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应用PCR-DGGE分析高温制曲中细菌群落变化的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-27页
   ·高温大曲简述第8-10页
     ·白酒大曲第8页
     ·高温大曲第8-9页
     ·高温大曲生产工艺简介第9页
     ·高温大曲微生物作用第9-10页
   ·微生物群落结构研究方法综述第10-18页
     ·传统可培养的方法第10-11页
     ·微生物群落水平生理学指纹方法(CLPP)第11页
     ·生物标记方法第11-12页
     ·核酸分析方法第12-17页
     ·元蛋白质组分析第17-18页
   ·变性梯度凝胶电泳技术简介第18-21页
     ·DGGE的基本原理第18页
     ·DGGE技术的应用工作流程第18-19页
     ·DGGE在微生物生态学研究中的应用第19-21页
     ·DGGE技术的缺陷第21页
     ·DGGE在微生物生态学中的应用前景第21页
   ·PCR方法简介第21-23页
     ·PCR技术的基本原理第21-22页
     ·不同策略的PCR技术简介第22-23页
   ·大曲微生物的研究现状及趋势第23-25页
     ·大曲微生物研究现状第23-24页
     ·大曲微生物研究的发展趋势第24-25页
   ·本论文的研究意义及内容第25-27页
     ·本论文的研究意义第25-26页
     ·本论文的研究内容第26-27页
2 材料与方法第27-42页
   ·实验材料第27-31页
     ·高温大曲第27页
     ·主要药品第27-28页
     ·仪器与设备第28页
     ·主要溶液第28-30页
     ·主要培养基第30-31页
   ·实验方法第31-42页
     ·高温大曲性质检测第31-32页
     ·高温大曲中细菌总DNA提取方法选择与优化第32-34页
     ·带GC发卡结构的总细菌V3可变区PCR条件的选择与优化第34-37页
     ·DGGE条件的选择与优化第37-39页
     ·DGGE条带的克隆第39-41页
     ·序列测定和系统发育分析第41-42页
3 结果与讨论第42-61页
   ·制曲过程高温曲理化性质的变化第42-43页
     ·细菌含量的变化第42页
     ·糖化力的变化第42-43页
     ·水分含量的变化第43页
   ·高温大曲中总细菌DNA提取方法的建立第43-46页
     ·不同提取方法对DNA粗提产物质量的影响第43-44页
     ·不同提取方法对DNA粗提物纯度的影响第44-45页
     ·不同提取方法对后期实验适应性的影响第45-46页
   ·带GC发卡结构的总细菌V3可变区PCR条件的选择与优化第46-51页
     ·常规PCR策略对扩增结果的影响第46-48页
     ·降落式PCR对扩增结果的影响第48页
     ·巢式PCR对扩增结果的影响第48-50页
     ·两种策略对DGGE分析的影响第50-51页
   ·DGGE条件的选择与优化第51-52页
     ·变性梯度范围的选择第51-52页
     ·DGGE电泳时间的选择第52页
   ·DGGE分析高温制曲过程中的细菌多样性第52-61页
     ·大曲中细菌总DNA提取结果第52-53页
     ·大曲细菌总16S rDNA V3区巢式PCR扩增结果第53-54页
     ·高温制曲过程DGGE分析第54-55页
     ·DGGE条带的克隆测序结果第55-56页
     ·DGGE条带同源性比较结果第56-58页
     ·系统发育分析第58-61页
4 结论第61-62页
5 展望第62-63页
6 参考文献第63-71页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第71-72页
8 致谢第72页

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