| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 0 引言 | 第12页 |
| 1 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 滚环扩增技术的原理 | 第12-15页 |
| 1.1.1 线性RCA | 第13页 |
| 1.1.2 指数RCA | 第13-14页 |
| 1.1.3 信号扩增RCA | 第14页 |
| 1.1.4 多引物RCA | 第14-15页 |
| 1.2 滚环扩增技术的操作程序及技术要点 | 第15-17页 |
| 1.2.1 模板的选择与引物探针的设计 | 第15页 |
| 1.2.2 酶的选择 | 第15-16页 |
| 1.2.3 模板的制备 | 第16页 |
| 1.2.4 反应体系及程序 | 第16-17页 |
| 1.2.5 RCA产物检测 | 第17页 |
| 1.3 滚环扩增技术的技术特点 | 第17-18页 |
| 1.3.1 RCA技术的优点 | 第17页 |
| 1.3.2 RCA技术的缺点 | 第17-18页 |
| 1.4 滚环扩增技术在检测领域的应用 | 第18-19页 |
| 1.4.1 在核酸测序中的应用 | 第18页 |
| 1.4.2 在SNP检测中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4.3 滚环扩增技术在蛋白质芯片中的应用 | 第19页 |
| 1.4.4 在核酸芯片中的应用 | 第19页 |
| 1.5 恒温扩增技术研究进展 | 第19-21页 |
| 1.5.1 环介导恒温扩增技术 | 第20页 |
| 1.5.2 转录介导的恒温扩增技术 | 第20页 |
| 1.5.3 链代替恒温扩增技术 | 第20-21页 |
| 1.5.4 依赖核酸序列的扩增技术 | 第21页 |
| 1.5.5 依赖解旋酶的恒温扩增技术 | 第21页 |
| 1.6 四种致病菌的概述及其检测国家标准方法的简介 | 第21-27页 |
| 1.6.1 副溶血性弧菌的简介 | 第21页 |
| 1.6.2 副溶血性弧菌检测国家标准方法的简介 | 第21-23页 |
| 1.6.3 单核细胞增生李斯特氏菌的简介 | 第23页 |
| 1.6.4 单核细胞增生李斯特氏菌检测国家标准方法的简介 | 第23-24页 |
| 1.6.5 志贺氏菌的简介 | 第24页 |
| 1.6.6 志贺氏菌检测国家标准方法的简介 | 第24-25页 |
| 1.6.7 小肠结肠炎耶尔森氏菌的简介 | 第25页 |
| 1.6.8 小肠结肠炎耶尔森氏菌检测国家标准方法的简介 | 第25-26页 |
| 1.6.9 有害菌传统检测方法的缺点分析 | 第26-27页 |
| 1.7 本研究的选题依据、意义及研究内容 | 第27-30页 |
| 1.7.1 本课题的选题依据和意义 | 第27-28页 |
| 1.7.2 本课题的主要研究内容 | 第28页 |
| 1.7.3 本课题的实施方案 | 第28-29页 |
| 1.7.4 本课题的创新点 | 第29-30页 |
| 2 RCA快速检测方法的研究 | 第30-50页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30-32页 |
| 2.2.1 标准菌株 | 第30-31页 |
| 2.2.2 培养基和化学试剂 | 第31页 |
| 2.2.3 实验样品 | 第31页 |
| 2.2.4 仪器设备及其他耗材 | 第31页 |
| 2.2.5 培养基的配制 | 第31-32页 |
| 2.2.6 活化标准菌株 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.3.1 锁式探针及其扩增引物的设计 | 第32-33页 |
| 2.3.2 实验菌株的培养 | 第33页 |
| 2.3.3 核酸提取 | 第33页 |
| 2.3.4 锁式探针的连接 | 第33页 |
| 2.3.5 核酸外切酶处理 | 第33-34页 |
| 2.3.6 滚环扩增反应 | 第34页 |
| 2.3.7 滚环扩增检测的特异性测试 | 第34页 |
| 2.3.8 滚环扩增检测的灵敏度 | 第34页 |
| 2.3.9 实际检测中与其他方法的比对 | 第34-35页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第35-48页 |
| 2.4.1 RCA体系的建立 | 第35-37页 |
| 2.4.2 RCA性能检测 | 第37-42页 |
| 2.4.3 实际检测中与其他方法的比对 | 第42-48页 |
| 2.5 本章研究结论 | 第48-50页 |
| 3 RCA检测试剂盒的研究 | 第50-57页 |
| 3.1 引言 | 第50页 |
| 3.2 实验材料 | 第50-51页 |
| 3.2.1 标准菌株 | 第50页 |
| 3.2.2 试剂和原材料 | 第50页 |
| 3.2.3 仪器和设备 | 第50-51页 |
| 3.3 研究方法 | 第51-53页 |
| 3.3.1 RCA试剂盒的组成 | 第51页 |
| 3.3.2 RCA诊断试剂盒的操作说明 | 第51-52页 |
| 3.3.3 RCA试剂盒结果的判定 | 第52页 |
| 3.3.4 RCA试剂盒性能的测试 | 第52页 |
| 3.3.5 在实际应用中与传统方法的比较 | 第52-53页 |
| 3.4 研究结果与分析 | 第53-55页 |
| 3.4.1 RCA试剂盒性能测试结果与分析 | 第53-55页 |
| 3.4.2 在实际应用中与其他检测方法的比较结果与分析 | 第55页 |
| 3.5 本章研究总结 | 第55-57页 |
| 4 研究结论与展望 | 第57-59页 |
| 4.1 研究结论 | 第57-58页 |
| 4.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 个人简历 | 第63-64页 |
| 发表的学术论文 | 第64页 |
| 获奖 | 第64页 |
| 研究成果 | 第64页 |
