摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-21页 |
1.1 扩展青霉及其危害概述 | 第13-14页 |
1.1.1 苹果采后主要病害简介 | 第13页 |
1.1.2 扩展青霉简述 | 第13页 |
1.1.3 控制果实病害的主要方法介绍 | 第13-14页 |
1.2 壳聚糖及其抑菌活性的概述 | 第14-16页 |
1.2.1 壳聚糖概述 | 第14-15页 |
1.2.2 壳聚糖抑菌规律概述 | 第15-16页 |
1.3 壳聚糖采后病害控制中的研究 | 第16-18页 |
1.3.1 壳聚糖诱导果蔬抗性概述 | 第16-17页 |
1.3.2 壳聚糖对果蔬中木质素的影响 | 第17页 |
1.3.3 壳聚糖对果蔬病害的其他防御机制 | 第17-18页 |
1.4 壳聚糖抑菌机理的研究概述 | 第18-19页 |
1.5 转录组学 | 第19页 |
1.6 研究内容与意义 | 第19-21页 |
第二章 不同分子量壳聚糖对扩展青霉抑菌效应分析 | 第21-25页 |
2.1 引言 | 第21页 |
2.2 试验试剂与仪器 | 第21-22页 |
2.2.1 试验菌种 | 第21页 |
2.2.2 培养基 | 第21页 |
2.2.3 主要试剂 | 第21-22页 |
2.2.4 仪器与设备 | 第22页 |
2.3 试验方法 | 第22-23页 |
2.3.1 扩展青霉的活化与孢子悬液的制备 | 第22页 |
2.3.2 壳聚糖对扩展青霉孢子萌发的影响 | 第22页 |
2.3.3 壳聚糖对扩展青霉在PDA上生长的影响 | 第22-23页 |
2.3.4 数据分析 | 第23页 |
2.4 试验结果与讨论 | 第23-24页 |
2.4.1 壳聚糖对扩展青霉孢子萌发的影响 | 第23-24页 |
2.4.2 壳聚糖对扩展青霉菌丝生长的影响 | 第24页 |
2.5 本章小结 | 第24-25页 |
第三章 壳聚糖对扩展青霉影响的生化细胞水平的研究 | 第25-35页 |
3.1 引言 | 第25页 |
3.2 试验试剂与仪器 | 第25-27页 |
3.2.1 试验菌种 | 第25页 |
3.2.2 培养基 | 第25页 |
3.2.3 主要试剂 | 第25-26页 |
3.2.4 相关溶液的配制 | 第26页 |
3.2.5 仪器与设备 | 第26-27页 |
3.3 试验方法 | 第27-29页 |
3.3.1 扩展青霉培养及其孢子悬液制备 | 第27页 |
3.3.2 壳聚糖对扩展青霉菌丝形态的影响 | 第27页 |
3.3.2.1 普通光学显微观察菌丝形态 | 第27页 |
3.3.2.2 扫描电镜观察菌丝形态 | 第27页 |
3.3.3 壳聚糖对扩展青霉孢子形态的影响 | 第27-28页 |
3.3.4 壳聚糖对扩展青霉孢子内部微观结构的影响 | 第28页 |
3.3.5 壳聚糖对扩展青霉细胞活性的影响 | 第28-29页 |
3.3.6 壳聚糖对扩展青霉孢子细胞膜渗透势的影响 | 第29页 |
3.4 试验结果与讨论 | 第29-34页 |
3.4.1 壳聚糖对扩展青霉菌丝形态的影响 | 第29-30页 |
3.4.2 壳聚糖对扩展青霉孢子形态的影响 | 第30-31页 |
3.4.3 壳聚糖对扩展青霉孢子内部微观结构的影响 | 第31-32页 |
3.4.4 壳聚糖对孢子活性的影响 | 第32-33页 |
3.4.5 壳聚糖对扩展青霉孢子渗透势的影响 | 第33-34页 |
3.5 本章小结 | 第34-35页 |
第四章 从转录组水平研究壳聚糖对扩展青霉孢子的作用机制 | 第35-64页 |
4.1 引言 | 第35页 |
4.2 试验试剂与仪器 | 第35-37页 |
4.2.1 主要试剂 | 第35-36页 |
4.2.2 相关溶液的配制 | 第36页 |
4.2.3 培养基的配制 | 第36页 |
4.2.4 仪器与设备 | 第36-37页 |
4.3 试验方法 | 第37-45页 |
4.3.1 试验菌种 | 第37页 |
4.3.2 扩展青霉的活化与孢子悬液的制备 | 第37页 |
4.3.3 样品的收集 | 第37-38页 |
4.3.4 样品RNA的提取 | 第38页 |
4.3.5 RNA纯度及浓度检测完整性 | 第38页 |
4.3.6 文库的构建及质控 | 第38页 |
4.3.7 文库测序 | 第38页 |
4.3.8 样本生物信息学分析流程 | 第38-39页 |
4.3.9 RT-qPCR验证实验 | 第39-42页 |
4.3.9.1 选择待验证的差异基因 | 第39页 |
4.3.9.2 实时荧光定量PCR引物的设计 | 第39-41页 |
4.3.9.3 cDNA第一链合成 | 第41页 |
4.3.9.4 实时荧光定量PCR | 第41-42页 |
4.3.10 壳聚糖对孢子内NO含量的影响 | 第42-43页 |
4.3.11 壳聚糖跨膜转运及其可能的作用位点 | 第43-44页 |
4.3.11.1 壳聚糖的荧光标记 | 第43-44页 |
4.3.11.2 壳聚糖作用扩展青霉孢子位点的研究 | 第44页 |
4.3.12 壳聚糖与DNA的凝胶阻滞实验 | 第44-45页 |
4.3.12.1 扩展青霉菌丝的培养及DNA的提取 | 第44页 |
4.3.12.2 壳聚糖对DNA迁移速率的影响 | 第44-45页 |
4.4 试验结果与分析 | 第45-63页 |
4.4.1 样本RNA提取质量的检测 | 第45页 |
4.4.2 转录组测序数据与质量 | 第45-46页 |
4.4.3 KOG功能分类注释分析 | 第46-47页 |
4.4.4 显著差异基因统计 | 第47-48页 |
4.4.5 差异表达基因GO富集分析 | 第48-49页 |
4.4.6 差异表达基因KEGG分析 | 第49-52页 |
4.4.7 RT-PCR结果分析 | 第52-54页 |
4.4.8 差异表达基因和KEGG分析 | 第54-63页 |
4.4.8.1 壳聚糖对扩展青霉NO合成通路及NO水平的影响 | 第54-57页 |
4.4.8.2 壳聚糖对扩展青霉内吞通路的关联分析 | 第57-61页 |
4.4.8.3 壳聚糖对扩展青霉DNA及蛋白合成的影响 | 第61-63页 |
4.5 本章小结 | 第63-64页 |
第五章 结论与展望 | 第64-66页 |
5.1 主要结论 | 第64-65页 |
5.2 工作展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
在读学位期间发表的论文 | 第80页 |