| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1 微藻及其生物活性概述 | 第15-19页 |
| 1.1 微藻的概述 | 第15-16页 |
| 1.1.1 微藻的培养方式 | 第15-16页 |
| 1.1.2 微藻蛋白的含量与组成 | 第16页 |
| 1.2 微藻多肽的生物学活性 | 第16-18页 |
| 1.2.1 抗氧化活性 | 第16-17页 |
| 1.2.2 抗癌活性 | 第17页 |
| 1.2.3 降血压活性 | 第17页 |
| 1.2.4 抗菌活性 | 第17-18页 |
| 1.2.5 其它生物活性 | 第18页 |
| 1.3 微藻综合应用 | 第18-19页 |
| 1.3.1 功能食品 | 第18页 |
| 1.3.2 医药行业 | 第18页 |
| 1.3.3 生物能源 | 第18-19页 |
| 1.3.4 污水处理 | 第19页 |
| 2 微藻蛋白提取分离鉴定技术概述 | 第19-21页 |
| 2.1 粗提取方法 | 第19-20页 |
| 2.2 分离纯化方法 | 第20-21页 |
| 2.3 分析检测方法 | 第21页 |
| 3 抗菌肽研究概述 | 第21-24页 |
| 3.1 抗菌肽的来源 | 第22-23页 |
| 3.1.1 天然来源的抗菌肽 | 第22页 |
| 3.1.2 基因工程制备抗菌肽 | 第22页 |
| 3.1.3 人工合成的抗菌肽 | 第22-23页 |
| 3.2 抗菌肽的作用机制 | 第23-24页 |
| 3.2.1 SMH模型 | 第23页 |
| 3.2.2 桶板模型 | 第23-24页 |
| 3.2.3 环孔模型 | 第24页 |
| 3.2.4 分子团聚集型 | 第24页 |
| 3.2.5 非膜损伤型 | 第24页 |
| 3.3 抗菌肽的应用前景 | 第24页 |
| 4 课题研究思路及目标 | 第24-27页 |
| 第二章 迦得拟微绿球藻异养培养产单细胞蛋白特性分析 | 第27-37页 |
| 1 前言 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-30页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 藻株 | 第28页 |
| 2.1.2 培养基 | 第28页 |
| 2.1.3 试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-30页 |
| 2.2.1 菌种的活化和扩培 | 第29页 |
| 2.2.2 发酵培养及菌体形态观察 | 第29页 |
| 2.2.3 菌体生物量的测定 | 第29页 |
| 2.2.4 总蛋白含量的测定 | 第29页 |
| 2.2.5 氨基酸全组分的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.6 体积传氧系数(k_La)测定 | 第30页 |
| 2.2.7 湍流漩涡长度(λ)计算 | 第30页 |
| 3 结果与讨论 | 第30-36页 |
| 3.1 迦得微绿球藻异养培养生长状况及氨基酸成分研究 | 第30-32页 |
| 3.2 pH对菌体形态及蛋白质含量的影响 | 第32-34页 |
| 3.3 温度对菌体形态及蛋白质含量的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 搅拌对菌体形态及蛋白质产率的影响 | 第35-36页 |
| 4 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 不同破壁方法对迦得拟微绿球藻蛋白得率的影响 | 第37-46页 |
| 1 前言 | 第37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-40页 |
| 2.1 材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.2 试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.3 仪器 | 第38页 |
| 2.2 方法 | 第38-40页 |
| 2.2.1 细胞破壁 | 第38页 |
| 2.2.2 破壁液中蛋白含量的测定 | 第38-39页 |
| 2.2.3 粗蛋白提取 | 第39页 |
| 2.2.4 显微摄影观察细胞破壁状态 | 第39-40页 |
| 3 结果与讨论 | 第40-44页 |
| 3.1 微藻总蛋白含量和可溶性蛋白含量的测定 | 第40页 |
| 3.2 不同破壁方法对细胞破壁状态的影响 | 第40-41页 |
| 3.3 高压均质压力和循环次数对微藻蛋白得率的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 冻融方式和次数对微藻蛋白得率的影响 | 第42-43页 |
| 3.5 超声功率和次数对微藻蛋白得率的影响 | 第43-44页 |
| 3.6 酶解破壁时间对微藻蛋白得率的影响 | 第44页 |
| 4 小结 | 第44-46页 |
| 第四章 迦得拟微绿球藻蛋白的酶解及抗菌肽的分离纯化 | 第46-54页 |
| 1 前言 | 第46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-49页 |
| 2.1 材料 | 第46-47页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第46页 |
| 2.1.2 试剂 | 第46-47页 |
| 2.1.3 仪器 | 第47页 |
| 2.2 方法 | 第47-49页 |
| 2.2.1 微藻蛋白的提取 | 第47-48页 |
| 2.2.2 微藻蛋白的酶解 | 第48页 |
| 2.2.3 蛋白水解度的测定 | 第48页 |
| 2.2.4 反向高效液相色谱法(RP-HPLC)分离抗菌肽 | 第48-49页 |
| 2.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 | 第49页 |
| 3 结果与讨论 | 第49-53页 |
| 3.1 木瓜蛋白酶对微藻蛋白的时序性水解 | 第49-51页 |
| 3.2 Prep-C18半制备柱分离富集活性组分 | 第51-52页 |
| 3.3 Sepax Bio-C18柱纯化活性肽 | 第52-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 第五章 迦得拟微绿球藻抗菌肽的筛分及结构鉴定 | 第54-61页 |
| 1 前言 | 第54页 |
| 2 材料与方法 | 第54-56页 |
| 2.1 材料 | 第54-55页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 2.1.2 供试菌株 | 第54-55页 |
| 2.1.3 试剂 | 第55页 |
| 2.1.4 仪器 | 第55页 |
| 2.2 方法 | 第55-56页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第55页 |
| 2.2.2 菌悬液制备 | 第55页 |
| 2.2.3 抗菌活性测定 | 第55-56页 |
| 2.2.4 质谱法分析多肽 | 第56页 |
| 3 结果与讨论 | 第56-60页 |
| 3.1 时序性水解产物抑菌活性的分析 | 第56-57页 |
| 3.2 经Prep-C18柱分离后各组分抑菌活性的分析 | 第57页 |
| 3.3 经Sepax Bio-C18柱分离后各组分抑菌活性的分析 | 第57-58页 |
| 3.4 抗菌肽分子量和氨基酸序列的测定 | 第58-60页 |
| 4 小结 | 第60-61页 |
| 第六章 抗菌肽的人工合成及活性的验证 | 第61-66页 |
| 1 前言 | 第61页 |
| 2 材料和方法 | 第61-62页 |
| 2.1 材料 | 第61-62页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 2.1.2 试剂 | 第61页 |
| 2.1.3 仪器 | 第61-62页 |
| 2.2 方法 | 第62页 |
| 2.2.1 多肽的人工合成 | 第62页 |
| 2.2.2 抑菌活性的测定 | 第62页 |
| 3 结果与讨论 | 第62-64页 |
| 3.1 抗菌肽的人工合成及理化性质测定 | 第62页 |
| 3.2 抗菌活性的验证 | 第62-64页 |
| 3.3 抗菌肽应用前景的分析 | 第64页 |
| 4 小结 | 第64-66页 |
| 第七章 结论与展望 | 第66-69页 |
| 1 结论 | 第66-67页 |
| 2 展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 攻读学位期间取得的研究成 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
