| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文略词与译名 | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-29页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第13-16页 |
| 1.1.1 酯酶 | 第13页 |
| 1.1.2 角质酶 | 第13-14页 |
| 1.1.3 脂肪酶 | 第14-16页 |
| 1.1.4 嗜热真菌及其酯酶 | 第16页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第16-28页 |
| 1.2.1 角质酶的研究现状 | 第16-22页 |
| 1.2.2 脂肪酶的研究现状 | 第22-28页 |
| 1.3 研究目标与内容 | 第28-29页 |
| 第二章 太瑞斯梭孢壳霉角质酶的高效表达、酶学性质与应用 | 第29-45页 |
| 2.1 前言 | 第29页 |
| 2.2 材料与方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 主要仪器与试剂 | 第29-31页 |
| 2.2.2 菌株及载体 | 第31页 |
| 2.2.3 培养基 | 第31页 |
| 2.2.4 角质酶基因的密码子优化 | 第31页 |
| 2.2.5 角质酶基因TtCutopt在P.pastoris中的表达 | 第31-32页 |
| 2.2.6 毕赤酵母高密度发酵 | 第32页 |
| 2.2.7 角质酶酶活力、蛋白含量测定及SDS-PAGE分析 | 第32-33页 |
| 2.2.8 角质酶TtCutopt的纯化 | 第33页 |
| 2.2.9 角质酶TtCutopt的最适pH及pH稳定性 | 第33页 |
| 2.2.10 角质酶TtCutopt的最适温度及温度稳定性 | 第33页 |
| 2.2.11 有机试剂及表面活性剂对角质酶TtCutopt酶活力的影响 | 第33页 |
| 2.2.12 角质酶TtCutopt的底物特异性 | 第33-34页 |
| 2.2.13 角质酶TtCutopt在合成风味酯中的应用 | 第34页 |
| 2.2.14 角质酶TtCutopt在降解邻苯二甲酸酯中的应用 | 第34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-43页 |
| 2.3.1 角质酶基因的密码子优化 | 第34-35页 |
| 2.3.2 角质酶基因TtCutopt在P.pastoris中的表达 | 第35页 |
| 2.3.3 毕赤酵母高密度发酵 | 第35-36页 |
| 2.3.4 角质酶TtCutopt的纯化 | 第36页 |
| 2.3.5 角质酶TtCutopt的最适pH及pH稳定性 | 第36-37页 |
| 2.3.6 角质酶TtCutopt的最适温度及温度稳定性 | 第37-38页 |
| 2.3.7 有机试剂及表面活性剂对角质酶TtCutopt酶活力的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.8 角质酶TtCutopt的底物特异性 | 第39-40页 |
| 2.3.9 角质酶TtCutopt在合成风味酯中的应用 | 第40-41页 |
| 2.3.10 角质酶TtCutopt在降解邻苯二甲酸酯中的应用 | 第41-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-45页 |
| 第三章 樟绒枝霉角质酶的高效表达、性质与应用研究 | 第45-67页 |
| 3.1 前言 | 第45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-50页 |
| 3.2.1 主要仪器与试剂 | 第45页 |
| 3.2.2 菌株及载体 | 第45-46页 |
| 3.2.3 培养基 | 第46页 |
| 3.2.4 樟绒枝霉S168基因组DNA的提取 | 第46页 |
| 3.2.5 樟绒枝霉S168总RNA的提取与mRNA纯化及cDNA第一链合成 | 第46-47页 |
| 3.2.6 角质酶基因McCut的克隆与序列分析 | 第47页 |
| 3.2.7 角质酶基因McCut在P.pastoris中的表达 | 第47-48页 |
| 3.2.8 角质酶酶活力、蛋白含量测定及SDS-PAGE分析 | 第48页 |
| 3.2.9 角质酶McCut的纯化 | 第48页 |
| 3.2.10 角质酶McCut的最适pH及pH稳定性 | 第48页 |
| 3.2.11 角质酶McCut的最适温度及温度稳定性 | 第48页 |
| 3.2.12 有机试剂及表面活性剂对角质酶McCut酶活力的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.13 角质酶McCut的底物特异性及动力学常数 | 第49页 |
| 3.2.14 角质酶McCut降解聚酯的特性 | 第49页 |
| 3.2.15 角质酶McCut的晶体筛选及衍射数据收集 | 第49页 |
| 3.2.16 角质酶McCut的整体结构分析 | 第49-50页 |
| 3.2.17 角质酶McCut在合成风味酯中的应用 | 第50页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第50-64页 |
| 3.3.1 角质酶基因McCut的PCR扩增与序列分析 | 第50-53页 |
| 3.3.2 角质酶基因McCut在P.pastoris中的表达 | 第53页 |
| 3.3.3 毕赤酵母高密度发酵 | 第53-54页 |
| 3.3.4 角质酶McCut的纯化 | 第54页 |
| 3.3.5 角质酶McCut的最适pH及pH稳定性 | 第54-55页 |
| 3.3.6 角质酶McCut的最适温度及温度稳定性 | 第55-56页 |
| 3.3.7 有机试剂及表面活性剂对角质酶McCut酶活力的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.8 角质酶McCut的底物特异性及动力学常数 | 第57-58页 |
| 3.3.9 角质酶McCut降解聚酯的特性 | 第58-59页 |
| 3.3.10 角质酶McCut的晶体筛选及衍射数据收集 | 第59-60页 |
| 3.3.11 角质酶McCut的整体结构分析 | 第60-63页 |
| 3.3.12 角质酶McCut在合成风味酯中的应用 | 第63-64页 |
| 3.4 本章小结 | 第64-67页 |
| 第四章 樟绒枝霉脂肪酶基因的克隆表达及重组酶的性质与应用研究 | 第67-83页 |
| 4.1 前言 | 第67页 |
| 4.2 材料与方法 | 第67-70页 |
| 4.2.1 主要仪器与试剂 | 第67页 |
| 4.2.2 菌株及载体 | 第67页 |
| 4.2.3 培养基 | 第67-68页 |
| 4.2.4 樟绒枝霉S168基因组DNA的提取 | 第68页 |
| 4.2.5 樟绒枝霉S168总RNA的提取与mRNA纯化及cDNA第一链合成 | 第68页 |
| 4.2.6 脂肪酶基因McLip的克隆与序列分析 | 第68页 |
| 4.2.7 脂肪酶基因McLip在P.pastoris中的表达 | 第68-69页 |
| 4.2.8 脂肪酶酶活力、蛋白含量测定及SDS-PAGE分析 | 第69页 |
| 4.2.9 脂肪酶McLip的纯化 | 第69页 |
| 4.2.10 脂肪酶McLip的分子量测定 | 第69页 |
| 4.2.11 脂肪酶McLip的最适pH及pH稳定性 | 第69页 |
| 4.2.12 脂肪酶McLip的最适温度及温度稳定性 | 第69-70页 |
| 4.2.13 化合物及金属离子对脂肪酶McLip酶活力的影响 | 第70页 |
| 4.2.14 脂肪酶McLip的底物特异性 | 第70页 |
| 4.2.15 脂肪酶McLip的位置特异性 | 第70页 |
| 4.2.16 脂肪酶McLip在降解邻苯二甲酸酯中的应用 | 第70页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第70-81页 |
| 4.3.1 脂肪酶基因McLip的PCR扩增与序列分析 | 第70-73页 |
| 4.3.2 脂肪酶基因McLip在P.pastoris中的表达 | 第73-74页 |
| 4.3.3 毕赤酵母高密度发酵 | 第74页 |
| 4.3.4 脂肪酶McLip的纯化 | 第74-75页 |
| 4.3.5 脂肪酶McLip的分子量测定 | 第75-76页 |
| 4.3.6 脂肪酶McLip的最适pH及pH稳定性 | 第76页 |
| 4.3.7 脂肪酶McLip的最适温度及温度稳定性 | 第76-77页 |
| 4.3.8 化合物及金属离子对脂肪酶McLip酶活力的影响 | 第77-78页 |
| 4.3.9 脂肪酶McLip的底物特异性 | 第78-79页 |
| 4.3.10 脂肪酶McLip的位置特异性 | 第79-80页 |
| 4.3.11 脂肪酶McLip在降解邻苯二甲酸酯中的应用 | 第80-81页 |
| 4.4 本章小结 | 第81-83页 |
| 第五章 结论与建议 | 第83-85页 |
| 5.1 结论 | 第83-84页 |
| 5.2 论文创新点 | 第84页 |
| 5.3 建议 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-101页 |
| 附录 | 第101-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 个人简历 | 第107-108页 |
