酒曲中耐酸性淀粉酶产生菌的筛选及酶学特性
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的来源 | 第11-12页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的发酵生产 | 第12-13页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的分离纯化 | 第13页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的理化性质 | 第13-15页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的耐酸性 | 第13-14页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的耐热性 | 第14页 |
| ·金属离子对耐酸性α-淀粉酶稳定性的影响 | 第14页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的 Km 值 | 第14页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的分子性质 | 第14-15页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的应用 | 第15-16页 |
| ·本论文研究的目的及内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·菌种来源 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶产生菌株的分离与筛选 | 第19-21页 |
| ·培养基的配置 | 第19页 |
| ·富集培养基 | 第19页 |
| ·平板分离培养基(淀粉琼脂培养基) | 第19页 |
| ·种子培养基 | 第19页 |
| ·斜面保藏培养基 | 第19页 |
| ·固态产酶培养基 | 第19页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶产生菌株的筛选 | 第19-20页 |
| ·初筛 | 第19-20页 |
| ·复筛 | 第20页 |
| ·酶活的测定方法 | 第20页 |
| ·α-淀粉酶的耐酸性研究 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·菌种的鉴定 | 第21页 |
| ·菌株形态学观察 | 第21页 |
| ·菌株 26S 区域鉴定 | 第21页 |
| ·培养基组成的优化 | 第21-22页 |
| ·培养基组成优化的单因素试验 | 第21-22页 |
| ·培养基加水量的确定 | 第21-22页 |
| ·培养基中麸皮与豆饼的比例的确定 | 第22页 |
| ·培养基中 MgCl_2浓度的确定 | 第22页 |
| ·响应面法对培养基组成的进一步优化 | 第22页 |
| ·固态发酵条件的优化 | 第22-23页 |
| ·pH 值对酶活力的影响 | 第22页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第22-23页 |
| ·装料量对酶活力的影响 | 第23页 |
| ·发酵产酶曲线的确定 | 第23页 |
| ·酸性α-淀粉酶的分离纯化 | 第23-28页 |
| ·酶液的制备 | 第23页 |
| ·酶活的测定方法 | 第23页 |
| ·酶活力定义及换算公式 | 第23页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第23-24页 |
| ·浓缩 | 第24页 |
| ·凝胶层析 | 第24-25页 |
| ·试剂与材料 | 第24页 |
| ·Sephdex G-25 凝胶的预处理 | 第24页 |
| ·装柱 | 第24页 |
| ·上样及洗脱 | 第24-25页 |
| ·浓缩 | 第25页 |
| ·离子交换层析 | 第25-26页 |
| ·试剂和材料 | 第25页 |
| ·装柱 | 第25页 |
| ·加样洗脱 | 第25-26页 |
| ·蛋白含量测定 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26页 |
| ·蛋白质纯度及分子量的检测 | 第26-28页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| ·酶学特性的研究 | 第28-30页 |
| ·酶反应的最适 pH 值及 pH 值稳定性 | 第28页 |
| ·酶反应的最适温度及热稳定性 | 第28页 |
| ·随温度变化的反应速率常数 | 第28-29页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第29页 |
| ·Km 值的测定 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-50页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶产生菌株的筛选 | 第30-32页 |
| ·菌种筛选结果 | 第30-31页 |
| ·26S 区域鉴定 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32页 |
| ·α-淀粉酶的耐酸性研究 | 第32-33页 |
| ·培养基组成的优化 | 第33-39页 |
| ·培养基组成的单因素实验 | 第33-35页 |
| ·加水量对酶活的影响 | 第33-34页 |
| ·麸皮与豆饼比例对酶活的影响 | 第34页 |
| ·MgCl_2浓度对酶活的影响 | 第34-35页 |
| ·响应面法对产酶培养基的优化 | 第35-38页 |
| ·验证性实验 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| ·固态发酵条件的优化 | 第39-42页 |
| ·初始 pH 值对酶活力的影响 | 第39页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第39-40页 |
| ·装料量对酶活力的影响 | 第40-41页 |
| ·发酵产酶曲线的确定 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第42页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的葡聚糖凝胶层析 | 第42-43页 |
| ·耐酸性α-淀粉酶的离子交换层析 | 第43页 |
| ·电泳图谱分析 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44页 |
| ·酶学性质 | 第44-50页 |
| ·最适 pH 值及 pH 值稳定性 | 第44-45页 |
| ·最适温度及热稳定性 | 第45-47页 |
| ·随温度变化的反应速率常数 | 第47-48页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第48页 |
| ·Km 值的确定 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57页 |