| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 芽孢杆菌α-淀粉酶概述 | 第10-14页 |
| 1.1.1 淀粉工业与α-淀粉酶 | 第10-11页 |
| 1.1.2 α-淀粉酶分类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 α-淀粉酶的酶学性质及研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2 α-淀粉酶基因和结构研究 | 第14-17页 |
| 1.2.1 α-淀粉酶的基因图谱 | 第14页 |
| 1.2.2 α-淀粉酶的基因工程研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 α-淀粉酶的结构研究 | 第15-17页 |
| 1.2.4 α-淀粉酶生物分子研究的计算机工具 | 第17页 |
| 1.3 研究背景和意义 | 第17-20页 |
| 第2章 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的分离纯化 | 第20-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 菌种 | 第21页 |
| 2.1.2 培养基 | 第21页 |
| 2.1.3 溶液与试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第22-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 菌株BH072的活化和保存 | 第26页 |
| 2.2.2 发酵培养 | 第26页 |
| 2.2.3 菌体生长曲线的测定 | 第26页 |
| 2.2.4 淀粉酶发酵过程曲线的测定 | 第26页 |
| 2.2.5 淀粉酶酶活测定方法 | 第26-27页 |
| 2.2.6 蛋白质含量的测定方法 | 第27页 |
| 2.2.7 淀粉酶的分离纯化 | 第27-29页 |
| 2.2.8 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.3 实验结果和讨论 | 第29-39页 |
| 2.3.1 解淀粉芽孢杆菌BH072淀粉酶的初步研究 | 第29-33页 |
| 2.3.2 淀粉酶的分离纯化 | 第33-39页 |
| 2.4 小结 | 第39-40页 |
| 第3章 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的酶学性质研究 | 第40-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.1.1 菌种 | 第40页 |
| 3.1.2 培养基 | 第40页 |
| 3.1.3 溶液与试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 淀粉酶酶活测定方法 | 第41页 |
| 3.2.2 蛋白质含量测定方法 | 第41页 |
| 3.2.3 酶的最适pH | 第41页 |
| 3.2.4 酶的pH稳定性 | 第41页 |
| 3.2.5 酶的最适温度 | 第41-42页 |
| 3.2.6 酶的热稳定性 | 第42页 |
| 3.2.7 金属离子对酶活性的影响 | 第42页 |
| 3.2.8 其他化合物对酶活性的影响 | 第42页 |
| 3.2.9 芽孢杆菌淀粉酶对生淀粉的水解效果 | 第42-43页 |
| 3.2.10 酶的水解产物的薄层层析 | 第43页 |
| 3.2.11 解淀粉芽孢杆菌BH072淀粉酶水解特征分析 | 第43页 |
| 3.2.12 芽孢杆菌淀粉酶部分氨基酸序列分析 | 第43-44页 |
| 3.3 实验结果和讨论 | 第44-54页 |
| 3.3.1 酶的最适反应pH和pH稳定性 | 第44-45页 |
| 3.3.2 酶的最适温度和热稳定性 | 第45-46页 |
| 3.3.3 金属离子对酶活的影响 | 第46-48页 |
| 3.3.4 其他化合物对酶活性的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.5 芽孢杆菌淀粉酶对生淀粉的水解效果 | 第49-50页 |
| 3.3.6 芽孢杆菌淀粉酶水解特征分析 | 第50-52页 |
| 3.3.7 酶的水解产物的薄层层析结果分析 | 第52-53页 |
| 3.3.8 芽孢杆菌淀粉酶的部分氨基酸序列分析 | 第53页 |
| 3.3.9 酶源和酶学特性的生物多样性分析 | 第53-54页 |
| 3.4 小结 | 第54-56页 |
| 第4章 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达及序列分析 | 第56-78页 |
| 4.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 4.1.1 菌种与质粒 | 第56-57页 |
| 4.1.2 培养基 | 第57页 |
| 4.1.3 溶液与试剂 | 第57页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第57-58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-62页 |
| 4.2.1 解淀粉芽孢杆菌BH072菌体的培养 | 第58页 |
| 4.2.2 解淀粉芽孢杆菌BH072基因组DNA的提取 | 第58页 |
| 4.2.3 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶基因的扩增 | 第58-59页 |
| 4.2.4 pUC-T-amy072测序质粒的构建及目的基因制备 | 第59-60页 |
| 4.2.5 pET-28a(+)-amy072异源表达质粒的构建 | 第60页 |
| 4.2.6 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第60-61页 |
| 4.2.7 诱导表达产物的SDS-PAGE和酶活性分析 | 第61页 |
| 4.2.8 重组解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的纯化 | 第61页 |
| 4.2.9 重组解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的酶学性质分析 | 第61-62页 |
| 4.2.10 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶基因分析及结构预测 | 第62页 |
| 4.3 实验结果和讨论 | 第62-76页 |
| 4.3.1 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶基因的扩增 | 第62-63页 |
| 4.3.2 pUC-T-amy072测序质粒的构建 | 第63-64页 |
| 4.3.3 pET-28a(+)-amy072异源表达质粒的构建 | 第64-65页 |
| 4.3.4 重组酶基因在大肠杆菌中诱导表达产物的SDS-PAGE和酶活性分析 | 第65-68页 |
| 4.3.5 重组解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的纯化 | 第68页 |
| 4.3.6 重组解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的表达效果分析 | 第68-69页 |
| 4.3.7 重组解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的酶学性质分析 | 第69页 |
| 4.3.8 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的序列分析 | 第69-72页 |
| 4.3.9 解淀粉芽孢杆菌BH072α-淀粉酶的结构预测和分析 | 第72-76页 |
| 4.4 小结 | 第76-78页 |
| 第5章 结论和展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 附录 | 第88-90页 |
| 发表论文与参加科研情况说明 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
