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表面展示表达植酸酶、果胶酯酶的重组酿酒酵母构建及酒精发酵研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·酿酒酵母表面展示系统第8-11页
     ·酵母表面展示的原理第8-9页
     ·常见的酵母表面展示系统第9-10页
     ·酵母表面展示系统在酒精生产中的应用第10-11页
   ·燃料酒精的生产第11-12页
     ·燃料酒精的生产原料第11页
     ·淀粉质原料生产燃料酒精的工艺第11-12页
   ·植酸酶第12-13页
   ·果胶酯酶第13-14页
   ·立题意义与研究内容第14-16页
第二章 材料与方法第16-23页
   ·材料第16-17页
     ·菌株和质粒第16页
     ·引物第16页
     ·酶和试剂第16页
     ·培养基和培养条件第16-17页
     ·仪器设备第17页
   ·方法第17-23页
     ·目的基因的扩增第17页
     ·质粒的构建第17-18页
     ·酿酒酵母G418 敏感性实验第18页
     ·酿酒酵母的转化第18-19页
     ·重组菌的筛选第19页
     ·酶活力的测定第19-20页
     ·重组酶酶学性质分析第20页
     ·重组菌的遗传稳定性分析第20页
     ·重组菌生长曲线的测定第20-21页
     ·重组菌三角瓶发酵及上罐发酵实验第21页
     ·总糖的测定第21页
     ·葡萄糖和乙醇的高效液相色谱分析第21页
     ·酒精发酵效率的计算第21页
     ·无机磷含量的测定第21-22页
     ·植酸磷含量的测定第22-23页
第三章 结果与分析第23-45页
   ·植酸酶基因在酿酒酵母细胞表面的表达第23-31页
     ·表面展示载体pMGK-AG-phy的构建第23-24页
     ·酿酒酵母CICIMY0086 的G418 抗性实验第24页
     ·重组酵母S. cerevisiae/p MGK-AG-phy的构建与筛选第24-25页
     ·重组酵母S. cerevisiae/p MGK-AG-phy的植酸酶活性检测第25页
     ·重组酵母PHY的生长曲线测定第25-26页
     ·重组酵母PHY的遗传稳定性第26页
     ·重组植酸酶的酶学性质分析第26-27页
     ·重组酵母PHY玉米粉培养基发酵实验第27-31页
   ·果胶酯酶基因在酿酒酵母细胞表面的表达第31-37页
     ·表面展示载体pMGK-AG-PE的构建第31-32页
     ·重组酵母S. cerevisiae/p MGK-AG-PE的构建与筛选第32-33页
     ·重组酵母S. cerevisiae/p MGK-AG-PE的果胶酯酶活性检测第33页
     ·重组酵母PE的生长曲线测定第33页
     ·重组酵母PE的遗传稳定性第33页
     ·重组果胶酯酶的酶学性质分析第33-35页
     ·重组酵母PE甘薯粉培养基发酵实验第35-37页
   ·植酸酶基因和果胶酯酶基因在酿酒酵母细胞表面的共表达第37-45页
     ·表面展示载体pMGK-AGPE-AGphy的构建第37-39页
     ·重组酵母S. cerevisiae/p MGK-AGPE-AGphy的构建与筛选第39-40页
     ·重组酵母S. cerevisiae/p MGK-AGPE-AGphy的酶活性检测第40页
     ·重组酵母PP的生长曲线测定第40-41页
     ·重组酵母PP的遗传稳定性第41页
     ·重组酵母PP玉米粉和甘薯粉培养基发酵实验第41-45页
主要结论与展望第45-47页
 主要结论第45-46页
 展望第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-51页
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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