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海参体壁组织蛋白酶L的分离纯化及酶学性质的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·海参第11-13页
     ·海参概述第11页
     ·海参体壁结构及成分第11-12页
     ·海参的营养成分及其生物活性第12-13页
       ·胶原蛋白第12页
       ·多糖第12-13页
       ·甾醇第13页
       ·其它第13页
   ·自溶和组织自溶酶第13-15页
     ·内源蛋白酶第14页
     ·内源蛋白酶的分类第14页
     ·内源水解酶的作用第14-15页
   ·组织蛋白酶第15-18页
     ·组织蛋白酶的研究进展第15-16页
     ·组织蛋白酶的结构第16-17页
     ·组织蛋白酶的存在形式第17-18页
       ·组织蛋白酶的内源抑制剂复合物形式第17-18页
       ·组织蛋白酶的前体及其活性中间体形式第18页
   ·组织蛋白酶L第18-20页
     ·组织蛋白酶L的特征第18-19页
     ·组织蛋白酶L的研究进展第19-20页
   ·本课题的主要研究思路和内容第20-21页
第二章 材料与方法第21-32页
   ·实验材料第21-24页
     ·实验原料第21页
     ·主要实验仪器第21-22页
     ·主要实验试剂第22-24页
   ·实验方法第24-32页
     ·原料的预处理第24页
     ·蛋白质含量的测定第24-25页
       ·Lowry法测定蛋白质含量第24-25页
       ·紫外分光光度法测定蛋白质含量第25页
     ·组织蛋白酶L酶活力的测定第25-26页
       ·紫外光谱法确定底物标准品NMec的最大吸光度值第25页
       ·荧光光谱法确定NMec最大荧光强度值第25-26页
       ·NMec标准曲线的绘制第26页
       ·酶活力的测定第26页
     ·UV诱导海参自溶过程中体壁组织蛋白酶L活性的变化第26页
     ·组织蛋白酶L提取条件的确定第26-27页
       ·pH和离子强度对组织蛋白酶L提取率的影响第27页
       ·硫酸铵饱和度对组织蛋白酶L提取率的影响第27页
       ·酶液的透析和浓缩第27页
     ·海参体壁组织蛋白酶L的分离纯化第27-28页
       ·DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换层析第28页
       ·Sephadex G-75凝胶层析第28页
       ·TSK-GEL分子排阻色谱第28页
     ·分子量的测定第28-29页
       ·标准曲线的绘制第28-29页
       ·SDS-PAGE电泳第29页
     ·酶学性质的研究第29-30页
       ·最适反应pH的测定第29-30页
       ·最适反应温度的测定第30页
       ·热稳定性测定第30页
       ·金属离子对酶活力的影响第30页
       ·抑制剂和激活剂对酶活力的影响第30页
     ·组织蛋白酶L底物特异性的研究第30页
     ·组织蛋白酶L反应动力学的研究第30-32页
第三章 结果与讨论第32-49页
   ·标准曲线的绘制第32-34页
     ·蛋白质标准曲线的绘制第32页
     ·NMec标准曲线的绘制第32-34页
       ·紫外光谱法确定底物标准品NMec的最大吸光度值第32-33页
       ·荧光光谱法确定NMec的最大荧光强度值第33-34页
       ·NMec标准曲线第34页
   ·UV诱导海参自溶过程中体壁组织蛋白酶L活性的变化第34-35页
   ·组织蛋白酶L提取条件的确定第35-37页
     ·pH和离子强度对组织蛋白酶L提取率的影响第35-36页
     ·硫酸铵饱和度对组织蛋白酶L提取率的影响第36-37页
   ·组织蛋白酶L的分离纯化第37-40页
     ·DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换层析第37-38页
     ·Sephadex G-75凝胶层析第38页
     ·TSK-GEL分子排阻色谱第38-40页
   ·分子量的测定第40-42页
     ·标准曲线的绘制第40页
     ·分子量的测定第40-42页
   ·酶学性质的研究第42-47页
     ·最适反应pH的确定第42-43页
     ·最适反应温度的确定第43-44页
     ·热稳定性的确定第44-45页
     ·金属离子对酶活力的影响第45-46页
     ·抑制剂和激活剂对组织蛋白酶L的作用第46-47页
   ·组织蛋白酶L底物特异性的研究第47页
   ·组织蛋白酶L动力学参数的测定第47-49页
第四章 结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55-56页
附录第56-57页

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