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α-L-鼠李糖苷酶水解柚皮苷制备普鲁宁及固定化酶的研究

摘要第4-5页
abstract第5-6页
第1章 引言第12-19页
    1.1 α-L-鼠李糖苷酶第12-14页
        1.1.1 α-L-鼠李糖苷酶概述第12页
        1.1.2 α-L-鼠李糖苷酶的应用第12-14页
    1.2 底物的固定化第14-16页
        1.2.1 大孔吸附树脂概述第14-15页
        1.2.2 大孔吸附树脂固定化底物的原理第15页
        1.2.3 大孔吸附树脂的应用第15-16页
    1.3 固定化酶的研究现状第16-17页
        1.3.1 固定化工艺简介第16页
        1.3.2 固定化方法第16-17页
        1.3.3 固定化α-L-鼠李糖苷酶第17页
    1.4 本文的研究目的、意义及研究内容第17-19页
        1.4.1 前期研究基础第17页
        1.4.2 本论文研究的目的及意义第17-18页
        1.4.3 本论文的研究内容第18-19页
第2章 柚皮中活性物质提取和分离纯化第19-31页
    2.1 材料与方法第19-22页
        2.1.1 材料和试剂第19页
        2.1.2 主要仪器与设备第19-20页
        2.1.3 实验方法第20-22页
    2.2 结果与分析第22-30页
        2.2.1 柚皮苷标准曲线的绘制第22-23页
        2.2.2 柠檬苦素标准曲线的绘制第23页
        2.2.3 热水煮提结果第23-24页
        2.2.4 大孔吸附树脂筛选结果第24页
        2.2.5 静态吸附等温模型第24-25页
        2.2.6 静态吸附动力学曲线第25页
        2.2.7 树脂添加量的确定第25-26页
        2.2.8 吸附时间的确定第26-27页
        2.2.9 吸附温度的确定第27页
        2.2.10 振荡速率的确定第27-28页
        2.2.11 动态洗脱及纯化结果第28-30页
    2.3 小结第30-31页
第3章 α-L-鼠李糖苷酶法水解柚皮苷工艺第31-47页
    3.1 材料与方法第31-35页
        3.1.1 材料和试剂第31页
        3.1.2 主要仪器及设备第31-32页
        3.1.3 实验方法第32-35页
    3.2 结果与分析第35-46页
        3.2.1 还原糖标准曲线的制作第35页
        3.2.2 助溶剂对柚皮苷酶解过程的影响第35-36页
        3.2.3 加酶量对柚皮苷酶解过程的影响第36页
        3.2.4 底物浓度对柚皮苷酶解过程的影响第36-37页
        3.2.5 pH值对柚皮苷酶解过程的影响第37-38页
        3.2.6 温度对柚皮苷酶解过程的影响第38-39页
        3.2.7 振荡速率对柚皮苷酶解过程的影响第39-40页
        3.2.8 金属离子对柚皮苷酶解过程的影响第40-41页
        3.2.9 不同浓度Mn~(2+)对柚皮苷酶解过程的影响第41页
        3.2.10 不同浓度Fe(2+)对柚皮苷酶解过程的影响第41-42页
        3.2.11 动力学参数的测定及分析第42-43页
        3.2.12 优化工艺验证及1L放大试验第43页
        3.2.13 薄层层析(TLC)检测反应产物的结果分析第43-44页
        3.2.14 HPLC法检测反应产物的结果分析第44-46页
        3.2.15 柚皮苷酶解产物的分离纯化第46页
    3.3 小结第46-47页
第4章 固定化柚皮苷的酶解转化第47-61页
    4.1 材料与方法第47-49页
        4.1.1 材料和试剂第47页
        4.1.2 主要仪器及设备第47页
        4.1.3 实验方法第47-49页
    4.2 结果与分析第49-60页
        4.2.1 固定化柚皮苷树脂载体的选择第49页
        4.2.2 各树脂载体对柚皮苷吸附量的确定第49-50页
        4.2.3 树脂载体固定化柚皮苷的酶催化反应比较第50-51页
        4.2.4 加酶量对酶解反应的影响第51页
        4.2.5 底物浓度对酶解反应的影响第51-52页
        4.2.6 pH对酶解反应的影响第52-53页
        4.2.7 温度对酶解反应的影响第53-54页
        4.2.8 振荡速率对酶解反应的影响第54页
        4.2.9 不同金属离子对酶解反应的影响第54-55页
        4.2.10 不同浓度Mn~(2+)对酶解反应的影响第55-56页
        4.2.11 不同浓度Fe~(2+)对酶解反应的影响第56页
        4.2.12 酶解反应动力学第56-57页
        4.2.13 最优工艺验证和1L放大试验第57-58页
        4.2.14 薄层层析(TLC)检测反应产物的结果分析第58页
        4.2.15 HPLC法检测反应产物的结果分析第58-60页
        4.2.16 柚皮苷酶解产物的分离纯化第60页
    4.3 小结第60-61页
第5章 固定化α-L-鼠李糖苷酶的制备及其酶学性质研究第61-74页
    5.1 材料与方法第61-62页
        5.1.1 主要试剂与药品第61页
        5.1.2 主要仪器及设备第61-62页
        5.1.3 实验方法第62页
    5.2 结果与分析第62-73页
        5.2.1 不同质量浓度PVA-海藻酸钠浓度配比对固定化作用的影响第62-63页
        5.2.2 不同戊二醛浓度对固定化作用的影响第63-64页
        5.2.3 不同戊二醛交联时间对固定化作用的影响第64-65页
        5.2.4 酶的吸附时间对固定化作用的影响第65-66页
        5.2.5 不同加酶量对固定化作用的影响第66页
        5.2.6 不同硼酸、CaCl_2组合对固定化作用的影响第66-67页
        5.2.7 不同pH缓冲液对固定化作用的影响第67-68页
        5.2.8 最优条件下制备固定化酶第68-69页
        5.2.9 游离酶与固定化酶的酶学性质第69-73页
    5.3 小结第73-74页
第6章 结论与展望第74-76页
    6.1 结论第74页
    6.2 展望第74-76页
致谢第76-77页
参考文献第77-83页
在学期间发表的学术论文第83页

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