| 摘要 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 1 酸浆多酚 | 第11-12页 |
| 1.1 酸浆简介 | 第11页 |
| 1.2 酸浆研究现状 | 第11页 |
| 1.3 多酚介绍 | 第11页 |
| 1.4 多酚的研究 | 第11-12页 |
| 1.4.1 抗氧化、清除自由基作用 | 第11-12页 |
| 1.4.2 抗肿瘤、抗癌作用 | 第12页 |
| 1.4.3 抗炎作用 | 第12页 |
| 2 炎症简介 | 第12-13页 |
| 3 研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 第一章 酸浆多酚提取工艺条件的优化及其纯化 | 第14-24页 |
| 1 材料与仪器 | 第14-15页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第14页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第14页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第14页 |
| 1.2 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2 试验方法 | 第15-16页 |
| 2.1 标准曲线的绘制以及福林酚法测定总酚含量 | 第15页 |
| 2.2 酸浆果实中多酚的提取及其测定 | 第15页 |
| 2.3 酸浆多酚提取的单因素实验 | 第15页 |
| 2.4 响应面法优化酸浆多酚提取工艺 | 第15-16页 |
| 3 结果与分析 | 第16-23页 |
| 3.1 酸浆多酚的提取单因素实验 | 第16-19页 |
| 3.1.1 乙醇体积分数对酸浆多酚含量的影响 | 第16页 |
| 3.1.2 料液比对酸浆多酚浓度的影响 | 第16-17页 |
| 3.1.3 提取时间对酸浆多酚含量的影响 | 第17-18页 |
| 3.1.4 提取的温度对酸浆多酚含量的影响 | 第18-19页 |
| 3.2 酸浆多酚提取工艺的优化实验 | 第19-23页 |
| 3.2.1 多元二次响应面的建立 | 第19-20页 |
| 3.2.2 方差分析与显著性检验 | 第20-22页 |
| 3.2.3 酸浆多酚提取量响应面分析 | 第22-23页 |
| 4 结论 | 第23页 |
| 5 讨论 | 第23-24页 |
| 第二章 RAW264.7巨噬细胞的培养以及酸浆多酚对其活力的影响 | 第24-30页 |
| 1 材料与仪器 | 第24-25页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第24页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 1.1.2 实验细胞 | 第24页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第24页 |
| 1.2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.1 RAW 264.7巨噬细胞的复苏 | 第25页 |
| 2.2 RAW 264.7巨噬细胞培养、传代 | 第25-26页 |
| 2.3 RAW 264.7巨噬细胞的冻存 | 第26页 |
| 2.4 MTT法检测酸浆多酚对细胞存活率的影响 | 第26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-29页 |
| 3.1 不同浓度酸浆多酚对RAW 264.7巨噬细胞存活率的影响 | 第26-27页 |
| 3.2 不同浓度酸浆多酚对RAW 264.7巨噬细胞生存形态的影响 | 第27-29页 |
| 4 结论 | 第29页 |
| 5 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 酸浆多酚对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子分泌的影响 | 第30-39页 |
| 1 材料与仪器 | 第30-31页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第30页 |
| 1.1.1 实验材料与实验细胞 | 第30页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第30页 |
| 1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-33页 |
| 2.1 实验分组与模型组建 | 第31页 |
| 2.1.1 空白对照组 | 第31页 |
| 2.1.2 阳性对照组 | 第31页 |
| 2.1.3 实验组 | 第31页 |
| 2.2 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞各炎症因子分泌量的测定 | 第31-33页 |
| 2.2.1 酸浆多酚对NO分泌量的测定 | 第31-32页 |
| 2.2.2 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞PGE2、IL-1β、IL-6以及TNF-α分泌量的测定 | 第32-33页 |
| 3 结果分析 | 第33-37页 |
| 3.1 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中NO分泌量的影响 | 第33-34页 |
| 3.2 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中PGE2分泌量的影响 | 第34-35页 |
| 3.3 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中IL-1β分泌量的影响 | 第35-36页 |
| 3.4 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中IL-6分泌量的影响 | 第36-37页 |
| 3.5 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7中TNF-α分泌量的影响 | 第37页 |
| 4 结论 | 第37-38页 |
| 5 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 酸浆多酚对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子相关基因表达的影响 | 第39-55页 |
| 1 材料与仪器 | 第39-40页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第39页 |
| 1.1.1 实验材料与实验细胞 | 第39页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 1.2 主要仪器 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.1 实验分组与模型组建 | 第40页 |
| 2.1.1 空白对照组 | 第40页 |
| 2.1.2 阳性对照组 | 第40页 |
| 2.1.3 实验组 | 第40页 |
| 2.2 RNA的提取与质量鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.1 预处理 | 第40-41页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第41页 |
| 2.2.3 RNA的质量检测 | 第41页 |
| 2.3 逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR) | 第41-43页 |
| 2.3.1 RNA的反转录 | 第41页 |
| 2.3.2 实时定量PCR检测 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-54页 |
| 3.1 RNA质量检测 | 第43页 |
| 3.2 扩增效率分析 | 第43-47页 |
| 3.3 样品扩增动力学曲线和熔解曲线 | 第47-49页 |
| 3.4 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞各炎症因子中mRNA相对表达量的影响 | 第49-54页 |
| 3.4.1 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞iNOS中mRNA相对表达量的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.2 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞COX-2中mRNA相对表达量的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.3 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞IL-1β中mRNA相对表达量的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.4 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞IL-6中mRNA相对表达量的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.5 酸浆多酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞TNF-α中mRNA相对表达量的影响 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54页 |
| 5 讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 酸浆多酚对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症因子相关蛋白表达的影响 | 第55-61页 |
| 1 材料与仪器 | 第55-56页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第55-56页 |
| 1.1.1 实验材料与实验细胞 | 第55页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第55-56页 |
| 1.2 主要仪器 | 第56页 |
| 2 实验方法 | 第56-59页 |
| 2.1 试剂的配制 | 第56页 |
| 2.2 实验分组与模型组建 | 第56-57页 |
| 2.2.1 空白对照组 | 第56页 |
| 2.2.2 阳性对照组 | 第56-57页 |
| 2.2.3 实验组 | 第57页 |
| 2.3 细胞总蛋白的提取与浓度测定 | 第57页 |
| 2.4 Western Blot | 第57-58页 |
| 2.4.1 蛋白样品的制备 | 第57页 |
| 2.4.2 SDS-PAGE凝胶制备 | 第57-58页 |
| 2.4.3 转膜 | 第58页 |
| 2.4.4 封闭与杂交 | 第58页 |
| 2.4.5 显色 | 第58页 |
| 2.5 SDS-PAGE凝胶染色 | 第58-59页 |
| 3 结果分析 | 第59-60页 |
| 4 结论 | 第60页 |
| 5 讨论 | 第60-61页 |
| 全文总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| Abstract | 第66-67页 |
| 致谢 | 第68页 |
