 第116页 |
| 5.3.8 PMK-1和SKN-1表达量的检测 | 第116页 |
| 5.3.9 基因表达的检测 | 第116页 |
| 5.3.10 数据统计与分析 | 第116-117页 |
| 5.4 结果 | 第117-135页 |
| 5.4.1 MAE对正常培养条件下秀丽线虫的影响 | 第117-119页 |
| 5.4.2 MAE对氧化应激下秀丽线虫的影响 | 第119-126页 |
| 5.4.3 MAE对高糖条件下秀丽线虫的影响 | 第126-135页 |
| 5.5 讨论 | 第135-138页 |
| 6 桑葚花色苷对高糖培养下秀丽线虫基因转录水平的影响 | 第138-154页 |
| 6.1 前言 | 第138页 |
| 6.2 实验材料 | 第138-139页 |
| 6.3 实验方法 | 第139-140页 |
| 6.3.1 秀丽线虫的处理 | 第139页 |
| 6.3.2 转录组测序 | 第139页 |
| 6.3.3 实时定量RT-PCR实验 | 第139页 |
| 6.3.4 数据统计与分析 | 第139-140页 |
| 6.4 结果 | 第140-151页 |
| 6.4.1 测序数据过滤 | 第140页 |
| 6.4.2 参考基因组比对 | 第140-141页 |
| 6.4.3 差异表达基因检测 | 第141-142页 |
| 6.4.4 差异表达基因GO功能分析 | 第142-144页 |
| 6.4.5 差异表达基因Pathway功能分析 | 第144-146页 |
| 6.4.6 高糖环境和MAE对线虫体内基因变化的影响及功能分析 | 第146-150页 |
| 6.4.7 转录组中差异表达基因qRT-PCR的验证 | 第150-151页 |
| 6.5 讨论 | 第151-154页 |
| 7 结论与展望 | 第154-156页 |
| 7.1 结论 | 第154-155页 |
| 7.2 主要创新点 | 第155页 |
| 7.3 展望 | 第155-156页 |
| 参考文献 | 第156-169页 |
| 作者简介 | 第169-170页 |
