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传统发酵乳制品中菌群多样性分析及乳酸菌的分离鉴定

摘要第4-5页
abstract第5页
第一章 综述第9-14页
    1.1 内蒙传统发酵乳第9-10页
        1.1.1 内蒙古地区的地貌特点第9页
        1.1.2 内蒙古地区的发酵乳制品及其种类第9-10页
        1.1.3 内蒙传统发酵乳制品的营养价值第10页
    1.2 传统发酵剂中的优势菌第10-11页
    1.3 菌群多样性的研究方法第11-13页
        1.3.1 细菌常规鉴定法第11页
        1.3.2 16S rDNA基因技术第11-13页
            1.3.3 聚合酶链式反应(PCR) 技术第12页
            1.3.4 扩增性rDNA限制性酶切片段分析(ARDRA)技术第12页
            1.3.5 基因克隆技术第12-13页
    1.4 本论文的研究内容与意义第13-14页
第二章 16S rDNA基因克隆文库法分析内蒙传统发酵乳中菌群多样性第14-32页
    2.1 实验材料第14-16页
        2.1.1 实验样品第14页
        2.1.2 主要培养基第14-15页
        2.1.3 主要仪器第15页
        2.1.4 主要试剂第15-16页
    2.2 实验方法第16-22页
        2.2.1 样品的处理第16页
        2.2.2 总DNA的提取第16-17页
        2.2.3 DNA模板的检测第17页
        2.2.4 16S rDNA片段的PCR扩增第17-18页
        2.2.5 PCR产物的回收纯化第18-19页
        2.2.6 构建细菌 16S rDNA克隆文库第19-21页
            2.2.6.1 回收纯化PCR产物与pMD19-T载体的连接第19页
            2.2.6.2 转化第19-20页
            2.2.6.3 阳性克隆子的筛选第20-21页
        2.2.7 限制性酶切片段技术(ARDRA)分析及克隆文库覆盖率检测第21页
        2.2.8 细菌 16S rDNA片段测序及菌种鉴定第21-22页
    2.3 结果与讨论第22-31页
        2.3.1 细菌基因组DNA提取和 16S rDNA片段的PCR扩增第22页
        2.3.2 16S rDNA片段的PCR扩增第22-23页
        2.3.3 构建细菌 16S rDNA克隆文库及覆盖率第23-26页
        2.3.4 细菌 16S rDNA基因序列分析第26-30页
        2.3.5 测序结果的序列系统发育树分析第30-31页
    2.4 本章小结第31-32页
第三章 18S rDNA基因文库法分析内蒙传统发酵乳中菌群多样性第32-41页
    3.1 实验材料第32页
        3.1.1 实验样品第32页
        3.1.2 主要培养基第32页
        3.1.3 主要仪器第32页
        3.1.4 主要试剂第32页
    3.2 实验方法第32-34页
        3.2.1 样品的处理第32-33页
        3.2.2 总DNA的提取第33页
        3.2.3 DNA模板的检测第33页
        3.2.4 18S rDNA片段的PCR扩增第33页
        3.2.5 PCR产物的回收纯化第33页
        3.2.6 构建真菌 18S rDNA克隆文库第33-34页
            3.2.6.1 回收纯化PCR产物与pMD19-T载体的连接第33页
            3.2.6.2 转化第33页
            3.2.6.3 阳性克隆子的筛选第33-34页
            3.2.6.4 rDNA限制性酶切片段技术(ARDRA)分析及克隆文库覆盖率检测第34页
        3.2.7 真菌 18S rDNA片段测序及菌种鉴定第34页
    3.3 结果与讨论第34-40页
        3.3.1 基因组DNA提取和 18S rDNA片段的PCR扩增第34-36页
        3.3.2 构建真菌 18S rDNA克隆文库及覆盖率第36-38页
        3.3.3 真菌 18S rDNA基因序列分析第38-40页
    3.4 本章小结第40-41页
第四章 内蒙嚼克发酵乳可培养细菌的筛选与鉴定第41-48页
    4.1 实验材料第41-43页
        4.1.1 实验样品第41页
        4.1.2 主要培养基第41页
        4.1.3 主要仪器第41-42页
        4.1.4 主要试剂第42-43页
    4.2 实验方法第43-44页
        4.2.1 细菌的分离纯化第43页
            4.2.1.1 乳酸菌的分离第43页
            4.2.1.2 乳酸菌的纯化第43页
            4.2.1.3 接触酶试验第43页
        4.2.2 细菌的分子生物学鉴定第43-44页
            4.2.2.1 模板DNA的提取第43-44页
            4.2.2.2 16S rDNA的PCR扩增第44页
            4.2.2.3 16S rDNA的序列分析第44页
    4.3 结果与讨论第44-47页
        4.3.1 细菌分离纯化结果第44-45页
        4.3.2 嚼克中细菌镜检结果第45页
        4.3.3 细菌的分子生物学鉴定第45-47页
            4.3.3.1 细菌总DNA的提取第45-46页
            4.3.3.2 16S rDNA的PCR扩增第46-47页
            4.3.3.3 16S rDNA的序列分析第47页
    4.4 本章小结第47-48页
第五章 结论第48-49页
参考文献第49-52页
致谢第52页

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