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壳聚糖对扩展青霉的抑制作用及其机理的初步研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略词第12-13页
第一章 绪论第13-21页
    1.1 扩展青霉及其危害概述第13-14页
        1.1.1 苹果采后主要病害简介第13页
        1.1.2 扩展青霉简述第13页
        1.1.3 控制果实病害的主要方法介绍第13-14页
    1.2 壳聚糖及其抑菌活性的概述第14-16页
        1.2.1 壳聚糖概述第14-15页
        1.2.2 壳聚糖抑菌规律概述第15-16页
    1.3 壳聚糖采后病害控制中的研究第16-18页
        1.3.1 壳聚糖诱导果蔬抗性概述第16-17页
        1.3.2 壳聚糖对果蔬中木质素的影响第17页
        1.3.3 壳聚糖对果蔬病害的其他防御机制第17-18页
    1.4 壳聚糖抑菌机理的研究概述第18-19页
    1.5 转录组学第19页
    1.6 研究内容与意义第19-21页
第二章 不同分子量壳聚糖对扩展青霉抑菌效应分析第21-25页
    2.1 引言第21页
    2.2 试验试剂与仪器第21-22页
        2.2.1 试验菌种第21页
        2.2.2 培养基第21页
        2.2.3 主要试剂第21-22页
        2.2.4 仪器与设备第22页
    2.3 试验方法第22-23页
        2.3.1 扩展青霉的活化与孢子悬液的制备第22页
        2.3.2 壳聚糖对扩展青霉孢子萌发的影响第22页
        2.3.3 壳聚糖对扩展青霉在PDA上生长的影响第22-23页
        2.3.4 数据分析第23页
    2.4 试验结果与讨论第23-24页
        2.4.1 壳聚糖对扩展青霉孢子萌发的影响第23-24页
        2.4.2 壳聚糖对扩展青霉菌丝生长的影响第24页
    2.5 本章小结第24-25页
第三章 壳聚糖对扩展青霉影响的生化细胞水平的研究第25-35页
    3.1 引言第25页
    3.2 试验试剂与仪器第25-27页
        3.2.1 试验菌种第25页
        3.2.2 培养基第25页
        3.2.3 主要试剂第25-26页
        3.2.4 相关溶液的配制第26页
        3.2.5 仪器与设备第26-27页
    3.3 试验方法第27-29页
        3.3.1 扩展青霉培养及其孢子悬液制备第27页
        3.3.2 壳聚糖对扩展青霉菌丝形态的影响第27页
            3.3.2.1 普通光学显微观察菌丝形态第27页
            3.3.2.2 扫描电镜观察菌丝形态第27页
        3.3.3 壳聚糖对扩展青霉孢子形态的影响第27-28页
        3.3.4 壳聚糖对扩展青霉孢子内部微观结构的影响第28页
        3.3.5 壳聚糖对扩展青霉细胞活性的影响第28-29页
        3.3.6 壳聚糖对扩展青霉孢子细胞膜渗透势的影响第29页
    3.4 试验结果与讨论第29-34页
        3.4.1 壳聚糖对扩展青霉菌丝形态的影响第29-30页
        3.4.2 壳聚糖对扩展青霉孢子形态的影响第30-31页
        3.4.3 壳聚糖对扩展青霉孢子内部微观结构的影响第31-32页
        3.4.4 壳聚糖对孢子活性的影响第32-33页
        3.4.5 壳聚糖对扩展青霉孢子渗透势的影响第33-34页
    3.5 本章小结第34-35页
第四章 从转录组水平研究壳聚糖对扩展青霉孢子的作用机制第35-64页
    4.1 引言第35页
    4.2 试验试剂与仪器第35-37页
        4.2.1 主要试剂第35-36页
        4.2.2 相关溶液的配制第36页
        4.2.3 培养基的配制第36页
        4.2.4 仪器与设备第36-37页
    4.3 试验方法第37-45页
        4.3.1 试验菌种第37页
        4.3.2 扩展青霉的活化与孢子悬液的制备第37页
        4.3.3 样品的收集第37-38页
        4.3.4 样品RNA的提取第38页
        4.3.5 RNA纯度及浓度检测完整性第38页
        4.3.6 文库的构建及质控第38页
        4.3.7 文库测序第38页
        4.3.8 样本生物信息学分析流程第38-39页
        4.3.9 RT-qPCR验证实验第39-42页
            4.3.9.1 选择待验证的差异基因第39页
            4.3.9.2 实时荧光定量PCR引物的设计第39-41页
            4.3.9.3 cDNA第一链合成第41页
            4.3.9.4 实时荧光定量PCR第41-42页
        4.3.10 壳聚糖对孢子内NO含量的影响第42-43页
        4.3.11 壳聚糖跨膜转运及其可能的作用位点第43-44页
            4.3.11.1 壳聚糖的荧光标记第43-44页
            4.3.11.2 壳聚糖作用扩展青霉孢子位点的研究第44页
        4.3.12 壳聚糖与DNA的凝胶阻滞实验第44-45页
            4.3.12.1 扩展青霉菌丝的培养及DNA的提取第44页
            4.3.12.2 壳聚糖对DNA迁移速率的影响第44-45页
    4.4 试验结果与分析第45-63页
        4.4.1 样本RNA提取质量的检测第45页
        4.4.2 转录组测序数据与质量第45-46页
        4.4.3 KOG功能分类注释分析第46-47页
        4.4.4 显著差异基因统计第47-48页
        4.4.5 差异表达基因GO富集分析第48-49页
        4.4.6 差异表达基因KEGG分析第49-52页
        4.4.7 RT-PCR结果分析第52-54页
        4.4.8 差异表达基因和KEGG分析第54-63页
            4.4.8.1 壳聚糖对扩展青霉NO合成通路及NO水平的影响第54-57页
            4.4.8.2 壳聚糖对扩展青霉内吞通路的关联分析第57-61页
            4.4.8.3 壳聚糖对扩展青霉DNA及蛋白合成的影响第61-63页
    4.5 本章小结第63-64页
第五章 结论与展望第64-66页
    5.1 主要结论第64-65页
    5.2 工作展望第65-66页
参考文献第66-79页
致谢第79-80页
在读学位期间发表的论文第80页

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