低甲醇高总酯酿酒酵母的选育及其应用研究
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-31页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 酒中甲醇概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 甲醇的危害 | 第13页 |
| 1.2.2 酒中甲醇的标准 | 第13-14页 |
| 1.2.3 酒中甲醇的来源及消除方法 | 第14-15页 |
| 1.3 酒中甲醇测定方法 | 第15-18页 |
| 1.3.1 高效液相色谱法 | 第16页 |
| 1.3.2 固定化酶-流动注射分析法 | 第16页 |
| 1.3.3 酶电极法 | 第16页 |
| 1.3.4 激光拉曼光谱法 | 第16-17页 |
| 1.3.5 Fourier 变换红外光谱法 | 第17页 |
| 1.3.6 折射法 | 第17页 |
| 1.3.7 气相色谱法 | 第17-18页 |
| 1.3.8 顶空进样 GC 法 | 第18页 |
| 1.4 酒中总酯概述 | 第18-21页 |
| 1.4.1 浓香型白酒 | 第19页 |
| 1.4.2 酱香型白酒 | 第19-20页 |
| 1.4.3 清香型白酒 | 第20页 |
| 1.4.4 米香型白酒 | 第20页 |
| 1.4.5 凤香型白酒 | 第20-21页 |
| 1.5 酒中总酯测定方法 | 第21-24页 |
| 1.5.1 回流皂化法 | 第21-22页 |
| 1.5.2 静置法 | 第22-23页 |
| 1.5.3 电位滴定法 | 第23页 |
| 1.5.4 色谱法 | 第23-24页 |
| 1.6 菌种的选育 | 第24-29页 |
| 1.6.1 自然选育 | 第24页 |
| 1.6.2 诱变选育 | 第24页 |
| 1.6.3 基因工程 | 第24-25页 |
| 1.6.4 原生质体融合技术 | 第25-29页 |
| 1.7 选择双亲灭活原生质体融合的依据 | 第29-31页 |
| 第二章 出发菌株的性能测定 | 第31-40页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.2.1 菌种与材料 | 第31页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第32页 |
| 2.2.4 培养基 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.3.1 酯香酵母的分离纯化 | 第32页 |
| 2.3.2 甲醇、总酯含量的测定 | 第32-34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-38页 |
| 2.4.1 酯香酵母分离纯化结果 | 第34-35页 |
| 2.4.2 出发菌株相对甲醇含量测定结果 | 第35-37页 |
| 2.4.3 出发菌株总酯含量测定结果 | 第37-38页 |
| 2.4.4 出发菌株发酵结果 | 第38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 原生质体融合技术选育低甲醇高总酯酵母 | 第40-51页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料 | 第40-42页 |
| 3.2.1 菌种 | 第40页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第40-41页 |
| 3.2.3 主要溶液 | 第41页 |
| 3.2.4 主要仪器及设备 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.3.1 单倍体的制备与确认 | 第42-43页 |
| 3.3.2 双亲单倍体原生质体的制备 | 第43页 |
| 3.3.3 双亲单倍体原生质体致死率的测定 | 第43-44页 |
| 3.3.4 单倍体灭活的原生质体融合 | 第44页 |
| 3.3.5 融合菌株的性质测定 | 第44页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第44-50页 |
| 3.4.1 出发菌株子囊孢子的观察 | 第44-45页 |
| 3.4.2 培养时间对子囊孢子形成率的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.3 蜗牛酶作用时间对子囊孢子释放率的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.4 单倍体的确认 | 第47页 |
| 3.4.5 单倍体原生质体的确认 | 第47页 |
| 3.4.6 双亲单倍体原生质体致死率的测定结果 | 第47-48页 |
| 3.4.7 融合子的初筛 | 第48页 |
| 3.4.8 融合子的复筛 | 第48-49页 |
| 3.4.9 融合子传代稳定性的研究 | 第49-50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 融合菌株 PF1 发酵工艺条件的优化 | 第51-69页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料 | 第51-52页 |
| 4.2.1 菌种 | 第51页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第51-52页 |
| 4.2.3 主要溶液 | 第52页 |
| 4.2.4 主要仪器及设备 | 第52页 |
| 4.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.3.1 发酵工艺条件的优化 | 第52-53页 |
| 4.3.2 响应面法优化发酵工艺 | 第53页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第53-68页 |
| 4.4.1 发酵时间的优化 | 第53-54页 |
| 4.4.2 发酵温度的优化 | 第54-55页 |
| 4.4.3 发酵糖度的优化 | 第55-56页 |
| 4.4.4 发酵 pH 值的优化 | 第56-57页 |
| 4.4.5 接种量的优化 | 第57-58页 |
| 4.4.6 响应面分析法确定最优发酵条件 | 第58-68页 |
| 4.5 本章小结 | 第68-69页 |
| 第五章 PF1 制备酒曲在酿酒中的应用 | 第69-80页 |
| 5.1 引言 | 第69页 |
| 5.2 实验材料 | 第69-71页 |
| 5.2.1 菌种及材料 | 第69页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第69-70页 |
| 5.2.3 主要溶液 | 第70页 |
| 5.2.4 主要仪器及设备 | 第70-71页 |
| 5.3 实验方法 | 第71-74页 |
| 5.3.1 麸曲的制备 | 第71-72页 |
| 5.3.2 糖化酶的酶活测定 | 第72-73页 |
| 5.3.3 新型酒曲的制作 | 第73页 |
| 5.3.4 PF1 酒曲半固态大米酿酒结果测定 | 第73-74页 |
| 5.3.5 PF1 酒曲用于不同谷物的酿酒 | 第74页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第74-78页 |
| 5.4.1 麸曲制备结果 | 第74-75页 |
| 5.4.2 糖化酶活力测定结果 | 第75-76页 |
| 5.4.3 PF1 酒曲酶活分析 | 第76页 |
| 5.4.4 PF1 酒曲半固态大米酿酒结果 | 第76-77页 |
| 5.4.5 PF1 酒曲用于不同谷物的酿酒结果 | 第77-78页 |
| 5.5 本章小结 | 第78-80页 |
| 结论与展望 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附件 | 第89页 |
