| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 中英文缩写对照 | 第9-13页 |
| 1 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 黄曲霉菌及黄曲霉毒素B_1概述 | 第13-18页 |
| 1.1.1 AFB_1的危害及限量标准 | 第13-14页 |
| 1.1.2 AFB_1的理化性质 | 第14-15页 |
| 1.1.3 AFB_1生物合成途径 | 第15-17页 |
| 1.1.4 AFB_1合成的调控 | 第17-18页 |
| 1.2 氧化应激与AFB_1合成 | 第18-21页 |
| 1.2.1 氧化应激刺激AFB_1的合成 | 第18-19页 |
| 1.2.2 氧化应激转录因子对AFB_1合成的调控 | 第19页 |
| 1.2.3 真菌MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)级联通路与氧化应激转录因子对氧化应激的应答 | 第19-21页 |
| 1.3 抗氧化剂对AFB_1的抑制作用研究 | 第21-23页 |
| 1.3.1 抗氧化剂抑制AFB_1的作用 | 第21页 |
| 1.3.2 抗氧化剂抑制AFB_1合成的机理 | 第21-23页 |
| 1.4 研究目的与内容 | 第23-26页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第23-24页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第24-26页 |
| 2 茶多酚中抑制AFB_1合成的主要单体 | 第26-40页 |
| 2.1 引言 | 第26-27页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第27页 |
| 2.2.2 培养基 | 第27页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.4 实验设备 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.3.1 黄曲霉菌种活化与孢子悬浮液制备 | 第28-29页 |
| 2.3.2 茶多酚单体处理后菌丝体干重的测定 | 第29页 |
| 2.3.3 AFB_1含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.3.4 茶多酚单体处理后黄曲霉菌丝体的扫描电镜观察 | 第30页 |
| 2.3.5 茶多酚单体结构的计算方法 | 第30-31页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第31-38页 |
| 2.4.1 茶多酚单体对黄曲霉生长的影响 | 第31-32页 |
| 2.4.2 茶多酚单体对AFB_1合成的影响 | 第32-33页 |
| 2.4.3 茶多酚单体对黄曲霉菌形态的影响 | 第33-34页 |
| 2.4.4 茶多酚单体的几何构型及抑制关系分析 | 第34-37页 |
| 2.4.5 化合物酚羟基带电荷数及抑制关系分析 | 第37页 |
| 2.4.6 化合物的前线轨道分布对抑制AFB_1合成的影响 | 第37-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-40页 |
| 3 EGCG抑制黄曲霉产AFB_1的RNA-Seq分析 | 第40-64页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第40-41页 |
| 3.2.1 实验菌种 | 第40页 |
| 3.2.2 培养基 | 第40页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第40-41页 |
| 3.2.4 实验设备 | 第41页 |
| 3.2.5 数据分析涉及的主要数据库 | 第41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.3.1 黄曲霉孢子悬浮液的培养与RNA-Seq测序样品的培养 | 第41-42页 |
| 3.3.2 黄曲霉RNA-Seq测序样品RNA的提取及质量控制 | 第42页 |
| 3.3.3 cDNA测序文库的制备及质量控制 | 第42-43页 |
| 3.3.4 测序原始数据处理 | 第43-45页 |
| 3.3.5 通过Reads匹配数据确定黄曲霉基因的转录表达水平 | 第45页 |
| 3.3.6 差异表达基因的GO(Gene Ontology Analysis)注释及功能分析 | 第45页 |
| 3.3.7 信号通路分析(Pathway Analysis) | 第45页 |
| 3.4 实验结果 | 第45-62页 |
| 3.4.1 样品总RNA电泳检测与质量评估 | 第45-47页 |
| 3.4.2 RNA-Seq匹配数据统计分析 | 第47-50页 |
| 3.4.3 EGCG作用后黄曲霉基因的差异表达分析 | 第50-51页 |
| 3.4.4 EGCG对黄曲霉毒素合成相关基因转录水平的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.5 差异表达基因的功能聚类 | 第52-61页 |
| 3.4.6 差异表达基因在黄曲霉代谢网络中的功能分析 | 第61-62页 |
| 3.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 4 EGCG抑制黄曲霉产毒的机理研究 | 第64-79页 |
| 4.1 引言 | 第64页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第64-67页 |
| 4.2.1 实验菌种及培养基 | 第64页 |
| 4.2.2 主要试剂及其配制 | 第64-66页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第66-67页 |
| 4.3 实验方法 | 第67-72页 |
| 4.3.1 发酵液中AFB_1的测定 | 第67页 |
| 4.3.2 黄曲霉胞内活性氧(ROS)检测 | 第67页 |
| 4.3.3 黄曲霉NOR含量测定 | 第67-68页 |
| 4.3.4 黄曲霉菌丝体RNA提取与qRT-PCR | 第68-69页 |
| 4.3.5 黄曲霉菌丝体蛋白提取与Western Blot检测蛋白表达 | 第69-72页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第72-78页 |
| 4.4.1 EGCG对AFB_1合成的影响 | 第72-73页 |
| 4.4.2 EGCG对黄曲霉胞内ROS水平的影响 | 第73-74页 |
| 4.4.3 EGCG对NOR合成的影响 | 第74-75页 |
| 4.4.4 EGCG对AFB_1合成相关基因转录水平的影响 | 第75-76页 |
| 4.4.5 EGCG对黄曲霉MAPK通路中SakA表达及磷酸化的影响 | 第76-78页 |
| 4.5 本章小结 | 第78-79页 |
| 5 结论与展望 | 第79-81页 |
| 5.1 结论 | 第79-80页 |
| 5.2 展望 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-91页 |
| 附录A | 第91-92页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第92-94页 |
