摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩写符号说明 | 第11-14页 |
第一章 绪论 | 第14-34页 |
1.1 引言 | 第14页 |
1.2 氧化应激的概述 | 第14-19页 |
1.2.1 氧化应激的形成 | 第14-16页 |
1.2.2 氧化应激的来源 | 第16-17页 |
1.2.3 细胞抗氧化防御系统 | 第17-18页 |
1.2.4 氧化应激的生物标记物 | 第18-19页 |
1.3 肠道炎症概述 | 第19-26页 |
1.3.1 慢性肠道炎症 | 第19-20页 |
1.3.2 炎症性肠病的发病机制 | 第20-22页 |
1.3.3 炎症性肠病中细胞因子的作用 | 第22-24页 |
1.3.4 IBD 动物模型 | 第24-25页 |
1.3.4.1 DSS 诱导的 IBD 模型 | 第24-25页 |
1.3.5 氧化应激与肠道炎症 | 第25-26页 |
1.4 抗氧化应激和抗炎的策略 | 第26-30页 |
1.4.1 食源性活性组分 | 第27-29页 |
1.4.2 生物活性蛋白质和多肽 | 第29-30页 |
1.5 鸡蛋膜蛋白质概述 | 第30-32页 |
1.5.1 鸡蛋膜蛋白质和多肽的制备 | 第30-31页 |
1.5.2 鸡蛋膜蛋白及其多肽的研究现状 | 第31-32页 |
1.6 立题背景和意义 | 第32-33页 |
1.7 本课题主要的研究内容 | 第33-34页 |
第二章 可溶性鸡蛋膜蛋白酶解物的制备及其抗氧化性质的研究 | 第34-48页 |
2.1 引言 | 第34页 |
2.2 材料与方法 | 第34-35页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第34-35页 |
2.2.2 实验仪器 | 第35页 |
2.3 实验方法 | 第35-39页 |
2.3.1 鸡蛋膜蛋白酶解物的制备 | 第35-36页 |
2.3.2 鸡蛋膜蛋白酶解物的超滤 | 第36页 |
2.3.3 氨基酸组成分析 | 第36页 |
2.3.4 鸡蛋膜蛋白酶解物的化学抗氧化活性 | 第36-37页 |
2.3.5 细胞培养 | 第37页 |
2.3.6 细胞抗氧化活性测定 | 第37页 |
2.3.7 氧化应激的诱导 | 第37-38页 |
2.3.8 IL-8 含量测定 | 第38页 |
2.3.9 细胞活力的测定 | 第38页 |
2.3.10 细胞内谷胱甘肽总含量的测定 | 第38-39页 |
2.3.11 数据分析 | 第39页 |
2.4 结果与讨论 | 第39-47页 |
2.4.1 鸡蛋膜蛋白酶解物的制备以及清除自由基能力测定 | 第39-40页 |
2.4.2 鸡蛋膜蛋白酶解物的氨基酸组成 | 第40-41页 |
2.4.3 鸡蛋膜蛋白酶解物的化学抗氧化活性 | 第41-44页 |
2.4.4 鸡蛋膜蛋白酶解物的细胞抗氧化活性 | 第44页 |
2.4.5 鸡蛋膜蛋白酶解物对 H2O2诱导 Caco-2 细胞分泌 IL-8 的抑制作用 | 第44-46页 |
2.4.6 鸡蛋膜蛋白酶解物对细胞内谷胱甘肽含量的影响 | 第46-47页 |
2.5 本章小结 | 第47-48页 |
第三章 鸡蛋膜蛋白酶解物对肠道细胞抵御氧化应激损伤的影响 | 第48-60页 |
3.1 引言 | 第48-49页 |
3.2 材料与仪器 | 第49页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第49页 |
3.2.2 主要仪器 | 第49页 |
3.3 实验方法 | 第49-52页 |
3.3.1 细胞培养和氧化应激的诱导 | 第49-50页 |
3.3.2 脂质氧化测定 | 第50页 |
3.3.3 蛋白质羰基测定 | 第50页 |
3.3.4 GSH 含量、γ-GCS 活性及其 mRNA 表达的检测 | 第50-51页 |
3.3.5 RNA 的提取和反转录 | 第51页 |
3.3.6 荧光实时定量 PCR | 第51页 |
3.3.7 抗氧化酶酶活测定 | 第51-52页 |
3.3.8 统计分析 | 第52页 |
3.4 结果与讨论 | 第52-59页 |
3.4.1 AL-PS 和 AL-PS-I 对脂质和蛋白质氧化作用的影响 | 第52-53页 |
3.4.2 AL-PS 和 AL-PS-I 对 GSH 含量、γ-GCS 活性及其 mRNA 表达的影响 | 第53-56页 |
3.4.3 AL-PS 和 AL-PS-I 对细胞内抗氧化酶活性的影响 | 第56-58页 |
3.4.4 关于 AL-PS-I 抗氧化应激机制的讨论 | 第58-59页 |
3.5 本章小结 | 第59-60页 |
第四章 鸡蛋膜蛋白酶解物体外抗炎活性的研究 | 第60-74页 |
4.1 引言 | 第60-61页 |
4.2 材料与仪器 | 第61页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第61页 |
4.2.2 主要仪器 | 第61页 |
4.3 实验方法 | 第61-63页 |
4.3.1 细胞培养 | 第61页 |
4.3.2 炎症的诱导 | 第61-62页 |
4.3.3 IL-8 含量测定 | 第62页 |
4.3.4 细胞活力的测定 | 第62页 |
4.3.5 RNA 的提取和反转录 | 第62页 |
4.3.6 荧光实时定量 PCR | 第62页 |
4.3.7 蛋白免疫印迹 (Western blot,WB) | 第62-63页 |
4.3.8 数据分析 | 第63页 |
4.4 结果与讨论 | 第63-72页 |
4.4.1 AL-PS 及其超滤分离组分在肠道细胞中的抗炎活性 | 第63-66页 |
4.4.2 AL-PS 及其超滤分离组分在 TNF- -诱导的 Caco-2 细胞和 HT-29 细胞中调节细胞因子 mRNA 表达的作用 | 第66-68页 |
4.4.3 AL-PS 及其超滤分离组分在 LPS 诱导的 Caco-2 细胞和 HT-29 细胞中调节细胞因子 mRNA 表达的作用 | 第68-71页 |
4.4.4 AL-PS 及其超滤分离组分对 NF-κB 信号通路的影响 | 第71-72页 |
4.5 本章小结 | 第72-74页 |
第五章 鸡蛋膜蛋白酶解物体内抗炎活性的研究 | 第74-84页 |
5.1 引言 | 第74-75页 |
5.2 材料和仪器 | 第75页 |
5.2.1 材料 | 第75页 |
5.2.2 仪器 | 第75页 |
5.3 实验方法 | 第75-77页 |
5.3.1 动物实验设计 | 第75页 |
5.3.2 结肠炎临床症状评估 | 第75-76页 |
5.3.3 组织内 TNF- 和 IL-6 浓度的检测 | 第76页 |
5.3.4 MPO 活性检测 | 第76页 |
5.3.5 RNA 的提取和荧光实时定量 PCR | 第76页 |
5.3.6 统计学分析 | 第76-77页 |
5.4 结果与讨论 | 第77-81页 |
5.4.1 AL-PS 对小鼠临床症状的影响 | 第77-78页 |
5.4.2 AL-PS 对促炎细胞因子 TNF- 和 IL-6 含量的影响 | 第78-79页 |
5.4.3 AL-PS 对细胞因子基因表达的影响 | 第79-81页 |
5.5 本章小结 | 第81-84页 |
参考文献 | 第84-104页 |
主要结论 | 第104-106页 |
主要创新点 | 第106-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
攻读博士学位期间发表论文 | 第108-109页 |
附录 | 第109页 |