摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第一章 综述 | 第9-14页 |
1.1 内蒙传统发酵乳 | 第9-10页 |
1.1.1 内蒙古地区的地貌特点 | 第9页 |
1.1.2 内蒙古地区的发酵乳制品及其种类 | 第9-10页 |
1.1.3 内蒙传统发酵乳制品的营养价值 | 第10页 |
1.2 传统发酵剂中的优势菌 | 第10-11页 |
1.3 菌群多样性的研究方法 | 第11-13页 |
1.3.1 细菌常规鉴定法 | 第11页 |
1.3.2 16S rDNA基因技术 | 第11-13页 |
1.3.3 聚合酶链式反应(PCR) 技术 | 第12页 |
1.3.4 扩增性rDNA限制性酶切片段分析(ARDRA)技术 | 第12页 |
1.3.5 基因克隆技术 | 第12-13页 |
1.4 本论文的研究内容与意义 | 第13-14页 |
第二章 16S rDNA基因克隆文库法分析内蒙传统发酵乳中菌群多样性 | 第14-32页 |
2.1 实验材料 | 第14-16页 |
2.1.1 实验样品 | 第14页 |
2.1.2 主要培养基 | 第14-15页 |
2.1.3 主要仪器 | 第15页 |
2.1.4 主要试剂 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-22页 |
2.2.1 样品的处理 | 第16页 |
2.2.2 总DNA的提取 | 第16-17页 |
2.2.3 DNA模板的检测 | 第17页 |
2.2.4 16S rDNA片段的PCR扩增 | 第17-18页 |
2.2.5 PCR产物的回收纯化 | 第18-19页 |
2.2.6 构建细菌 16S rDNA克隆文库 | 第19-21页 |
2.2.6.1 回收纯化PCR产物与pMD19-T载体的连接 | 第19页 |
2.2.6.2 转化 | 第19-20页 |
2.2.6.3 阳性克隆子的筛选 | 第20-21页 |
2.2.7 限制性酶切片段技术(ARDRA)分析及克隆文库覆盖率检测 | 第21页 |
2.2.8 细菌 16S rDNA片段测序及菌种鉴定 | 第21-22页 |
2.3 结果与讨论 | 第22-31页 |
2.3.1 细菌基因组DNA提取和 16S rDNA片段的PCR扩增 | 第22页 |
2.3.2 16S rDNA片段的PCR扩增 | 第22-23页 |
2.3.3 构建细菌 16S rDNA克隆文库及覆盖率 | 第23-26页 |
2.3.4 细菌 16S rDNA基因序列分析 | 第26-30页 |
2.3.5 测序结果的序列系统发育树分析 | 第30-31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 18S rDNA基因文库法分析内蒙传统发酵乳中菌群多样性 | 第32-41页 |
3.1 实验材料 | 第32页 |
3.1.1 实验样品 | 第32页 |
3.1.2 主要培养基 | 第32页 |
3.1.3 主要仪器 | 第32页 |
3.1.4 主要试剂 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-34页 |
3.2.1 样品的处理 | 第32-33页 |
3.2.2 总DNA的提取 | 第33页 |
3.2.3 DNA模板的检测 | 第33页 |
3.2.4 18S rDNA片段的PCR扩增 | 第33页 |
3.2.5 PCR产物的回收纯化 | 第33页 |
3.2.6 构建真菌 18S rDNA克隆文库 | 第33-34页 |
3.2.6.1 回收纯化PCR产物与pMD19-T载体的连接 | 第33页 |
3.2.6.2 转化 | 第33页 |
3.2.6.3 阳性克隆子的筛选 | 第33-34页 |
3.2.6.4 rDNA限制性酶切片段技术(ARDRA)分析及克隆文库覆盖率检测 | 第34页 |
3.2.7 真菌 18S rDNA片段测序及菌种鉴定 | 第34页 |
3.3 结果与讨论 | 第34-40页 |
3.3.1 基因组DNA提取和 18S rDNA片段的PCR扩增 | 第34-36页 |
3.3.2 构建真菌 18S rDNA克隆文库及覆盖率 | 第36-38页 |
3.3.3 真菌 18S rDNA基因序列分析 | 第38-40页 |
3.4 本章小结 | 第40-41页 |
第四章 内蒙嚼克发酵乳可培养细菌的筛选与鉴定 | 第41-48页 |
4.1 实验材料 | 第41-43页 |
4.1.1 实验样品 | 第41页 |
4.1.2 主要培养基 | 第41页 |
4.1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
4.1.4 主要试剂 | 第42-43页 |
4.2 实验方法 | 第43-44页 |
4.2.1 细菌的分离纯化 | 第43页 |
4.2.1.1 乳酸菌的分离 | 第43页 |
4.2.1.2 乳酸菌的纯化 | 第43页 |
4.2.1.3 接触酶试验 | 第43页 |
4.2.2 细菌的分子生物学鉴定 | 第43-44页 |
4.2.2.1 模板DNA的提取 | 第43-44页 |
4.2.2.2 16S rDNA的PCR扩增 | 第44页 |
4.2.2.3 16S rDNA的序列分析 | 第44页 |
4.3 结果与讨论 | 第44-47页 |
4.3.1 细菌分离纯化结果 | 第44-45页 |
4.3.2 嚼克中细菌镜检结果 | 第45页 |
4.3.3 细菌的分子生物学鉴定 | 第45-47页 |
4.3.3.1 细菌总DNA的提取 | 第45-46页 |
4.3.3.2 16S rDNA的PCR扩增 | 第46-47页 |
4.3.3.3 16S rDNA的序列分析 | 第47页 |
4.4 本章小结 | 第47-48页 |
第五章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
致谢 | 第52页 |