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乳酸菌自溶酶在自溶中的作用及分子机制研究

博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表第1-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-14页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-28页
   ·乳酸菌概述第15页
   ·发酵乳制品的现状与前景第15-16页
   ·发酵乳制品中的乳酸菌自溶第16-17页
   ·乳酸菌自溶在干酪中的作用第17-18页
   ·乳酸菌自溶的产生机制第18-24页
     ·乳酸菌的细胞壁结构第18-19页
     ·乳酸菌中肽聚糖水解酶第19-23页
     ·PGHs 在乳酸菌自溶中的作用第23-24页
   ·乳酸菌自溶的调控第24-25页
     ·环境条件与自溶的诱导第24-25页
     ·干酪成熟中乳酸菌自溶的控制第25页
   ·本课题研究背景及研究目的第25-26页
   ·本课题研究内容及拟解决问题第26-27页
   ·技术路线图第27-28页
第二章 乳酸菌自溶菌株的筛选第28-37页
   ·引言第28-29页
   ·材料与方法第29-32页
     ·菌株第29页
     ·主要试剂第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·实验方法第30-32页
   ·结果与讨论第32-36页
     ·乳酸菌自溶检测方法的确定第32-34页
     ·不同自溶度乳酸菌的筛选第34-35页
     ·不同自溶菌株在自溶中的形态变化第35-36页
   ·本章小结第36-37页
第三章 乳酸菌自溶的影响因素研究第37-46页
   ·引言第37-38页
   ·材料与方法第38-40页
     ·菌株第38页
     ·主要试剂第38页
     ·主要仪器第38页
     ·实验方法第38-40页
   ·结果与讨论第40-45页
     ·不同生长阶段对乳酸菌自溶的影响第40-41页
     ·不同 pH 对 LJJ 菌株自溶的影响第41-42页
     ·温度对 LJJ 菌株自溶的影响第42页
     ·SDS 对 LJJ 菌株自溶的影响第42-43页
     ·Triton X-100 对 LJJ 菌株自溶的影响第43-44页
     ·扫描电镜观察 SDS 对自溶菌体形态的影响第44-45页
   ·本章小结第45-46页
第四章 自溶酶表达量与乳酸菌自溶间的相互作用关系第46-57页
   ·引言第46页
   ·材料与方法第46-50页
     ·菌株第46页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器第46-47页
     ·实验方法第47-50页
   ·结果与讨论第50-56页
     ·实时定量荧光 RT-qPCR 引物特异性及扩增效率第50-52页
     ·自溶酶在不同生长阶段的表达差异分析第52-54页
     ·不同环境 pH 对自溶酶表达的影响第54-55页
     ·Triton X-100 对自溶酶表达的影响第55-56页
   ·本章小结第56-57页
第五章 N+注入选育干酪乳杆菌突变体中自溶酶表达分析第57-70页
   ·引言第57-58页
   ·材料与方法第58-63页
     ·菌株第58页
     ·主要试剂第58页
     ·主要仪器第58-59页
     ·实验方法第59-63页
   ·结果与讨论第63-69页
     ·N+注入干酪乳杆菌 116-a 的存活率第63-64页
     ·干酪乳杆菌 116-a 突变株的筛选第64-65页
     ·突变菌株的遗传稳定性第65-67页
     ·实时荧光定量 PCR 分析自溶酶表达量第67-68页
     ·自溶酶突变位点的分析第68-69页
   ·本章小结第69-70页
第六章 LJJ 中 N-乙酰胞壁质酶的基因敲除第70-90页
   ·引言第70-71页
   ·材料与方法第71-80页
     ·菌株与质粒第71页
     ·主要试剂第71-72页
     ·主要仪器第72页
     ·试验方法第72-80页
   ·结果与讨论第80-89页
     ·上下游同源臂及红霉素抗性基因的获得第80-81页
     ·敲除重组质粒 pUC19-M1-Emr-M2 的构建第81-85页
     ·响应面法优化保加利亚乳杆菌的电转化条件第85-88页
     ·保加利亚乳杆菌基因敲除菌株的验证第88-89页
   ·本章小结第89-90页
第七章 N-乙酰胞壁质酶缺失保加利亚乳杆菌的生物特性研究第90-96页
   ·引言第90页
   ·材料与方法第90-92页
     ·菌株与质粒第90页
     ·主要试剂第90页
     ·主要仪器第90-91页
     ·实验方法第91-92页
   ·结果与讨论第92-95页
     ·基因缺失菌株与野生型菌株的自溶度第92-93页
     ·基因缺失菌株与野生型菌株的形态的变化第93页
     ·基因缺失菌株与野生型菌株的生长曲线及产酸曲线第93-94页
     ·基因缺失菌株与野生型菌株的贮藏稳定性第94-95页
   ·本章小结第95-96页
第八章 全文结论第96-100页
   ·本课题试验研究总结第96-98页
     ·乳酸菌自溶菌株的筛选第96页
     ·乳酸菌自溶的影响因素研究第96-97页
     ·自溶酶表达量与乳酸菌自溶间的相互作用关系第97页
     ·N+注入选育干酪乳杆菌突变体中自溶酶表达分析第97-98页
     ·基因敲除 LJJ 中 N-乙酰胞壁质酶第98页
     ·缺失 N-乙酰胞壁质酶保加利亚乳杆菌的生物特性研究第98页
   ·全文总结第98-99页
   ·研究展望第99-100页
     ·干酪乳杆菌和保加利亚乳杆菌中溶酶数量第99页
     ·自溶酶与肽聚糖结构第99页
     ·潜在应用价值第99-100页
参考文献第100-114页
致谢第114-115页
作者简历第115-116页

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