| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1. 文献综述与立题依据 | 第12-21页 |
| ·立题依据 | 第12-13页 |
| ·半胱氨酸蛋白酶抑制因子概述 | 第13-16页 |
| ·Cystatin超家族的分类 | 第13-14页 |
| ·Cystatin超家族的分子结构特征 | 第14-16页 |
| ·Cystatin的纯化鉴定研究进展 | 第16-17页 |
| ·陆生动物来源Cystatin | 第16页 |
| ·鱼类来源的Cystatin的纯化鉴定研究进展 | 第16-17页 |
| ·Cystatin在食品领域的应用 | 第17-20页 |
| ·利用Cystatin抑制鱼糜凝胶软化 | 第17-19页 |
| ·Cystatin作为影响肉质的候选因子 | 第19页 |
| ·Cystatin在鱼卵及幼鱼发育中的作用及与肉质的潜在关系 | 第19-20页 |
| ·Cystatin的生理作用 | 第20-21页 |
| ·研究目的意义及主要研究内容 | 第21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·主要试验试剂 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-36页 |
| ·CPI抑制活性测定 | 第24-27页 |
| ·鲢鱼卵、皮中CPIs活性的比较 | 第27页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第27-28页 |
| ·鲢鱼卵CPIs的层析纯化 | 第28-29页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅰ的鉴定 | 第29-33页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅰ热稳定性pH稳定性抑制常数 | 第33-34页 |
| ·CPI-Ⅰ对鲢鱼cathepsinB及cathepsinL的抑制活性 | 第34页 |
| ·纯化CPIs对鲢鱼鱼糜凝胶软化的抑制作用 | 第34-36页 |
| 3.结果与分析 | 第36-57页 |
| ·papain水解Azocasein的酶反应线性范围确定 | 第36页 |
| ·E-64滴定法确定papain有效浓度 | 第36-37页 |
| ·荧光标品AMC的标准曲线 | 第37-38页 |
| ·鲢鱼卵、皮中CPIs活性含量比较 | 第38-39页 |
| ·鲢鱼卵中CPIs的粗分离提取 | 第39-40页 |
| ·鲢鱼卵CPIs的层析纯化 | 第40-44页 |
| ·Sp Sepharose Fast Flow阳离子交换层析 | 第40页 |
| ·SephacrylS-100分子筛层析 | 第40-41页 |
| ·LH-20反相层析 | 第41-42页 |
| ·Blue Sepharose 6 Fast Flow染料亲和层析 | 第42页 |
| ·Sephacryl S-200分子筛层析 | 第42-43页 |
| ·ConASepharose4B亲和层析 | 第43页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅰ及CPI-Ⅲ的纯化表 | 第43-44页 |
| ·Sephacryl S-100分子筛层析marker的标准曲线及分子量测定 | 第44-46页 |
| ·Sephacryl S-200分子筛层析marker的标准曲线及分子量测定 | 第46-47页 |
| ·鲢鱼卵CPIs的SDS-PAGE反相酶谱及糖蛋白染色分析 | 第47-52页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅰ的SDS-PAGE分析 | 第47-49页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅰ的反相酶谱及糖蛋白染色分析 | 第49页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅲ的SDS-PAGE分析 | 第49-51页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅲ的反相酶谱及糖蛋白染色分析 | 第51-52页 |
| ·鲢鱼卵CPI-Ⅰ热稳定性pH稳定性抑制常数 | 第52-54页 |
| ·CPI-ⅠpH稳定性的测定 | 第52页 |
| ·CPI-Ⅰ热稳定性的测定 | 第52-53页 |
| ·CPI-Ⅰ抑制常数Ki | 第53-54页 |
| ·CPI-Ⅰ对鲢鱼cathepsinB及cathepsinL的抑制活性 | 第54页 |
| ·纯化CPIs对鲢鱼鱼糜凝胶软化的抑制作用 | 第54-57页 |
| ·凝胶破断力测定 | 第54-55页 |
| ·凝胶强度测定 | 第55-56页 |
| ·鱼糜凝胶蛋白质图谱 | 第56-57页 |
| 4.讨论 | 第57-60页 |
| ·关于酶反应线性范围的确定以及E-64滴定确定酶有效浓度 | 第57页 |
| ·关于azocasein法和荧光肽底物法在抑制活性测定中的使用 | 第57-58页 |
| ·关于鲢鱼卵CPI-Ⅰ和CPI-Ⅲ的纯化及性质鉴定 | 第58-59页 |
| ·关于鲢鱼卵CPIs抑制cathepsin B和cathepsin L活性和鱼糜凝胶软化 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
