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海参肠道β-1,3-葡聚糖酶的提取、纯化及其特性的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-19页
   ·海参第10页
     ·海参介绍第10页
     ·海参成分第10页
   ·水产动物消化酶第10-12页
     ·消化酶研究与海参养殖之间的关系第11页
     ·海参消化酶的研究现状第11-12页
   ·β-葡聚糖酶第12-14页
     ·β-葡聚糖酶的来源第12页
       ·植物来源的β-葡聚糖酶第12页
       ·微生物来源的β-葡聚糖酶第12页
       ·动植物来源的β-葡聚糖酶第12页
     ·β-葡聚糖酶的分类及作用方式第12-13页
     ·β-葡聚糖酶的应用第13-14页
       ·在食品工业上的应用第13页
       ·在饲料工业中的应用第13-14页
       ·在基因工程中的应用第14页
   ·β-1,3-葡聚糖酶第14-18页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的分布第14页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的研究现状第14-18页
       ·β-1,3-葡聚糖酶可诱导性的研究第14-15页
       ·β-1,3-葡聚糖酶基因表达调控的研究第15页
       ·β-1,3-葡聚糖酶基因工程方面的研究第15-17页
       ·β-1,3-葡聚糖酶的纯化第17-18页
   ·本课题的主要研究内容第18-19页
第二章 材料与方法第19-30页
   ·实验材料第19-21页
     ·实验原料第19页
     ·主要实验仪器第19-20页
     ·主要实验试剂第20-21页
   ·主要试剂的配制第21-23页
     ·Folin-酚甲液的配制第21页
     ·Folin-酚乙液的配制第21页
     ·蛋白质凝胶电泳试剂的配制第21-22页
     ·考马斯亮兰染色所需试剂第22-23页
     ·活性染色所需试剂第23页
   ·实验方法第23-24页
     ·β-1,3-葡聚糖酶酶活的测定第23页
     ·蛋白质含量的测定第23-24页
     ·非变性凝胶电泳第24页
     ·活性染色第24页
     ·SDS-PAGE电泳第24页
   ·β-1,3-葡聚糖酶提取条件的单因素试验第24-26页
     ·最佳提取缓冲液pH值的确定第25页
     ·最佳提取缓冲液离子强度的确定第25页
     ·最佳提取缓冲液体积的确定第25页
     ·最佳浸提时间确定第25页
     ·β-1,3-葡聚糖酶提取条件的正交试验第25-26页
   ·β-1,3-葡聚糖酶沉淀方法的确定第26-27页
     ·盐析沉淀法第26页
     ·乙醇沉淀法第26页
     ·丙酮沉淀法第26-27页
   ·透析第27页
     ·透析袋的预处理第27页
     ·透析法除硫酸铵第27页
   ·β-1,3-葡聚糖酶沉淀方法的确定第27-28页
     ·DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析第27-28页
     ·Butyl-Sepharose 4 Fast Flow疏水层析第28页
     ·Native-PAGE分离第28页
   ·β-1,3-葡聚糖酶酶学性质的研究第28-30页
     ·酶纯度鉴定及分子量测定”第28页
     ·β-1,3-葡聚糖酶酸碱稳定性”第28页
     ·β-1,3-葡聚糖酶最适反应pH值的确定第28-29页
     ·β-1,3-葡聚糖酶最适反应温度的确定第29页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的热稳定性第29页
     ·金属离子对β-1,3-葡聚糖酶活力的影响第29页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的反应动力学第29-30页
第三章 结果与讨论第30-46页
   ·标准曲线的绘制第30-31页
     ·葡萄糖标准曲线的绘制第30页
     ·Folin-酚标准曲线的绘制第30-31页
   ·海参肠道β-1,3-葡聚糖酶提取条件的研究第31-35页
     ·缓冲液pH值对提取效果的影响第31-32页
     ·NaCl浓度对提取效果的影响第32页
     ·浸提体积对提取效果的影响第32-33页
     ·浸提时间对提取效果的影响第33-34页
     ·海参肠道β-1,3-葡聚糖酶的最佳提取工艺条件第34-35页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的沉淀分离第35-38页
     ·硫酸铵饱和度对分离效果的影响第35-36页
     ·乙醇浓度对分离效果的影响第36-37页
     ·丙酮浓度对分离效果的影响第37页
     ·三种方法沉淀分离β-1,3-葡聚糖酶效果的比较第37-38页
   ·酶的纯化及鉴定第38-40页
     ·DEAE-Sepharose CL-6B阴离子交换层析”第38-39页
     ·Butyl-Sepharose 4 Fast Flow层析第39页
     ·Native-PAGE电泳第39-40页
   ·酶学性质的研究第40-46页
     ·酶的分子量第40-41页
     ·最适反应pH第41-42页
     ·最适反应温度第42页
     ·pH稳定性第42-43页
     ·热稳定性第43-44页
     ·金属离子对酶活力的影响第44页
     ·动力学的研究第44-46页
第四章 结论第46-47页
参考文献第47-53页
致谢第53-54页
附录第54页

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