摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
1.1 鱼卵简介及其深加工现状 | 第13-14页 |
1.2 鱼卵中卵黄原蛋白的研究进展 | 第14-18页 |
1.2.1 卵黄蛋白的来源 | 第14-15页 |
1.2.2 卵黄蛋白的结构 | 第15-17页 |
1.2.3 卵黄蛋白的生物活性 | 第17-18页 |
1.3 糖蛋白的结构研究进展 | 第18-22页 |
1.3.1 糖蛋白的类型 | 第18-20页 |
1.3.2 糖蛋白的鉴定与糖链解离 | 第20-21页 |
1.3.3 糖链的富集纯化及结构分析 | 第21-22页 |
1.4 选题的立论依据及研究意义 | 第22-23页 |
1.5 本课题的主要研究内容 | 第23-25页 |
第二章 四种鱼卵成分分析及差异蛋白提取方法的比较 | 第25-35页 |
2.1 材料与设备 | 第25-26页 |
2.1.1 材料 | 第25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-29页 |
2.2.1 缓冲盐溶液提取法 | 第26-27页 |
2.2.2 氯化钠溶液提取法 | 第27页 |
2.2.3 考马斯亮蓝染色法测定鱼子总蛋白含量 | 第27页 |
2.2.4 苯酚硫酸法测定鱼子总糖含量 | 第27-28页 |
2.2.5 SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
2.3.1 总蛋白、总糖含量的比较 | 第29-32页 |
2.3.2 SDS-PAGE电泳分离效果的比较 | 第32-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-35页 |
第三章 不同鱼种中差异蛋白的鉴定 | 第35-51页 |
3.1 材料与设备 | 第35-36页 |
3.1.1 材料 | 第35页 |
3.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-37页 |
3.2.1 蛋白质胶条内酶切 | 第36页 |
3.2.2 LC-MS/MS分析 | 第36-37页 |
3.2.3 数据库检索分析与结果 | 第37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-49页 |
3.3.1 鲟鱼卵黄蛋白鉴定结果分析 | 第37-40页 |
3.3.2 黑鱼卵黄蛋白鉴定结果分析 | 第40-41页 |
3.3.3 鲈鱼卵黄蛋白鉴定结果与分析 | 第41-43页 |
3.3.4 鲫鱼卵黄蛋白鉴定结果与分析 | 第43-45页 |
3.3.5 四种鱼卵β'-c蛋白肽段多序列比对 | 第45-47页 |
3.3.6 9种鱼卵黄蛋白原VWFD区域肽段多序列比对 | 第47-48页 |
3.3.7 9种鱼卵黄蛋白原VWFD区域氨基酸组成分析 | 第48-49页 |
3.4 本章小结 | 第49-51页 |
第四章 黑鱼卵糖蛋白的结构鉴定 | 第51-68页 |
4.1 材料与设备 | 第51-52页 |
4.1.1 材料 | 第51页 |
4.1.2 主要试剂 | 第51-52页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第52页 |
4.2 实验方法 | 第52-56页 |
4.2.1 高效液相色谱测定黑鱼卵糖蛋白的纯度 | 第52页 |
4.2.2 PAS染色法鉴定糖蛋白 | 第52-53页 |
4.2.3 PNGase F酶切糖蛋白 | 第53页 |
4.2.4 糖苷键类型的分析 | 第53页 |
4.2.5 气相色谱测定糖蛋白上糖链的单糖组成 | 第53-54页 |
4.2.6 糖蛋白酶切及糖肽的分离纯化 | 第54页 |
4.2.7 糖链酶切及糖链的分离纯化 | 第54-55页 |
4.2.8 糖链甲基化及甲基化后糖链的分离纯化 | 第55页 |
4.2.9 ESI-MS质谱分析糖链结构 | 第55-56页 |
4.2.10 活化部分凝血活酶时间(APPT)测定 | 第56页 |
4.2.11 凝血酶原时间(PT)测定 | 第56页 |
4.2.12 凝血酶时间(TT)测定 | 第56页 |
4.2.13 统计分析 | 第56页 |
4.3 结果与分析 | 第56-66页 |
4.3.1 样品纯度分析 | 第56-57页 |
4.3.2 紫外可见光全波长扫描结果分析 | 第57-58页 |
4.3.3 单糖组分分析 | 第58-60页 |
4.3.4 糖链结构分析 | 第60-64页 |
4.3.5 促凝血活性分析 | 第64-66页 |
4.4 本章小结 | 第66-68页 |
第五章 总结与创新 | 第68-70页 |
5.1 总结 | 第68-69页 |
5.2 实验创新点 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录 | 第78-81页 |
致谢 | 第81-82页 |